国家自然科学基金(30772768)
- 作品数：8 被引量：59H指数：3
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- 大鼠骨髓间充质干细胞分化成脂肪细胞的定向诱导被引量：22
- 2009年
- 背景:研究表明骨质疏松症可能是间充质干细胞分化失衡后过多地向脂肪细胞分化所致。因此,探讨骨髓间充质干细胞成脂分化的影响因素对骨质疏松症防治具有重要意义。目的:分析骨髓间充质干细胞在体外定向分化为脂肪细胞的适宜诱导条件。设计、时间及地点:以细胞为对象,重复观察测量实验,于2007-10/2008-07在广东医学院药理教研室完成。材料:1月龄SD雄性大鼠由广东医学院实验动物中心提供。方法:无菌条件下分离大鼠股骨,密度梯度离心法与贴壁培养法相结合分离、纯化骨髓间充质干细胞并在体外进行培养。第3代骨髓间充质干细胞完全汇合后,利用内含0.1mmoL/L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、0.1mmoL/L吲哚美辛、1μmoL/L地塞米松、不同浓度胰岛素及胎牛血清的DMEM定向诱导骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞。主要观察指标:①倒置显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态特征。②油红O染色检测骨髓间充质干细胞成脂肪分化情况。结果:①倒置显微镜下观察,传3代后可获得均一性较高的骨髓间充质干细胞。②体积分数为0.05和0.1胎牛血清均能获得较好的成脂分化效果,胎牛血清体积分数增至0.2反而抑制骨髓间充质干细胞成脂分化(P<0.01)。③10mg/L胰岛素可获得较好的成脂分化效果,胰岛素质量浓度提高到20,40mg/L并不能增加骨髓间充质干细胞的成脂分化效果(P>0.05)④低糖(含葡萄糖1g/L)和高糖(含葡萄糖4.5g/L)DMEM对骨髓间充质干细胞的成脂分化无影响(P>0.05)。结论:骨髓间充质干细胞经内含0.1mmoL/L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、10mg/L胰岛素、0.1mmoL/L吲哚美辛、1μmoL/L地塞米松、体积分数为0.1胎牛血清的DMEM分化诱导液定向诱导可获得较好的成脂分化效果。
- 徐道华周晨慧刘钰瑜许碧莲
- 关键词：骨髓间充质干细胞脂肪细胞分化骨质疏松
- 小檗碱对泼尼松性大鼠脑损害的防治作用
- 2011年
- 目的观察超生理剂量醋酸泼尼松致大鼠脑损害的特点,并探讨小檗碱对其的防治作用。方法 50只3月龄雄性SD大鼠,随机分成5组,每组10只,分别给予泼尼松与不同剂量小檗碱12 w,观察大鼠脑匀浆与神经活动有关的酶含量变化,并对脑组织的形态进行计量学分析。结果长期超剂量使用糖皮质激素后,脑匀浆中单胺氧化酶(MAO)含量明显增高(P<0.01);海马CA2区神经元排列无序、分散,有较多的神经细胞变性坏死。小檗碱高、中、低剂量组均可有效预防泼尼松所致的大鼠中枢神经系统功能和结构改变,明显减少糖皮质激素长期应用造成的不良反应。结论长期应用泼尼松可对大鼠造成脑损害,小檗碱对其有较好的预防作用。
