黑龙江省自然科学基金(ZD201116)
- 作品数：5 被引量：17H指数：2
- 相关作者：计红杨焕民郭景茹甄莉薛琳琳更多>>
- 相关机构：黑龙江八一农垦大学黑龙江职业学院吉林大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- α-烯醇化酶在籽鹅不同级别卵泡壁的定位及定量
- 2019年
- 目的对籽鹅不同级别卵泡壁中的α-烯醇化酶(α-enolase)进行定位及定量检测。方法分离产蛋期籽鹅等级卵泡(F1、F2、F3、F4、F5)、小黄卵泡(small yellow follicle,SYF)、大白卵泡(large white follicle,LWF)的卵泡壁;应用免疫组化方法检测不同级别卵泡壁的α-烯醇化酶的定位,采用Western blot及实时荧光定量PCR双标准曲线法检测α-烯醇化酶蛋白表达量及mRNA转录水平。结果不同级别卵泡壁均存在α-烯醇化酶表达,颗粒细胞层表达量总体高于膜层,SYF颗粒细胞层α-烯醇化酶表达量较高;F2级卵泡壁α-烯醇化酶mRNA转录水平显著高于LWF、F3及F4级别卵泡,差异有统计学意义(P <0. 01),F1、F5及SYF级卵泡壁α-烯醇化酶m RNA转录水平显著高于其他级别卵泡壁,差异有统计学意义(P <0. 01);SYF级卵泡壁α-烯醇化酶蛋白表达量显著高于其他级别卵泡,差异有统计学意义(P <0. 01)。结论α-烯醇化酶及糖酵解途径可能在卵泡发育中发挥重要功能,为α-烯醇化酶在禽类卵泡选择及生长发育中的功能研究奠定了基础。
- 计红牛春阳詹雪龙郭景茹甄莉李士泽杨焕民
- 关键词：籽鹅卵泡
- α-烯醇化酶基因干扰表达对籽鹅卵泡颗粒细胞增殖及凋亡的影响被引量：1
- 2020年
- 目的:研究α-烯醇化酶(ENO1)基因干扰表达对籽鹅卵泡颗粒细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法:原代培养籽鹅F1级卵泡颗粒细胞(复合培养),将ENO1基因干扰表达重组质粒转染至籽鹅卵泡颗粒细胞。实验分为四组:ENO1干扰表达组(RNAi)、无关序列干扰组(NC)、培养液组(Control)、转染试剂组(Lip)。流式细胞术检测干扰组和对照各组的凋亡率、细胞周期时相性。结果:ENO1基因干扰表达使籽鹅卵泡颗粒细胞增殖速度变慢,凋亡率增加,G2/M期颗粒细胞比例增高。结论:ENO1基因干扰表达可使籽鹅卵泡颗粒细胞周期发生G2/M期阻滞,诱导细胞发生凋亡,抑制细胞增殖。
- 计红邵子益薛琳琳牛春阳詹雪龙杨闯甄莉杨焕民李士泽
- 关键词：籽鹅卵泡颗粒细胞凋亡细胞周期
- 不同培养时间对鸡卵泡颗粒细胞孕酮、雌激素分泌水平及FSHR、LHR基因表达的影响被引量：9
- 2017年
- 目的:研究培养不同时间鸡卵泡颗粒细胞孕酮和雌激素的分泌水平,促卵泡素受体(FSHR)和促黄体素受体(LHR)的基因表达水平,推断体外培养时间对颗粒细胞激素分泌及相关受体基因表达的影响。方法:通过细胞体外培养的方法,分别于0 h、24 h、48 h、72 h、96 h收集鸡卵泡颗粒细胞上清液,采用ELISA法测定细胞上清液内的孕酮及雌激素分泌水平,并采用荧光定量PCR技术检测颗粒细胞内FSHR和LHR基因表达情况。结果:在培养初期0 h^48 h孕酮和雌激素分泌量显著降低(P<0.05),随着培养时间增加到72 h两种激素的分泌量又开始增加,并达到培养初期水平,培养至96 h细胞内孕酮和雌激素分泌量再次降低;颗粒细胞FSHR和LHR m RNA的表达水平则随着培养时间的增加而降低(P<0.05)。结论:体外培养的卵泡颗粒细胞内孕酮和雌激素的分泌量随体外培养时间的延长呈先降低后升高的趋势,可能与体外培养细胞的生长状态相关,从整体上看随着培养时间的延长,细胞内孕酮和雌激素的分泌量均降低,可能与两种促性腺激素受体FSHR和LHR基因表达量下降相关。
