国家自然科学基金(30370586)
- 作品数：6 被引量：29H指数：3
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- NGFI-B在应激损伤心肌细胞中的亚细胞定位及其生物学效应被引量：2
- 2011年
- 目的:观察应激条件下心肌细胞中神经生长诱导蛋白质-B(NGFI-B)的表达和亚细胞定位的变化,为揭示应激机体心肌损伤的病理学机理提供科学依据。方法:建立心肌细胞应激损伤的离体细胞模型;采用Western blot方法和细胞免疫荧光法观察NGFI-B在应激心肌细胞中的亚细胞定位;采用流式细胞术观察离体心肌细胞的凋亡率;采用Western blot法测定应激心肌细胞中细胞色素C(Cyt C)在胞浆和线粒体中的含量。结果:应激机体心肌细胞线粒体中NGFI-B蛋白含量显著升高,NGFI-B发生向线粒体的转位,促进心肌细胞线粒体Cyt C释放及心肌细胞凋亡;加入核输出抑制剂来普霉素B(LMB)后,NGFI-B的核输出受到阻抑,应激心肌细胞中NGFI-B滞留于胞核,不发生向线粒体的转位,应激心肌细胞中线粒体Cyt C释放及心肌细胞凋亡均受到阻抑。结论:应激诱导心肌细胞中NGFI-B向线粒体转位,并继而活化细胞凋亡的线粒体通路,引起心肌细胞凋亡。
- 冯红刘卫战锐王新兴钱令嘉
- 关键词：应激心肌细胞NGFI-B转位
- 重组BHMT对高同型半胱氨酸血症大鼠的影响被引量：3
- 2004年
- 目的探讨重组BHMT对大鼠HHcy血症的防治作用。方法用含2%蛋氨酸(methionine,Met)饲料诱发HHcy的大鼠,经尾静脉注射BHMT后,观察模型大鼠血浆中同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)浓度、LDH酶活性及HDL/LDL的影响。结果重组BHMT能将HHcy组大鼠血浆中Hcy浓度(23.70±6.75)μmol/L显著降低为(14.61±2.80)μmol/L(P<0.05),LDH酶活性由(209.57±10.22)U/L降低为(225.04±30.47)U/L(P<0.05),对脂蛋白HDL/LDL基本没有影响。结论重组BHMT对高同型半胱氨酸血症有一定的治疗作用。
- 易丹吴淑庆胥达钱令嘉
- 关键词：高同型半胱氨酸血症同型半胱氨酸
- 高压液相荧光检测法检测血浆同型半胱氨酸
- 目的:建立高压液相荧光检测法测定血浆中同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)的方法。方法:应用Symme-tryShieldTMRP18色谱柱,0.08mol/L醋酸钠1%甲醇为流动相,与巯基特异结合的荧光物质...
- 胥达钱令嘉
- 关键词：血浆同型半胱氨酸
- 文献传递
- 高压液相荧光检测法检测血浆同型半胱氨酸被引量：7
- 2005年
- 目的:建立高压液相荧光检测法测定血浆中同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)的方法.方法:应用Symmetry ShieldTMRP18色谱柱,0.08 mol/L醋酸钠1%甲醇为流动相,与巯基特异结合的荧光物质SBD-F衍生巯基来检测血浆中的同型半胱氨酸浓度.结果:该法的平均回收率为95.8～100.8%,相对标准差为1.2～2.0%.结论:本检测法方法准确,可用于实验室样品的测定.
- 胥达钱令嘉
- 关键词：血浆同型半胱氨酸
- 高压液相电化学法测定血浆肾上腺素和去甲肾上腺素被引量：3
- 2005年
- 目的建立高压液相电化学法测定血浆肾上腺素(E)和去甲肾上腺素(NE)的方法,用于检测应激前后机体血浆肾上腺素和去甲肾上腺素的变化。方法对20名受试人员,进行3 d的睡眠剥脱作为应激刺激,应用电化学检测器测定血浆肾上腺素和去甲肾上腺素浓度。观察应激前后血浆肾上腺素和去甲肾上腺素的变化。结果建立的方法回收率在95%以上,准确性及重复性较好。在试用中用该方法检测出应激后机体血浆去甲肾上腺素、肾上腺素较应激前明显升高(P<0.05)。结论建立的方法可用于实验室常规检查。
- 胥达吴淑庆王新兴冷雪杨发青钱令嘉
- 关键词：去甲肾上腺素肾上腺素应激
- pEGFP-N1质粒转染乳鼠心肌细胞的分布及效率被引量：14
- 2005年
- 目的 :研究 pEGFP N1质粒转染心肌细胞的分布及效率。 方法 :培养乳鼠心肌细胞 ,根据乳鼠心肌细胞的不同生长时间 (1～ 3d)进行 pEGFP N1质粒转染心肌细胞的实验研究。 结果 :乳鼠心肌细胞生长 1d时 ,pEGFP N1质粒转染心肌细胞的效率显著高于乳鼠心肌细胞生长 2d、3d时 ;pEGFP N1质粒转染心肌细胞后EGFP均匀地充满胞浆和胞核。结论 :pEGFP N1质粒转染乳鼠心肌细胞的效率与心肌细胞的生长期有关 ;EGFP在心肌细胞中均匀分布于胞浆和胞核。
- 冯红徐文琳战锐钱令嘉
- 关键词：转染心肌细胞转染效率
- 应激心肌细胞中NGFI-B转位至线粒体的氨基酸序列研究
- 2012年
- 目的探讨应激心肌细胞中NGFI-B发生线粒体转位的必需氨基酸序列,为揭示应激机体心肌损伤的病理学机理提供科学依据。方法建立心肌细胞应激损伤的离体细胞模型;构建NGFI-B缺失突变体与GFP的融合表达载体,分别命名为Δ1-pEGFP-N1(仅有N端152个AA的NGFI-B)和Δ2-pEGFP-N1(缺失N端152个AA的NGFI-B),并导入心肌细胞,采用细胞免疫荧光法观察其在应激心肌细胞中的亚细胞定位,采用流式细胞术观察离体心肌细胞的凋亡率。结果应激条件下,Δ1-pEGFP-N1转染心肌细胞后,发生向线粒体的转位,Δ2-pEGFP-N1转染心肌细胞后,仍滞留于核。Δ1-pEGFP-N1转染心肌细胞后,能显著降低应激引起的心肌细胞凋亡,Δ2-pEGFP-N1转染心肌细胞后,对应激引起的心肌细胞凋亡没有显著的保护作用。结论 NGFI-BN端的152个氨基酸对应激心肌细胞中NGFI-B发生线粒体转位进而导致细胞凋亡发挥重要作用。
- 冯红刘卫张德荣徐莉战锐王新兴钱令嘉
- 关键词：应激心肌细胞线粒体NGFI-B转位氨基酸序列
