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国家自然科学基金(30170889)

作品数:6 被引量:19H指数:4
相关作者:杨东亮刘朝董继华卢银平陆蒙吉更多>>
相关机构:华中科技大学埃森大学安徽医科大学第一附属医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 6篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 5篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 6篇病毒
  • 3篇乙型
  • 3篇肝炎
  • 3篇肝炎病毒
  • 2篇乙型肝炎
  • 2篇抗病毒
  • 2篇HEPATI...
  • 2篇病毒感染
  • 1篇药物
  • 1篇乙型肝炎病毒
  • 1篇嗜肝DNA病...
  • 1篇鼠肝
  • 1篇体外
  • 1篇土拨鼠
  • 1篇土拨鼠肝炎病...
  • 1篇子机
  • 1篇细胞
  • 1篇淋巴
  • 1篇淋巴细胞
  • 1篇抗病毒药

机构

  • 4篇华中科技大学
  • 2篇埃森大学
  • 1篇安徽医科大学...
  • 1篇华中科技大学...

作者

  • 5篇杨东亮
  • 3篇卢银平
  • 3篇董继华
  • 3篇刘朝
  • 3篇陆蒙吉
  • 2篇管世鹤
  • 1篇田拥军
  • 1篇龚劲松
  • 1篇李磊
  • 1篇王蓉
  • 1篇龚非力
  • 1篇张振华
  • 1篇夏剑波
  • 1篇祝建芳

