国家级星火计划(2011GA890008)
- 作品数：10 被引量：61H指数：4
- 相关作者：冉多良徐全圆杨夷平石明加尔肯更多>>
- 相关机构：新疆农业大学新疆医科大学新疆新姿源生物制药有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家级星火计划新疆维吾尔自治区重大科技专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 新源县孕马蠕虫体内滞留情况调查被引量：15
- 2013年
- 【目的】调查新疆新源县驱虫后的孕马体内蠕虫滞留情况。【方法】采集样品253份,采用虫卵漂浮法和EPG检查法。【结果】孕马总感染率为98.8%,主要感染的虫体有马圆线虫、马副蛔虫、球虫、类圆线虫,感染率分别为90.9%、66.4%、83.4%、20.6%。感染强度(EPG)的检查圆线虫平均466个/g;马副蛔虫平均255个/g,球虫平均312个/g,类圆线虫平均94个/g。【结论】调查数据可为地方孕马寄生虫病的防治及马产业的健康发展提供参考。
- 李佳李永畅冉多良王伟巴音查汗
- 关键词：孕马蠕虫粪检
- 响应面法优化新疆鲜马奶粉冷冻干燥工艺参数被引量：4
- 2013年
- [目的]采用响应面法优化新疆鲜马奶粉冷冻干燥工艺参数。[方法]在真空条件下,以新疆鲜马奶的浓缩比例、厚度、升华干燥时间作为考察因素,马奶粉的堆积密度、流动性及总蛋白含量为考察指标,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken中心组合设计,响应面法优化制备新疆鲜马奶粉冷冻干燥工艺参数。[结果]试验建立了冻干因素与新疆鲜马奶粉质量之间的回归模型;通过响应面分析,得到新疆鲜马奶粉最佳真空冷冻干燥工艺参数为新疆鲜马奶厚度1.02 cm、升华干燥时间24.87 h、浓缩比例27%。[结论]该研究所建模型拟合较好,可为马乳及其产品的产业化提供理论参考。
- 古丽巴哈尔.卡吾力高晓黎常占瑛寇耀红
- 关键词：真空冷冻干燥参数优化
- 马疱疹病毒1型gD基因主要中和抗原区原核表达载体的构建和表达被引量：5
- 2013年
- 根据GenBank上已发表的马疱疹病毒1型(EHV-1)和马疱疹病毒4型(EHV-4)gD基因序列,设计一对特异性引物。将扩增的EHV-1gD基因片段克隆至pET-30a表达载体,筛选获得重组质粒pET-30a-gD。经鉴定证明pET-30a-gD原核载体构建成功。将其转化入BL-21大肠杆菌中用IPTG进行诱导表达,并对培养时间、IPTG诱导浓度等培养条件进行优化,收集菌液进行SDS-PAGE检测,结果显示pET-30a-gD获得了高效融合表达,其表达的蛋白分子量约为29kD。Western blot分析结果表明,显示获得的融合蛋白与EHV-1/EHV-4阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫原性。
- 孙建华何晶石明徐全圆杨夷平冉多良
- 关键词：原核表达GD基因
- H3N8亚型马流感病毒HA1基因原核表达载体的构建及表达被引量：3
- 2013年
- 采用RT-PCR方法从马流感病毒中国分离株A/马/新疆/07(H3N8)中扩增的HA1基因片段,将其克隆到表达载体pET-28a(+)中,测序正确后转化入Rosetta(DE3)中进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌表达出约53ku,以沉淀性形式存在的重组蛋白,且在37℃,0.4mmol/L IPTG条件下诱导8h表达效果最好。表达产物经切胶纯化后得到纯度较高的目的蛋白。经Western-blot分析,表达的蛋白与抗马流感病毒阳性血清发生特异性反应,证实该蛋白具有良好的反应原性。
- 何晶马伟孙建华徐泉源冉多良
- 关键词：H3N8亚型马流感病毒HA1基因克隆原核表达
- 马腺疫链球菌FNE基因的克隆及原核表达被引量：2
- 2014年
- 采用PCR方法从马腺疫链球菌新疆分离株中扩增FNE基因片段,克隆至pMD19-T载体。利用分子生物学软件分析测序结果,将FNE截短基因亚克隆至原核表达载体pET-30a中,转化到大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG诱导FNE重组蛋白的表达,用SDS-PAGE和Western blot法分析蛋白表达及其反应原性。序列分析显示,其与GenBank收录的马腺疫链球菌4047(登录号YP002747216)核苷酸序列和氨基酸序列同源性均为99%。采用PCR法扩增到675bp的FNE截短基因片段构建重组表达载体获得重组蛋白,经SDS-PAGE分析在46ku处出现明显条带,Western blot分析显示具有反应原性。成功克隆和表达了马腺疫链球菌的FNE截短基因,为重组FNE蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 徐全圆刘建华苏艳加尔肯王世民冉多良
- 关键词：原核表达
- 新疆鲜马奶粉的抗疲劳作用研究被引量：4
- 2013年
