浙江省自然科学基金(Y3080081)
- 作品数：14 被引量：47H指数：5
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- 青花菜抗坏血酸过氧化物酶基因BoAPX的克隆与表达分析
- 2012年
- 根据NCBI基因数据库提供的抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate Peroxidase,APX)基因序列设计简并引物,以青花菜(Brassica oleracea var.italica)叶片cDNA和DNA为材料进行PCR扩增,基因定名为BoAPX(Gen-Bank登录号:HQ871864).BoAPX的基因组全长为1 394bp,具7个内含子,编码区全长为753bp,编码250个氨基酸残基.序列分析结果表明,BoAPX的N端中没有信号肽序列,为胞质型APX,BoAPX与已知APX具有较高的同源性.RT-PCR结果表明,BoAPX的表达受霜霉菌(Hyaloperonospora parasitica)诱导,在96h时达最大值,说明BoAPX与霜霉菌抗性相关.以pBI121为植物表达载体,BoAPX为目的基因,成功构建了重组表达载体pBI121-BoAPX.
- 蒋明苗立祥钱宝英
- 关键词：青花菜抗坏血酸过氧化物酶克隆
- 青花菜查尔酮合成酶基因BoCHS的克隆、表达及序列分析被引量：5
- 2010年
- 根据NCBI数据库中发布的查尔酮合成酶基因序列设计PCR简并引物,以青花菜(Brassica oler-acea var.italica)子叶cDNA为材料,克隆到了青花菜查尔酮合成酶基因,基因命名为BoCHS,序列已提交到NCBI数据库,登录号为GU266209。该基因的编码区全长为1182bp,编码393个氨基酸。序列比对结果表明,BoCHS基因编码的氨基酸序列与其他十字花科植物之间的同源性很高,仅存在个别氨基酸残基的差别。RT-PCR检测表明,经霜霉病菌(Hyaloperonospora parasitica)侵染后,子叶中BoCHS的表达量增加,其中以72h和96h的表达量最大。
- 彭礼琼蒋明郭志平章鲤静张徐俞
- 关键词：青花菜查尔酮合成酶基因基因表达
- 番茄(Lycopersicum esculentum)几丁质酶基因LeCHI的克隆与序列分析被引量：1
- 2009年
- 根据GenBank发布的几丁质酶基因序列设计PCR引物,从叶片cDNA中克隆到了番茄几丁质酶基因,并命名为LeCHI,基因在NCBI中的登陆号为FJ849060。测序结果表明,LeCHI编码区全长为762 bp,编码253个氨基酸。RT-PCR检测表明,LeCHI基因在根、茎、叶和花蕾中均有表达。序列比对结果表明,LeCHI编码的氨基酸序列与同科的马铃薯、辣椒有较高的同源性。
- 蒋明郑君利
- 关键词：番茄几丁质酶基因克隆
- 青花菜抗坏血酸过氧化物酶基因BoAPX2的克隆与表达分析被引量：6
- 2012年
- 抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate peroxidase,APX)是H2O2清除剂,在植物抗逆反应中起着重要作用。根据NCBI发布的过氧化物体抗坏血酸过氧化物酶(Peroxisomal APX,pAPX)基因序列设计简并引物,分别以青花菜(Brassica oleracea var.italica)叶片DNA和cDNA为材料进行PCR扩增,克隆到一个APX基因,命名为BoAPX2,序列提交GenBank,登录号为JN172929。BoAPX2的基因组序列长为2 013 bp,具有8个内含子,编码区全长864 bp,编码287个氨基酸。序列分析结果表明,BoAPX2与已知的过氧化物体APX有较高的相似性,氨基酸的C端具1个跨膜结构域。RT-PCR结果表明,BoAPX2的表达受霜霉病菌(Hyaloperonospora parasitica)、H2O2、水杨酸和NaCl诱导。
- 蒋明张志仙袁菱婧
- 关键词：青花菜霜霉病抗坏血酸过氧化物酶克隆