传媒

  • 2篇中国病毒学
  • 2篇中华肝脏病杂...
  • 1篇中国医院药学...
  • 1篇中国公共卫生

年份

  • 1篇2009
  • 2篇2008
  • 4篇2007
6 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
乙型肝炎病毒表达载体pHY106在筛选抗病毒药物中的意义被引量:1
2007年
目的应用新的HBV表达载体,建立体外筛选临床抗HBV药物的方法。方法克隆对拉米夫定耐药的CHB患者体内HBV全基因组,然后将其亚克隆到HBV真核表达载体pHY106,体外转染Huh7细胞,检测转染后不同时间HBsAg、HBeAg、HBVDNA及HBV复制中间体水平。分析拉米夫定和阿德福韦对HBV基因表达和复制的抑制作用,指导临床用药。结果成功构建全部8个HBV临床分离株全基因组真核表达质粒,HBV聚合酶基因YMDD有5个产生YVDD突变,3个产生YIDD突变。该质粒上HBV基因能在Huh7细胞中进行复制和表达,拉米夫定不能体外抑制HBV复制,阿德福韦抑制了HBV在Huh7细胞中的复制,抑制程度与药物浓度相关。阿德福韦在患者体内也抑制了HBV的复制。结论新建立的体外筛选抗HBV药物的方法能用于临床快速筛选抗HBV药物,对CHB的治疗用药具有指导意义。
卢银平董继华刘朝管世鹤陆蒙吉杨东亮
关键词:肝炎病毒乙型肝炎乙型抗病毒药
嗜肝DNA病毒感染动物模型研究进展
目的动物模型是人们了解病毒复制、病毒感染自然史、病毒持续感染和致病的分子机制,研制有效抗病毒药物和疫苗的不可或缺的工具。嗜肝DNA病毒不仅包括HBV,也包括其它哺乳动物的嗜肝病毒,如土拨鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病...
杨东亮
关键词:病毒感染HBV感染分子机制
文献传递
土拨鼠肝炎病毒和乙型肝炎病毒的核心蛋白存在共同线性B淋巴细胞表位
2007年
目的寻找并证实土拨鼠肝炎病毒核心抗原(WHcAg)和HBcAg存在共同的B淋巴细胞表位。方法用变性重组WHcAg和HBcAg免疫Balb/c小鼠以制备单克隆抗体;用单克隆抗体对WHcAg和HBcAg进行ELISA、Western blot及免疫组织化学对比分析,同时用该抗体对WHcAg和HBcAg进行表位分析,并在氨基酸水平进行比对。结果经过ELISA、Western blot、免疫组织化学对比分析,制备的单克隆抗体中有2株与HBcAg和WHcAg有交叉反应,而且灵敏度和特异性相似;针对的抗原表位分别位于HBcAg和WHcAg的1~8位氨基酸和125~140位氨基酸。结论WHcAg和HBcAg存在2个共同的线性B淋巴细胞表位,分别位于1~8位和125~140位氨基酸。
张振华王蓉田拥军李磊夏剑波龚劲松陆蒙吉龚非力杨东亮
关键词:肝炎核心抗原乙型肝炎病毒B淋巴细胞土拨鼠
新的抗病毒核苷类似物替比夫定体外对乙型肝炎病毒复制子的抑制作用被引量:7
2008年
目的:观察新的抗乙型肝炎病毒(HBV)核苷类似物——替比夫定体外对乙型肝炎病毒复制子的抑制作用。方法:将乙型肝炎病毒复制子pHBV1.3质粒转染Huh7细胞,在转染细胞培养液中加入不同浓度的替比夫定,然后在不同时间段观察替比夫定的抗病毒作用。ELISA检测培养上清中HBsAg、HBeAg的表达,荧光定量PCR(FQ-PCR)定量检测培养上清中HBVDNA拷贝数,Southern blot分析转染细胞中HBV复制中间体。结果:替比夫定减少了培养上清中HBsAg、HBeAg的表达及HBVDNA拷贝数,抑制了转染细胞中HBV复制中间体的形成。替比夫定对HBV复制子体外复制的抑制作用依赖于药物浓度及作用时间。结论:替比夫定在体外对HBV复制有较强的抑制作用。
卢银平董继华祝建芳刘朝管世鹤陆蒙吉杨东亮
关键词:抗病毒
Construction and Characterization of a Hepatitis B Virus Replicon被引量:5
2007年
建立复制细胞肝炎 B 病毒(HBV ) 当模特儿并且在抗病毒的药评估决定它的应用程序,我们构造了表情包含了 HBV 染色体的 1.3 个拷贝,并且在 Huh7 房间在短暂 transfection 以后测量了病毒的复制的水平的 plasmid。我们然后观察了抗病毒的药管理的效果。HBV (ayw ) 基因碎片的 1.3 褶层被 PCR 和限制 endonuclease 消化克隆进 pCR2.1。recombinant plasmid 是进 Huh7 房间, HBsAg, HBeAg 和 HBV 的短暂 transfected 在 Huh7 房间的上层清液的 DNA 被 ELISA 和即时 PCR 分别地测量;细胞内部的 HBV replicative 中介和细胞内部的 HBV 抄本被南部的污点和北污点分别地检测。adefovir 的抗病毒的效果,新奇 anti-HBV 核苷酸类似物,在这个细胞的模型系统被评估。结果显示 HBV replicon 的 recombinant plasmid 成功地被构造;在 plasmid pHBV1.3 带的 HBV 染色体能高效地复制并且被表示在哈 7 个房间, adefovir 能在这个细胞的模型,和抑制禁止 HBV 复制是剂量依赖者。结论是 HBV replicon,能在 hepatoma 房间高效地开始病毒的复制,可以是在 HBV 复制和抗病毒的药的学习的一个有用工具。关键词肝炎 B 病毒 - 传染 replicon - 表示向量 CLC 数字 R373 基础条款:国家自然科学基础(No.30271170, No.30170889 ) 。
Yin-ping LUBao-ju WANGJi-hua DONGZhao LIUShi-he GUANMeng-ji LUDong-liang YANG
Antiviral Effect of Interferon-Induced Guanylate Binding Protein-1 against Coxsackie Virus and Hepatitis B Virus B3 in Vitro被引量:4
2007年
Guanylate binding protein-1(GBP-1)is an interferon-induced protein.To observe its antiviral effect against Hepatitis B virus(HBV)and Coxsackie virus B3(CVB3),we constructed an eukaryotic expression vector of human GBP-1(hGBP-1).Full-length encoding sequence of hGBP-1 was amplified by long chain RT-PCR and inserted into a pCR2.1 vector,then subcloned into a pCDNA3.1(-)vector.Recombinant hGBP-1 plasmids and pHBV1.3 carrying 1.3-fold genome of HBV were contransfected into HepG2 cells,and inhibition effect of hGBP-1 against HBV replication was observed.Hela cells transfected with recombinant hGBP-1 plasmids were challenged with CVB3,and viral yield in cultures were detected.The results indicated that recombinant eukaryotic expression plasmid of hGBP-1 was constructed successfully and the hGBP-1 gene carried in this plasmid could be efficiently expressed in HepG2 cells and Hela cells.hGBP-1 inhibit CVB3 but not HBV replication in vitro.These results demonstrate that hGBP-1 mediates an antiviral effect against CVB3 but not HBV and perhaps plays an important role in the interferon-mediated antiviral response against CVB3.
Yin-ping LU Bao-ju WANG Ji-hua DONG Zhao LIU Shi-he GUAN Meng-ji LU  Dong-liang YANG
关键词:柯萨奇病毒
乙型肝炎病毒感染性复制子构建及其意义被引量:5
2008年
目的构建乙型肝炎病毒(HBV)感染性复制子表达载体,建立HBV体外复制细胞模型,分析其复制特性及对抗病毒药物的敏感性。方法以质粒pHBV-dimer为模板,采用PCR结合限制性酶切的方法分步将1.3拷贝HBV基因组克隆到pCR2.1载体。将构建的pHBV1.3质粒转染Huh7细胞,ELISA检测不同时间HBsAg、HBeAg的表达,Southern Blot和Northern Blot分析HBV复制中间体、转录物。并利用该细胞模型进行阿德福韦抗病毒研究。结果成功构建了HBV感染性复制子表达质粒,该质粒上HBV基因能在Huh7细胞中进行有效复制、转录和表达,并能在体外短期传代12 d。阿德福韦能体外抑制该HBV复制子的复制,抑制程度依赖于药物浓度。结论新构建的HBV感染性复制子表达载体可介导高水平病毒复制,可用于HBV复制机制和抗病毒等方面的研究。
卢银平董继华刘朝陆蒙吉杨东亮
关键词:复制子
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