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上海市科学技术委员会科研基金(12nm0501600)
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陈蕾
张茂林
张志愿
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硅酸钙生物陶瓷对牙髓细胞体外增殖分化的影响
2014年
目的:应用硅酸钙(CaSiO3,CS)生物陶瓷作用于人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs),研究其对hDPCs增殖及向成牙本质细胞方向分化的影响。方法:从年轻健康患者(18~20岁)拔除的智齿或前磨牙牙髓组织中获取hDPCs进行培养。将质量浓度为0.2g/mL的CS浸提液按1/2、1,4、1/8、1/16、1/32、1/64和1/128倍比稀释后作用于hDPCs。MTY实验检测不同质量浓度CS浸提液对hDPCs增殖的影响,进而筛选出最佳浓度。以最佳质量浓度(1/64倍比稀释)CS浸提液培养hDPCs2、4d后,Real.TimePCR检测以下hDPCs成牙本质相关基因的表达:牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphopmtein,DSPP)、牙本质基质蛋白-1(dentin matrix protein1,DMP.1),I型胶原(collagen tvpeI,COL-I)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN);培养7、14d后碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及半定量检测ALP活性。结果:最佳质量浓度(1/64倍比稀释)cs浸提液能够促进hDPCs的增殖,对牙髓细胞DSPP、DMP-1、COL-1、OPN等成牙本质相关基因的表达有较为明显的促进作用。ALP染色及半定量分析显示该浓度的CS浸提液能够提高hDPCs分泌ALP的活性。结论:最佳质量浓度(1/64倍比稀释)CS浸提液能够明显促进hDPCs的增殖,提高成牙本质相关基因的表达,进而促进hDPCs向成牙本质细胞方向分化,为后期hDPCs结合CS支架材料进行牙本质再生的研究打下基础。
张茂林
夏伦果
陈蕾
张秀丽
蒋欣泉
张志愿
关键词:
牙髓细胞
增殖
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