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Xi River virus,a new bat reovirus isolated in southern China: Nelson Bay orthoreovirus(NBV) is a species within the genus Orthoreovirus,family Reoviridae,containing 4, poss...; 朱妍; 关键词：BAT REOVIRUS; 文献传递

狂犬病病毒免疫组织化学定位方法的建立: 2009年; 应用抗狂犬病病毒的特异性抗体及免疫组织化学方法检测接种了狂犬病病毒SRV-9毒株感染的小鼠脑组织,并对狂犬病病毒抗原进行了组织定位分析。结果表明:在小鼠的小脑分子层蒲肯野氏细胞胞浆出现明显的局灶型阳性颗粒。说明免疫组织化学方法检测狂犬病病毒敏感度高、直观,可作为诊断狂犬病病毒的辅助性方法,对研究狂犬病病毒在脑组织神经细胞及其他组织器官内的分布具有一定的意义。; 王泽夏志平江禹连海毛文俊钱爱东; 关键词：免疫组织化学狂犬病病毒

动物狂犬病病毒巢式RT-PCR检测方法的建立被引量：11: 2009年; 以GenBank收录的多基因型狂犬病病毒(RV)N基因序列为参考,设计了简并的PCR引物,建立了能够有效扩增7种基因型RV基因组片段的巢式RT-PCR(nested RT-PCR)方法,命名为RVN371。该方法能够检测到4.6个TCID50的SRV9固定毒,对犬、猪、蝙蝠及牛的狂犬病阳性脑组织样品均表现出良好的特感性:扩增产物目的带位置正确,未见非特异性扩增条带。对比试验表明,RVN371对街毒脑组织样品检测的灵敏度较乳鼠脑内接种试验(MIT)高出100倍;在对3种鼠脑固定毒、12种犬脑街毒样品的检测中,与RV检测的金标方法——免疫荧光试验(FAT)完全符合。RVN371为动物狂犬病的实验室诊断和流行病学研究提供了有利的工具。; 江禹王莉莉韩小虎邵明富范金红刘芳涂长春; 关键词：狂犬病病毒巢式RT-PCR

猪圆环病毒2型原位杂交检测方法的建立被引量：3: 2012年; 参照GenBank发表的PCV2ORF1基因序列设计了1对引物,利用PCR地高辛探针合成的方法制备了长度为494bp的特异性探针,经检验具有良好的特异性和敏感性,可检测最低质粒DNA质量浓度为0.972 8μg/L。用该探针建立了原位杂交组织切片检测方法,并用来检测PCV2感染猪的扁桃体和淋巴结组织,结果表明阳性信号主要存在于巨噬细胞胞浆中,信号强、背景良好,阴性对照无显色,说明该方法可作为PCV2实验室诊断和机理研究的一种有效检测方法。; 刘雯李勇张宁马丽敏李琳胡乐鹏靳朝夏志平; 关键词：PCV2 核酸探针原位杂交

狂犬病毒鼠脑复壮后的典型形态恢复及感染细胞内的形态发生学被引量：2: 2008年; 【目的】观察比较鼠脑复壮前后狂犬病毒的形态变化，并观察病毒感染BHK．21细胞后不同时间的形态发生情况。【方法】以保存时间较长的SRV9毒株为原始材料，经乳鼠脑传代复壮后接种BHK．21细胞，浓缩、纯化后观察。【结果】（1）未经复壮的病毒中DI粒子占较高比例，典型粒子只占少数，而复壮后典型粒子所占比例升高到病毒粒子总数的90％。（2）感染24h后在细胞浆内可以观察到典型病毒粒子，其数量随着培养时间的延长而增加。带毒传代之后的培养过程中细胞内病毒数量增加不明显。（3）病毒可以在细胞内的空泡膜表面以多种方式成堆出芽。【结论】（1）鼠脑复壮可恢复狂犬病毒中典型粒子所占比例。（2）带毒传代1-2次时为狂犬病毒收获的最佳时机。（3）本研究为狂犬病毒的装配机制补充了数据。; 韩小虎邹啸环江禹宣华涂长春; 关键词：狂犬病毒复壮

动物狂犬病病毒街毒株的细胞分离鉴定被引量：2: 2008年; 目的N2A细胞和BHK-21细胞用于我国动物狂犬病流行街毒株的分离培养。方法狂犬病发病动物脑组织悬液首先脑内接种乳鼠,再采取Nonclon Delta Tube内置盖玻片法从鼠脑中进行病毒分离培养,脑组织悬液接种细胞后96h,利用直接荧光抗体实验检测盖玻片上的病毒感染细胞,判定病毒是否在细胞上增殖;通过测定不同毒株细胞培养上清中的病毒滴度对病毒进行鉴定。结果22份狂犬病病犬、猪和牛的脑组织接种乳鼠后均获得了鼠脑分离毒,将鼠脑毒接种N2A细胞分离获得了22株病毒,接种BHK-21细胞却只分离获得20株病毒。不同病毒株第三代细胞培养上清中的病毒滴度从10-1TCID50/100μL到10-3.6TCID50/100μL。结论N2A细胞对狂犬病病毒街毒株的敏感性高于BHK-21细胞,且不同的病毒株对细胞的适应能力不同。实验分离获得的病毒细胞适应株丰富了我国狂犬病病毒毒种资源,为进一步研究不同病毒分离株的抗原性差异奠定基础。; 龚文杰江禹曾政李茂王莉莉刘浩熊仲良涂长春; 关键词：细胞

犬瘟热病毒间接免疫酶组化检测方法的建立被引量：5: 2011年; 为对犬瘟热病毒(CDV)进行组织定位检查,本实验利用犬瘟热抗CDV单克隆抗体(MAb),采用间接免疫酶组化法对6只人工感染的比格犬肠组织的病毒抗原进行定位检测。结果表明,利用犬瘟热抗CDV MAb建立的间接免疫酶组化方法具有较高的特异性和灵敏性,可原位检测病犬肠组织中CDV抗原的分布,其抗原的阳性表达主要在小肠绒毛和李氏隐窝的上皮细胞胞浆内,表明CDV主要侵害小肠的粘膜上皮组织。; 刘雯马丽敏李琳何晔李叶任秀梅靳朝夏志平; 关键词：犬瘟热单克隆抗体

动物狂犬病流行毒株的抗原性差异分析被引量：5: 2010年; 利用9株抗狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)核蛋白单克隆抗体,通过间接免疫荧光方法对分离的34株传至F6代N2A细胞适应株进行了抗原差异分析。结果表明:这些RABV分离株存在抗原差异,根据病毒与单抗反应的类型,将所分析的病毒株分为6个抗原变异型。根据N基因系统发生分析将所分析的病毒株分为4个进化群,结果表明不同进化群病毒间的遗传差异与抗原分型没有直接的联系。; 龚文杰曾政查云峰邵明富范金红孙彦伟余兴龙江禹涂长春; 关键词：狂犬病毒抗原性遗传进化分析

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国家自然科学基金(30600445)