上海市“科技创新行动计划”(12391900700)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 蚤状蟤(Daphnia pulex) Chk1基因的克隆与表达分析
- 2015年
- 用RACE技术从蚤状溞（ Daphnia pulex）中克隆到Chk1基因cDNA全长为1767 bp，开放阅读框为1497 bp，编码了498个氨基酸，其结构中存在3个保守的Ser-Gln （ SQ）和Thr-Gln （ TQ）序列。同源性比对结果显示，蚤状溞Chk1基因与丽色扇头蜱、切叶蜂、转基因捕食螨、豌豆长管蚜和黑腹果蝇等的同源性均为51％～55％。进化分析发现，蚤状溞Chk1基因与豌豆长管蚜、切叶蜂、黑腹果蝇、丽色扇头蜱和转基因捕食螨等节肢动物亲缘关系最近。Real Time PCR实验结果表明，Chk1 mRNA在两性溞的表达量显著高于孤雌溞（ P＜0.05），且在休眠卵中表达量最低。推测Chk1基因可能在蚤状溞的生殖转化调控中发挥重要作用。
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- 关键词：CHK1REAL
- 定量表达和整体原位杂交研究Doublesex基因在不同生殖状态蚤状溞的表达
- 2013年
- 为研究doublesex(dsx)基因在不同生殖状态的蚤状溞的时空表达状况,提取不同生殖状态的蚤状溞RNA,采用RT-PCR和Quantitative real-time PCR检测了dsx在不同生殖状态溞体的表达差异,并通过体外转录制备DIG标记的Doublesex的RNA探针;采用整体原位杂交方法研究dsx基因在不同生殖状态的蚤状溞的时空表达状况。结果显示,RT-PCR检测发现dsx在雌雄溞体没有性别特异性的选择性拼接,只有一种相同的转录产物。Real-time PCR显示,dsx在雄溞中表达水平最高,是孤雌溞的2.6倍,两性雌溞的4.9倍,三者之间有显著性差异,表现出性别差异性表达。整体原位杂交发现,在所取样的不同生殖状态溞体中dsx基因也均有表达,但其部位与表达量不同,且在雌雄溞体中表现出性别差异。在雄溞的第一触角和第一胸肢显现得尤为明显,且在复眼中也有表达。孤雌溞和两性雌溞对应部位表达则相对较弱。结果表明,dsx基因很有可能在调控蚤状溞生殖转换和性别分化上起到很大作用。
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- 关键词：RNA探针整体原位杂交