- 陈文双张新乐徐道华
- 关键词：小檗碱泼尼松
- 小檗碱对糖皮质激素性骨质疏松大鼠松质骨和皮质骨的影响被引量：17
- 2011年
- 目的探讨小檗碱对糖皮质激素性骨质疏松大鼠腰椎松质骨和胫骨中段皮质骨的影响。方法 3月龄60只♂SD大鼠随机分成正常对照组、泼尼松组、泼尼松加碳酸钙维D组、泼尼松加小檗碱低、中、高剂量组。正常对照组给予溶剂对照溶液,其它5组先用泼尼松3.5 mg.kg-1.d-1造模,然后1 h后分别给予溶剂对照溶液、碳酸钙375 mg.kg-1.d-1加维生素D3 50 U.kg-1.d-1、小檗碱15、30、60 mg.kg-1.d-1。大鼠每次按5 ml.kg-1灌胃给药,连续给药12周。用骨组织形态计量学方法测定大鼠第5腰椎松质骨和胫骨中段皮质骨动、静态参数,并观察腰椎生长板纵向生长荧光标记的变化。结果与正常对照组比较,泼尼松使腰椎松质骨的骨量、骨小梁厚度(Tb.Th)、动态参数降低,使生长板荧光标记间距缩小,使每毫米破骨细胞数(Oc.N)、破骨细胞贴壁周长(Oc.S.Pm)增加。泼尼松使胫骨中段骨组织总面积(T.Ar)、皮质骨面积(Ct.Ar)减少,使皮质骨的骨外膜的骨形成减弱。与泼尼松组比较,碳酸钙维D和小檗碱3个剂量使腰椎松质骨的骨量、Tb.Th和动态参数均增加,使腰椎生长板荧光标记间距增大,使Oc.N、Oc.S.Pm均降低,但对皮质骨无明显影响。结论小檗碱可预防糖皮质激素诱发大鼠腰椎松质骨的骨丢失,其机制可能与促进骨形成和抑制骨吸收有关,但对皮质骨无明显影响。
- 许碧莲徐道华陈文双崔燎
- 关键词：骨质疏松小檗碱骨组织形态计量学松质骨皮质骨
- 小檗碱对糖皮质激素大鼠血脂异常的调节作用被引量：2
- 2010年
- 目的探讨小檗碱对糖皮质激素大鼠血脂异常的调节作用。方法 50只3月龄雄性SD大鼠,随机分成5组,每组10只,分别给予泼尼松与不同剂量小檗碱12周,观察大鼠体质量、血液中血糖、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、钙、磷、丙二醛及超氧化物歧化酶的变化。结果给予泼尼松后大鼠体质量增加减慢,小檗碱可减轻泼尼松所致大鼠体质量增长幅度下降。给予泼尼松12周后,大鼠血液中血糖、甘油三酯、总胆固醇和丙二醛显著升高,高密度脂蛋白胆固醇降低;小檗碱可降低糖皮质激素大鼠血液中血糖、甘油三酯、总胆固醇和丙二醛含量,升高高密度脂蛋白胆固醇,对钙、磷及超氧化物歧化酶无显著影响。结论小檗碱可改善糖皮质激素所致大鼠血脂代谢异常。
- 徐道华周晨慧刘钰瑜许碧莲
- 关键词：小檗碱糖皮质激素血脂
- 小檗碱对骨髓基质干细胞成骨分化的影响
- 目的:探讨小檗碱对骨髓基质干细胞成骨分化的影响。方法:无菌条件下分离大鼠股骨,密度梯度离心法与贴壁培养法相结合分离、纯化骨髓基质干细胞,分为正常对照组,成骨诱导组及小檗碱组。以对硝基苯磷酸为底物检测碱性磷酸酶活性,MTT...
