陕西省科学技术研究发展计划项目(2004K15-G1)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：赵英仁刘敏张树林陈天艳张伟更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院第一附属医院第四军医大学更多>>
- 发文基金：陕西省科学技术研究发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HCV核心蛋白与HCBP1在哺乳双杂交系统中的相互作用
- 2008年
- 目的:探讨HCV-core与HCBP1的相互作用.方法:PCR分别扩增含HCV core及HCBP1的cDNA片段,克隆入pGEM T载体,经测序正确后再分别克隆入哺乳双杂交的表达质粒pM和pVP16中,并转染入COS-7细胞,48 h后检测细胞中报告基因CAT的表达水平.结果:CAT-ELISA检测显示pM-core与pVP16-HCBP1实验孔A405 nm值为0.1288,高于其它阴性对照,但低于阳性对照组A值.结论:哺乳双杂交系统证实HCV核心蛋白与新基因HCBP1有一定的相互作用,可进一步研究HCBP1的细胞功能.
- 陈云茹刘敏陈天艳张树林陈瑞琳张曦石磊
- 关键词：HCV核心蛋白报告基因
- 丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的用含丙型肝炎病毒核心(HCV core)蛋白的cDNA片段构建酵母双杂交诱饵载体,并进行人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定。方法PCR扩增含HCV core蛋白不同大小的cDNA片段,分别克隆入pUC19质粒,经测序正确后,再亚克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中。扩增人胎肝cDNA文库并纯化、鉴定。结果获得含HCVcore蛋白的cDNA片段,并成功克隆入pGBKT7中。待转化的人肝cDNA文库滴度在5×108左右,纯化后的质粒DNA质量浓度约1 g/L。用EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切显示插入片段大小不一。结论成功构建了核心蛋白的酵母双杂交诱饵载体;扩增、纯化的人胎肝cDNA文库的多样性很好,适合于筛选。为用酵母双杂交技术研究与HCV core蛋白相互作用的蛋白打下坚实基础。
- 刘敏张伟陈天艳蔺淑梅赵良刘锦锋赵英仁张树林
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交CDNA文库
- HCV核心蛋白在酵母双杂交系统中的表达及自激活作用检测被引量：1
- 2006年
- 目的检测用含丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白的cDNA片段构建的酵母双杂交诱饵载体的表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无激活作用.方法PCR扩增含HCV核心蛋白不同大小的cDNA片段,分别克隆入pUC19质粒,经测序正确后,再分别亚克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中.将重组质粒导入酵母菌AH109,检测其表达产物在酵母细胞中对报告基因有无激活作用.结果成功获得含HCV核心蛋白的cDNA片段,HCV核心蛋白对酵母菌AH109无毒性,且对报告基因无激活作用.结论利用酵母双杂交Gal4系统3研究与HCV核心蛋白相互作用的蛋白,证实了HCV核心蛋白无自激活功能.
- 刘敏张伟陈天艳蔺淑梅刘锦锋叶峰赵英仁张树林
- 关键词：HCV核心蛋白酵母双杂交报告基因
- 核心蛋白在肝癌中的作用被引量：1
- 2005年
- 了解核心蛋白在丙型肝炎病毒(HCV)致癌中的机制,对于肝癌的病因学以及治疗具有极大的促进作用。在这一方面,国内外的学者进行了大量的理论研究和相关的实验,提出了核心蛋白可能的致癌机制:核心蛋白的核转位表达及突变;影响细胞的周期、增殖以及凋亡;激活原癌基因,影响抑癌基因的表达;影响端粒酶、血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)以及细胞的信号转导等。
- 刘锦锋赵英仁刘敏
- 关键词：核心蛋白肝癌致癌机制原癌基因抑癌基因
