国家自然科学基金(30300115)
- 作品数：4 被引量：23H指数：3
- 相关作者：黄正松石忠松夏之柏陈白莉柯春龙更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院中山大学更多>>
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- 不同胎龄大鼠神经干细胞体外诱导向多巴胺能神经元分化的比较(英文)
- 2008年
- 背景：胚胎来源干细胞的分化潜能不仅受到诱导条件影响，也受来源胚胎胚龄的影响。目的：实验拟观察不同胎龄大鼠中脑神经干细胞体外诱导向多巴胺能神经元分化能力。设计：随机对照观察。单位：中山大学附属第一医院神经外科。材料：实验于2007—03／2007—09在中山大学附属第一医院实验室完成。成年孕SD大鼠30只，体质量350～400g，由中山大学动物实验中心提供。许可证号码为SCXK（粤）2007—0034。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。DMEM／F12无血清培养液、B27添加剂、表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、体积分数为0．1的胎牛血清为英国Gibco公司产品；白细胞介素1α，白细胞介素11、胶质细胞源性神经营养因子购自美国R＆D公司；白血病抑制因子购自英国PEPROTECH公司；酪氨酸羟化酶抗体购自美国Santa Cruz公司；巢蛋白抗体、微管相关蛋白2抗体及胶质纤维酸性蛋白抗体为美国CHEMICON公司产品。方法：①分别于大鼠孕10，12，14，16，18天摸球法随机选取6只，麻醉后处死孕鼠，无菌条件下剖腹取胚胎，分离中脑腹侧脑组织进行神经干细胞培养。在含表皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子的无血清培养液中分别培养不同胎龄大鼠脑神经干细胞，经传代扩增后，在含白细胞介素1α、白细胞介素11、白血病抑制因子、胶质细胞源性神经营养因子的诱导分化液中向多巴胺能神经元分化。②诱导分化6d后观察分化细胞生长情况并进行免疫细胞化学鉴定；酪氨酸羟化酶染色标记后通过流式细胞仪检测分化的多巴胺能神经元比率。主要观察指标：①不同胎龄大鼠神经干细胞诱导分化后生长情况及免疫细胞化学鉴定结果。②神经干细胞诱导分化后酪氨酸羟化酶染色阳性细胞的比率。结果：①孕10，12，14，16，18d胚胎大鼠中脑神经干细
- 柯春龙陈白莉金华伟杨超
- 关键词：神经干细胞诱导分化多巴胺能神经元
- 神经干细胞诱导分化为多巴胺能神经元与胚胎中脑多巴胺能神经元移植治疗帕金森病效果比较被引量：4
- 2008年
- 目的：目前对于体外诱导分化的多巴胺能神经元的生物学功能、体内存活状况,以及与胚胎中脑多巴胺能神经元移植治疗帕金森病大鼠的疗效比较方面尚缺乏深入的研究。观察神经干细胞诱导分化的多巴胺能神经元移植治疗帕金森病大鼠的作用,并与胚胎中脑多巴胺能神经元组织移植治疗帕金森病大鼠的疗效进行比较。方法：实验于2006-06/2007-09在中山大学附属第一医院完成。①实验材料：健康成年雄性SD大鼠及孕14-15d的SD大鼠由中山大学动物实验中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法：在含表皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子的无血清培养液中培养胚胎大鼠中脑神经干细胞。经传代扩增后,在含白细胞介素1a、白细胞介素11、白血病抑制因子、胶质细胞源性神经营养因子的诱导分化液中向多巴胺能神经元分化,并进行免疫细胞化学鉴定和流式细胞仪检测。参考Sauer和Lee等方法制备帕金森病大鼠模型,并将造模成功大鼠随机分组,每组9只：分化细胞组向每一坐标点注入1× 10^11 L^-1神经干细胞诱导分化的多巴胺能神经元;胚胎中脑组注入1× 10^11 L^-1胚胎中脑多巴胺能神经元;手术对照组注入DMEM/F12细胞培养液。③实验评估：移植术后10、20、40、60d诱发大鼠不对称旋转行为以观察治疗效果,并对移植区进行酪氨酸羟化酶免疫组织化学检测以了解移植细胞体内存活的情况。结果：①大鼠神经干细胞球在诱导分化液中呈贴壁生长,球内细胞从球体中央逐渐向四周分化扩展出形态各异的细胞。免疫细胞化学染色显示,分化细胞中含有酪氨酸羟化酶染色阳性细胞。流式细胞仪检测诱导分化6d的细胞中酪氨酸羟化酶染色阳性细胞的比率为（16.7±2.8）%。②移植后20d分化细胞组大鼠的不对称旋转行为开始明显下降（P〈0.05）。移植后40d�
- 柯春龙陈白莉金华伟郭少雷
- 关键词：帕金森病神经干细胞多巴胺能神经元神经移植细胞移植
- 脑星形细胞瘤Livin基因表达与细胞增殖的关系被引量：16
- 2005年
- 向欣黄正松石忠松夏之柏胡斌廖冰
- 关键词：脑星形细胞瘤细胞增殖活性基因表达免疫组织化学检测凋亡抑制蛋白神经系统肿瘤
- 碱性成纤维细胞生长因子在实验性硬脑膜重建中的应用被引量：3
- 2004年
- 【目的】探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在实验性自体筋膜硬脑膜重建中的应用价值。【方法】取SD大鼠35只,分成5组。其中A组3只,直接将背部筋膜覆盖在硬膜外,B组5只,采用自体筋膜硬脑膜重建模型,通过免疫组织化学方法观察这两组大鼠自体筋膜硬脑膜移植的愈合过程及细胞因子bFGF在其中的表达;C组、D组、E组各9只,分别进行自体筋膜硬脑膜重建,D组加用外源性bFGF,E组仅用明胶海绵,通过脑脊液漏研究、免疫组织化学方法研究外源性bFGF对自体筋膜重建硬脑膜愈合过程的影响并用RT-PCR方法研究内源性bFGFmRNA的表达情况。【结果】大鼠自体筋膜移植硬脑膜部位bFGF表达明显;C、D、E组大鼠重建硬脑膜抵抗脑脊液漏压力值(mmH2O)分别为311±75,497±153,338±88,Ⅰ型胶原纤维表达值分别为4.9±0.8,10.9±1.6,5.3±0.9,D组均好于对照组(P<0.05);内源性bFGFmRNA的表达没有明显变化。【结论】在自体筋膜移植硬脑膜的愈合过程中bFGF可能起了重要的作用;外源性bFGF处理的大鼠其移植筋膜愈合要好于对照组。
- 周峰石忠松夏之柏黄正松
- 关键词：自体筋膜硬脑膜重建FGF愈合过程原纤维