- [目的]探索新疆鲜马奶粉抗疲劳作用。[方法]192只雄性SPF级昆明种小鼠被随机分为正常对照组、新疆鲜马奶粉高剂量组、新疆鲜马奶粉中剂量组、低剂量组,连续灌胃45 d后分别测定游泳时间、爬杆时间、血清尿素氮含量、血乳酸含量、血乳酸脱氢酶活力和肝糖原含量。[结果]新疆鲜马奶粉高剂量组小鼠游泳时间为(28.6±0.69)min,较正常对照组明显延长;新疆鲜马奶粉高剂量组爬杆时间为(36.8±0.12)min,较正常组明显延长。新疆鲜马奶粉高剂量组肝糖原含量为(28.24±3.36)mg/g,较正常对照组明显增加,血清尿素氮含量为(2.69±0.36)mmol/L,较正常对照组显著减少(P<0.05)。血清乳酸脱氢酶活力为(548.33±58.8)U/L,较正常对照组明显提高。血乳酸含量为(28.84±5.64)mmol/L,较正常组明显减少。[结论]新疆鲜马奶粉具有抗疲劳作用。
- 古丽巴哈尔.卡吾力高晓黎王玲
- 关键词：抗疲劳小鼠
- 马胎盘提取物对淋巴细胞的免疫调节作用被引量：3
- 2013年
- 采用MTT法测定不同浓度马胎盘提取物(EPE)对正常、ConA和LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖活性以及NK细胞杀伤活性的影响;并用氨基酸自动分析仪检测马胎盘提取物中氨基酸的含量。MTT实验结果表明:马胎盘提取物(187.5～750μg/mL)明显增强正常淋巴细胞的活性;23.44～1500μg/mL明显抑制ConA诱导的T淋巴细胞增殖活性,750～1500μg/mL明显抑制LPS诱导的B淋巴细胞增殖活性,其对ConA诱导的T淋巴细胞增殖的抑制作用强于对LPS诱导的B淋巴细胞增殖的抑制作用;93.75～500μg/mL明显增强NK细胞对PC-3癌细胞的杀伤活性;氨基酸含量分析表明:其含有丰富的氨基酸,其中谷氨酸(7.53%)、天门冬氨酸(5.64%)和亮氨酸(5.54%)含量较高。因此马胎盘提取物对淋巴细胞可能具有一定的免疫调节作用。
- 王晓然高晓黎王春梅罗俊徐智勇
- 关键词：淋巴细胞增殖NK细胞杀伤活性MTT氨基酸
- 马链球菌马亚种FNEB蛋白的截短表达及其免疫保护性研究被引量：11
- 2015年
- 为研究马链球菌马亚种FNEB蛋白的免疫保护性,本研究采用PCR方法从马链球菌马亚种新疆分离株中扩增FNEB基因部分片段,克隆于原核表达载体p ET-30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和western blot分析显示,重组蛋白大小约60 ku,具有良好的抗原性。将纯化的重组蛋白免疫小鼠后,以马链球菌马亚种新疆分离株进行攻毒,结果显示该重组蛋白对免疫组小鼠具有保护力,保护率为65%。本研究克隆了马链球菌马亚种的FNEB截短基因并表达了相应重组蛋白,免疫小鼠后能够提供较好的保护,为重组FNEB蛋白亚单位疫苗的研制奠定基础。
- 徐全圆石明杨夷平李娜刘建华加尔肯冉多良
- 关键词：原核表达
- 新疆部分地区马鼻肺炎的血清学调查被引量：15
- 2014年
- 为了解新疆马鼻肺炎(ER)的流行情况,利用间接酶联免疫吸附试验(I-ELISA)对2012年—2013年采自新疆5个地区的3 195份马血清进行马鼻肺炎血清学流行病学调查。结果显示,3 195份马血清中共检出阳性血清1 237份,平均阳性率为38.71%,其中,马鼻肺炎在秋季的阳性率最高(45.85%),其次是夏季的阳性率(43.44%),冬季的阳性率最低(19.32%)。而且,XJ-C地2013年马鼻肺炎的阳性率显著低于2012年(P<0.01)。此次调查数据可为新疆马鼻肺炎的防控工作及马产业的健康发展提供参考。
- 李娜孙建华石明徐全圆杨夷平刘建华加尔肯冉多良
- 关键词：马鼻肺炎血清流行病学调查间接ELISA
- 应用离子对反相高效液相色谱法测定动物肝脏中APS和PAPS的含量
- 2014年
- [目的]建立适于动物肝脏中APS和PAPS含量测定的离子对反相高效液相色谱法,测定几种动物肝脏中APS和PAPS的含量.[方法]色谱条件：Ultimate AQ-C18反相色谱柱;流动相100mM KH2PO4,1mM四丁基氢氧化铵和甲醇,用4M的氢氧化钾调节pH至7.4;流速1 mL/min,上样量为10 μL,柱温25℃,检测波长254 nm.[结果]动物肝脏中APS含量（nmol/g）：羊：2.4-21.3;牛：0.9-1.1;马：1.4 -3.5;猪：1.4 -6.7;大鼠：9.5 -21.1.动物肝脏中PAPS含量（nmol/g）：羊：7.2-15.7;牛：4.7 -28.5;马：14.1-20.8;猪：7.7 -30.1;大鼠：23.5～74.5.[结论]该方法具有样品处理简单、待测成分分离度高（APS 27.7 min,PAPS 32.4min）、灵敏度高（APS 0.45 μg/mL,PAPS 0.48 μg/mL）的特点;测定的几种动物肝脏中APS和PAPS的含量具有种间差异性,牛、羊、猪、马等四种家畜中,猪肝脏中APS和PAPS的含量均最高.
- 陈晖李凤鸣杨开伦李晓斌李虎吴欣
- 关键词：离子对反相高效液相色谱PAPSAPS