- 李悦计红薛琳琳马莉杨焕民连帅郭文晋张宇辰翟俊飞郭景茹刘艳芝甄莉
- 关键词：蛋鸡卵泡颗粒细胞孕酮雌激素
- 产蛋前期和产蛋期籽鹅组织内参基因的稳定性被引量：6
- 2012年
- 【目的】分析比较使用广泛的7个候选内参基因在产蛋前期和产蛋期籽鹅组织中的表达情况,筛选籽鹅组织基因表达分析中最佳的内参基因及其数目。【方法】应用实时定量反转录PCR技术,分别检测28S rRNA、18S rRNA、GAPDH、ACTB、HPRT1、SDH和TUB在产蛋前期与产蛋期健康籽鹅肝脏、肾脏、心脏、腿肌和卵巢组织中的表达情况,采用绝对定量方法确定基因拷贝数,然后分别使用geNorm和NormFinder程序进行数据分析。【结果】产蛋前期籽鹅各组织中7个内参基因表达稳定度的顺序分别为:GAPDH=HRPT1(0.195)>TUB(0.244)>28SrRNA(0.414)>18S rRNA(0.495)>ACTB(0.541)>SDH(0.610);产蛋期籽鹅各组织中7个内参基因表达稳定度的顺序分别为:GAPDH=28S rRNA(0.128)>TUB(0.181)>ACTB(0.192)>SDH(0.221)>HRPT1(0.316)>18S rRNA(0.362),且7个基因的配对差异分析分别为V2/3(产蛋前期)=0.084、V2/3(产蛋期)=0.069,内参基因的最适数目均为2个。【结论】产蛋前期和产蛋期籽鹅组织目的基因的表达分析中相对适合的内参基因分别为GAPDH和HRPT1、GAPDH和28S rRNA。
- 计红王忠伟郭景茹王建发赫荣贺杨焕民
- 关键词：籽鹅内参基因
- ENO1基因过表达对籽鹅卵泡颗粒细胞糖酵解、凋亡及细胞周期的影响被引量：1
- 2021年
- 旨在研究α-烯醇化酶(α-enolase, ENO1)基因过表达对籽鹅卵泡颗粒细胞糖酵解、增殖、凋亡及细胞周期的影响。原代培养籽鹅卵泡颗粒细胞,将构建好的ENO1基因过表达载体转染进入颗粒细胞,分为对照组、空载体组及ENO1过表达组3组,观察其对籽鹅卵泡颗粒细胞糖酵解相关指标、增殖速度、凋亡及细胞周期的影响。结果显示,ENO1过表达组细胞培养液中葡萄糖含量显著低于其他2组(P<0.05);乳酸和丙酮酸含量显著高于其他2组(P<0.05);细胞ATP水平及丙酮酸激酶(pyruvate kinase, PK)mRNA表达量显著升高(P<0.05)。ENO1过表达组细胞增殖速度显著高于其他2组(P<0.05),凋亡率低于其他2组(P<0.05)。ENO1过表达组G0/G1细胞比例降低(P<0.05),S期和G2/M细胞比例升高(P<0.05)。结果表明,ENO1基因过表达可能通过提高籽鹅卵泡颗粒细胞糖酵解水平促进细胞增殖,抑制凋亡,改变细胞周期时相性,进而调控禽类卵泡发育。
- 计红邵子益薛琳琳詹雪龙邵百卉郭景茹李士泽杨焕民甄莉
- 关键词：颗粒细胞糖酵解细胞周期凋亡