- 青花菜BoCHS2基因的克隆、表达和反义载体的构建被引量：4
- 2011年
- 根据前期的研究结果设计PCR引物,从青花菜(Brassica oleracea var.italica)叶片基因组DNA和cDNA中克隆到了查尔酮合成酶基因,定名为BoCHS2。BoCHS2的基因组DNA全长为1267bp,具一个长度为85bp的内含子,基因编码区全长为1182bp,编码393个氨基酸。基因序列已提交至NCBI,登录号为HQ189776。与BoCHS相比,在核苷酸和氨基酸组成上的差异分别为27bp和8个氨基酸。RT-PCR结果表明,在霜霉菌诱导下,叶片和子叶中BoCHS2的表达量增加。将BoCHS2片段反向插入到带有绿色荧光蛋白基因的pCAMBIA1300载体中,成功构建了植物反义表达载体。
- 蒋明苗立祥钱宝英魏冬梅
- 关键词：青花菜查尔酮合成酶克隆
- 芥蓝Brassica albograbra花青素合成酶基因BaANS的克隆与序列分析被引量：6
- 2010年
- 根据NCBI数据库中的已知序列设计简并引物,分别从芥蓝(Brassica albograbra)叶片基因组DNA和cDNA中克隆到了花青素合成酶基因。基因命名为BaANS,该基因全长1369bp,具一个长度为292bp的内含子,编码区长度为1077bp,编码358个氨基酸,序列已提交到NCBI,登录号为GU170203。序列比对结果表明,BaANS与甘蓝、拟南芥、紫罗兰、白菜和芥菜等的ANS有较高的相似性。
- 赵蓉蓉蒋明贺蔡明朱雅琴周敏
- 关键词：芥蓝
- 绿色荧光蛋白在植物病理学研究中的应用被引量：7
- 2011年
- 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是生命科学研究中的一种重要报告基因,本文在论述GFP的发现、结构和发光原理的基础上,从抗病基因的亚细胞定位、启动子活性分析、病原菌-植物互作研究和基因表达分析等方面讨论GFP在植物病理学研究中的应用。
- 蒋明吕枷薪黄余磊苗立祥倪雪莉鲍笑笑
- 关键词：绿色荧光蛋白植物病理学报告基因
- 紫苤蓝花青素合成酶基因BocANS的克隆与分析被引量：4
- 2012年
- 花青素合成酶是催化无色花色素转变成花青素的关键酶,对编码基因进行克隆和分析,有助于研究植物叶色、果色和花色的形成机理。本研究以紫苤蓝为材料,克隆到一个花青素合成酶基因,并进行了表达和序列分析。结果表明,紫苤蓝花青素合成酶基因BocANS的编码区全长为107 7 bp,编码358个氨基酸;RT-PCR结果表明,BocANS在叶柄、叶片、茎、花柄和花蕾中表达,BocANS的长度、碱基组成与甘蓝和芥菜的序列最为接近,在系统发育树上聚为一组,与不同科植物的花青素合成酶基因差异较大,在发育树上处于不同的分支。
- 袁菱婧罗盼蒋明李温平何建婷
- 关键词：克隆
- 芥蓝查尔酮合成酶基因BaCHS的克隆与序列分析被引量：2
- 2009年
- 查尔酮合成酶基因是类黄酮生物合成途径的关键基因,在植物发育和逆境反应中起着重要作用。根据已发表的查尔酮合成酶基因序列设计全长引物,以芥蓝(Brassica albograbra)叶片基因组DNA和花蕾cD-NA为模板,克隆到了芥蓝查尔酮合成酶基因全长序列,命名为BaCHS。该基因DNA全长为1 263 bp,具一个长度为75 bp的内含子,编码区长度为1 188 bp,编码395个氨基酸。序列比对结果表明,BaCHS基因编码的氨基酸序列与其他十字花科植物之间的同源性很高,仅存在个别氨基酸残基的差别。
- 蒋明苗立祥胡齐赞贺蔡明陈珍
- 关键词：芥蓝查尔酮合成酶
- 紫苤蓝组织培养快繁技术被引量：6
- 2010年
- 以特色蔬菜紫苤蓝为材料进行组培快繁技术研究,结果表明,愈伤组织诱导和不定芽再生的最适培养基为MS+6-BA 4 mg·L-1+NAA 0.02 mg·L-1;与叶柄相比,子叶、子叶柄、胚轴和叶片的出愈率低,愈伤组织块小;不定根诱导的最适培养基为MS+NAA 0.2 mg·L-1;以细沙和腐殖土(1∶1)为基质,瓶苗移植成活率达91.5%。
- 倪春锋蒋明胡齐赞马玲张敏
- 关键词：叶柄快速繁殖
