北京市科技新星计划(H020821400190)
- 作品数：15 被引量：43H指数：5
- 相关作者：陈彪蔡彦宁刘姝温玫左晓虹更多>>
- 相关机构：首都医科大学宣武医院首都医科大学国家人类基因组北方研究中心更多>>
- 发文基金：北京市科技新星计划北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Per1和Per2基因实时荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立被引量：1
- 2006年
- 蔡彦宁左晓虹刘姝谢淑温玫陈彪
- 关键词：PER1PER2实时荧光聚合酶链反应
- 帕金森病患者尾状核中基因表达谱的研究被引量：7
- 2004年
- 蔡彦宁温玫张愚陈彪
- 关键词：帕金森病尾状核基因表达谱基因芯片神经递质
- 成纤维细胞生长因子受体3基因荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立被引量：2
- 2005年
- 温玫蔡彦宁田娜刘桓陈彪
- 关键词：成纤维细胞生长因子受体荧光定量聚合酶链反应FGFR3基因骨髓白血病标志分子病理检验
- 阿尔茨海默病患者皮质额叶基因表达谱研究被引量：6
- 2004年
- 目的:通过研究阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)患者皮质额叶中发生差异表达的基因,揭示AD发生、发展的分子基础。方法:利用基因芯片分析3例AD患者皮质额叶中基因表达谱,通过与4例正常对照间的比对,寻找存在表达差异的基因。结果:所检测的5000个基因中,共有49个基因存在着差异表达。在患者中13个基因表达水平升高,36个基因表达水平降低。上述基因与多种生理过程,如氧化应激、胆固醇平衡、钙信号转导、炎症反应等密切相关。结论:AD的发生、发展涉及多种基因表达水平和多个生理过程的改变。
- 蔡彦宁温玫左晓虹田娜陈彪
- 关键词：额叶基因表达谱阿尔茨海默病皮质基因表达水平生理过程
- 利用巢式聚合酶链反应检测单个胚胎小体细胞中时钟基因的表达被引量：2
- 2006年
- 目的建立一组灵敏的检测时钟基因(c lock gene)的巢式聚合酶链反应(nested PCR)方法,并检测小鼠胚胎小体(EB)来源的单细胞中重要时钟基因的表达情况。方法培养小鼠胚胎干细胞(mESC),体外诱导分化为EB,提取总RNA并进行反转录,用BMAL1、CLOCK、CRY1和CRY2基因特异引物进行巢式聚合酶链反应,电泳检测扩增产物,从而建立相应的巢式PCR反应体系。利用膜片钳获取胚胎小体来源的单个细胞,通过巢式PCR反应检测相应时钟基因的表达情况。结果确定了BMAL1、CLOCK、CRY1和CRY2基因的扩增参数。证明在此条件下无非特异扩增,并且能够检测到至少两个拷贝的目的分子。利用此检测体系发现,部分胚胎小体细胞中BMAL1、CLOCK、CRY1和CRY2时钟基因环路不完整。结论巢式PCR方法能够灵敏地、而且特异地从单细胞中检测出一组时钟基因的表达,时钟基因的转录在胚胎小体细胞中并不一致,即时钟基因的环路不完整。时钟基因可能在细胞分化过程中发挥着某种作用。
- 关云谦蔡彦宁谢淑朱宛宛徐艳玲张愚陈彪
- 关键词：巢式聚合酶链反应时钟基因单细胞
- 帕金森病患者的睡眠异常被引量：10
- 2006年
- 目的研究帕金森病患者睡眠障碍发生及其特点和影响因素。方法收集患者病史资料并应用多导睡眠仪对10例帕金森病患者及5名健康对照进行多导睡眠监测。受试者分为3组：对照组、帕金森病Hoehn-Yahr（H＆Y）Ⅰ级组及帕金森病H＆YⅡ-Ⅳ级组。每组均包括男性3例，女性2例。结果3组年龄分别为（54．4±5、7）岁、（57．6±14．5）岁、（58．2±10．7）岁，年龄之间的差异无统计学意义（F=0．232，P=0．794）。对照组浅慢波睡眠时间为（70．6±7．8）min，而H＆YⅠ级组患者浅慢波睡眠时间为（81．4±6．1）min，显著高于对照组（P=0.008）；对照组睡眠效率为75、6％±12．8％，快动眼睡眠（REM）潜伏期为（116±48）min，浅慢波睡眠所占比例为70．6％±7、8％，REM所占比例为14．8％±5．5％，总睡眠时间为（372．8±53．4）min，而H＆YⅡ～Ⅳ级组患者睡眠效率43．6％±16．0％（P=0．003）、REM所占比例7．3％±6．1％（P=0．003）及总睡眠时间（244．3±103．2）min（P=0．006）均显著低于对照组，REM睡眠潜伏期（281±86）min（P=0．000）及浅慢波睡眠时间（85．3±7．9）min（P=0．000）显著高于对照组。经相关分析，睡眠潜伏期、浅慢波睡眠时间与疾病病程存在显著正相关（r分别为0．889、o．492；P值分别为0．000、0．006），而睡眠效率、深慢波睡眠时间及总睡眠时间与疾病病程有显著负相关（r分别为-0．626、-0．723、-0．728：P值均为0．000）。结论研究结果显示，帕金森病患者在患病早期已经存在夜间睡眠时间减少、睡眠效率下降、睡眠潜伏期延长及睡眠结构的改变等异常，而且有随疾病进展而加重的趋势。