- 徐道华杨玮周晨慧刘钰瑜
- 关键词：骨髓基质干细胞动物
- 文献传递
- 小檗碱对大鼠骨髓间质干细胞成脂分化的抑制作用(英文)被引量：3
- 2011年
- 目的探讨小檗碱对大鼠骨髓间质干细胞成脂分化的影响及其机制。方法经分离纯化的大鼠骨髓间质干细胞,分为正常对照组,成脂分化诱导液(AIM)模型组及AIM+小檗碱0.1,0.3,1和3μmol·L-1组。倒置显微镜下观察细胞的形态特征,油红O染色检测脂肪细胞,以对硝基苯磷酸为底物检测碱性磷酸酶(ALP)活性,MTT法检测细胞存活率,RT-PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ),脂肪酸结合蛋白(aP2)和CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)mRNA表达。结果与正常对照组比较,AIM模型组细胞形成的脂肪细胞明显增加(P<0.01),ALP活性明显降低(P<0.01),PPAR,γaP2和C/EBPαmRNA表达明显增高(P<0.01)。与AIM组比较,AIM+小檗碱显著抑制骨髓间质干细胞成脂分化,小檗碱0.1,0.3,1和3μmol·L-1显著升高ALP活性,分别增加26%,54%,81%和122%;小檗碱3μmol·L-1显著下调PPARγmRNA(0.91±0.10vs1.34±0.06),(P<0.01),aP2 mRNA(1.05±0.10vs1.53±0.09)(P<0.01)和C/EBPαmRNA表达(1.24±0.06vs1.54±0.09)(P<0.01)。小檗碱对骨髓间质干细胞增殖无显著影响。结论小檗碱能够抑制骨髓间质干细胞成脂分化,该作用可能与其下调PPARγmRNA,aP2 mRNA和C/EBPαmRNA表达有关。
- 徐道华杨玮周晨慧刘钰瑜许碧连
- 关键词：间质干细胞脂细胞小檗碱细胞分化
- 探讨Wnt信号通路与MSCs成骨分化
- 2011年
- 间充质干细胞（mesenchymal cells,MSCs）是近年来发现的一种易于扩增、具有多种分化潜能的细胞,在不同的诱导条件下,能够向成骨细胞,成软骨细胞,成肌细胞、脂肪细胞及基质细胞等不同的细胞系分化。MSCs的成骨分化受到多重信号通路的调控,
- 杨玮徐道华
- 关键词：WNT信号通路间充质干细胞成骨性分化骨质疏松
- 红花水提液对老年去卵巢大鼠骨生物力学状况的改善作用被引量：3
- 2010年
- 目的观察红花水提液对老年去卵巢大鼠骨丢失的治疗作用。方法 10月龄SD大鼠行双侧卵巢切除术,术后2个月开始用红花进行治疗,用药2个月后用骨组织形态计量学方法测定第4腰椎松质骨静态参数,应用骨生物力学方法对第5腰椎体作压缩试验。结果红花水提液使去卵巢大鼠骨小梁面积(%Tb.Ar)增加不明显,与去卵巢组相比,差异无统计学意义;但红花水提液可改善去卵巢大鼠椎骨的生物力学状况,表现为能使去卵巢大鼠的破坏荷载、弹性模量和破坏应力增加。结论红花水提液对老年去卵巢大鼠椎骨的生物力学状况有改善作用。
- 刘钰瑜崔燎姚卫民许碧莲吴铁吴怡徐道华
- 关键词：骨生物力学骨组织形态计量学骨质疏松
- 小檗碱对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响被引量：17
- 2010年
- 目的探讨小檗碱对体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法应用MTT法检测不同浓度小檗碱对骨髓间充质干细胞增殖情况的影响,以对硝基苯磷酸盐法检测碱性磷酸酶活性,等离子体直读光谱仪检测钙沉积,放射免疫法检测骨钙素含量,茜素红法染色观察钙化结节形成。结果小檗碱在1×10-9～1×10-5mol.L-1浓度范围对骨髓间充质干细胞增殖无明显影响。小檗碱浓度为1×10-7和1×10-6mol.L-1培养3～7d能明显提高骨髓间充质干细胞内碱性磷酸酶活性。小檗碱在1×10-7～1×10-5mol.L-1浓度范围培养22d能明显促进骨髓间充质干细胞骨钙素合成和分泌。小檗碱在浓度为1×10-6和1×10-5mol.L-1培养28d时钙盐沉积量和钙化结节形成增加。结论小檗碱可促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化,增强骨钙化。这可能为其防治骨质疏松的机制之一。
- 杨玮徐道华周晨慧刘钰瑜戴滨黄洪新
- 关键词：小檗碱骨髓间充质干细胞成骨分化碱性磷酸酶骨钙素钙盐