- 刘姝陈彪蔡彦宁李丽萍王玉平
- 关键词：帕金森病多导睡眠描记术睡眠障碍睡眠结构
- 时钟基因在胚胎干细胞分化为神经元过程中的表达特征被引量：2
- 2007年
- 目的检测小鼠胚胎干细胞(ES)体外向神经元诱导分化过程中,7种重要时钟基因的表达情况。方法小鼠胚胎十细胞(ES),经过5个阶段诱导分化为神经元。各阶段细胞的总 RNA反转录为 cDNA,利用7种时钟基因的特异引物进行 PCR 反应,以明确其随分化表达的情况。结果各个时钟基因无非特异扩增,BMAL1、CLOCK、CRY1和 CRY2、PER1、PER3基因在各个分化阶段中都表达,而 PER2基因只在终末阶段被检测到。结论时钟基因的转录在 ES 细胞向神经元分化的过程中并不一致,提示在成体动物存在的时钟基因环路,在 ES 细胞向神经元分化过程中还没有建立。PER2 仅在分化终末期——大量停止分裂的神经元和胶质细胞出现的时期才转录,提示其可能在细胞增殖过程中发挥某种作用。
- 谢淑蔡彦宁关云谦武文琪徐艳玲张愚陈彪
- 关键词：胚胎干细胞细胞分化神经元节律基因
- MPTP作用下小鼠黑质和纹状体中不同时期基因表达变化被引量：1
- 2007年
- 目的了解帕金森病小鼠模型黑质和纹状体中差异表达的基因以及在MPTP作用后不同时间点基因表达变化的规律。方法取16只SPF级C57BL/6J小鼠,用数字表法随机分为2组。MPTP组:30mg/kgMPTP腹腔注射1次。对照组:注射等量生理盐水。制模后分别在1d和2个月时分离黑质和纹状体。抽提总RNA,利用寡核苷酸芯片分析1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)作用下不同时间点的差异表达基因。结果所检测的1200个基因中,黑质在制模后第1天有13个基因差异表达,2个月时有6个基因差异表达;纹状体中第1天有12个基因差异表达,2个月时有13个基因差异表达。差异表达的基因与多种生理过程,如应激反应、蛋白质磷酸化、蛋白酶体系统、信号转导等密切相关。结论帕金森病的发生、发展过程涉及到多种基因表达水平和多个生理过程的改变。黑质中γ-氨基丁酸通路以及纹状体中蛋白质的磷酸化水平和正确折叠在MPTP小鼠模型中发生了显著变化。
- 蔡彦宁温玫刘姝陈彪
- 关键词：黑质纹状体MPTP
- C57 BL/6J小鼠肝脏中mPer1基因CpG岛甲基化分析
- 2009年
- 目的建立分析C57BL/6J小鼠肝脏组织mPer1基因启动子区甲基化状态的亚硫氢酸修饰法,检测mPer1表达峰、谷对应的甲基化状态。方法利用实时定量PCR方法检测mPer1基因表达时相特点,并利用亚硫氢酸修饰法对小鼠肝脏组织mPer1基因启动子区域CpG岛和E-box甲基化情况进行了研究。结果C57BL/6J小鼠肝脏组织mPer1基因表达有显著波动性,表达高峰位于ZT13,低谷位于ZT01。序列分析显示mPer1基因启动子区含有CpG岛,并且该CpG岛覆盖与mPer1波动性表达密切相关的顺式元件E-box1和E-box2。亚硫氢酸修饰测序结果显示,mPer1基因启动子区CpG岛和E-box均呈低甲基化或非甲基化状态。不同时间点mPer1基因CpG岛甲基化频率无显著变化(P=0.458)。结论肝脏中mPer1基因启动子区CpG岛和E-box均为开放状态,可以与时钟相关转录因子结合。甲基化不参与调节mPer1基因的节律性表达。
- 刘姝蔡彦宁陈彪
- 关键词：CPG岛甲基化实时定量PCR
- C57小鼠肝、肾、脾、胸腺组织时钟基因的表达特点被引量：6
- 2007年
- 目的探测不同脏器组织中时钟基因的表达水平及其波动性。方法用实时荧光定量PCR方法检测C57小鼠肝、肾、脾和胸腺中4种重要时钟基因mBMAL1、mPER1、mCRY1和mCRY2的表达。结果肝和肾中4种时钟基因的表达水平均有显著波动(P<0.01);而脾中仅mBMAL1、mPER1、mCRY1的节律性表达明显(P<0.01,P<0.001,P<0.05),并且波动振幅较为平和;胸腺中4种时钟基因的表达均不具备昼夜波动的特征,同时表达水平也与其他3种组织存在显著差异(P<0.01)。时钟基因所构成的环路在不同组织中也不尽相同,mPER1的负反馈效应在肝中较为主要,mCRY1和mCRY2的负反馈效应在肾和脾中较为主要。结论不同周围组织的分子时钟存在着显著的差异,其相关正负反馈元件和环路有待进一步研究阐明。
- 刘姝蔡彦宁谢淑关云谦陈彪
- 关键词：昼夜节律时钟基因实时荧光定量PCR
