黑龙江省自然科学基金(ZJY-0603-02)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：穆丹梅杨木蕾郑敏吴东来白宇更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所大庆油田总医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人分化抑制因子Id-2基因在大肠埃希氏菌中的高效表达及其多克隆抗体的制备被引量：1
- 2009年
- 目的在大肠杆菌中表达人Id-2与谷胱甘肽-S转移酶(GST)的融合蛋白,并制备抗人Id-2的多克隆抗体。方法从乳腺癌组织中提取总RNA,用RT-PCR扩增出Id-2基因的编码序列,克隆至表达载体pGEX-6P-1中,重组质粒经PCR、酶切、测序鉴定后,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达获得GST-Id-2蛋白,SDS-PAGE分析表达产物。通过亲和层析法纯化表达的GST-Id-2融合蛋白,Western-Blot检测重组抗原的免疫原性,并以此为抗原制备多克隆抗体。结果经PCR、酶切、测序鉴定证明,Id-2基因已正确克隆至pGEX-6P-1中,经IPTG诱导后,表达出相对分子质量40000的GST-Id-2融合蛋白。Western-Blot、ELISA和琼脂双向扩散实验鉴定所制备的多克隆抗体可以与GST-Id-2特异性反应。结论Id-2基因在在大肠杆菌中的成功表达及制备的多克隆抗体,为检测Id-2及其在各种组织中的表达提供了一种检测方法,也为分析Id-2分子结构及抗原表位奠定了基础。
- 童铁钢林燕穆丹梅白宇杨木蕾郑敏吴东来
- 关键词：基因表达多克隆抗体
- 人分化抑制因子Id-3基因在大肠埃希氏菌中的高效表达及其多克隆抗体的制备
- 从乳腺癌组织中提取总RNA,用RT-PCR扩增出Id-3的编码序列,克隆至表达载体pGEX-6P-1中,重组质粒经PCR、酶切、测序鉴定证明,Id-3基因已正确克隆至pGEX-6P-1中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,...
- 林燕童铁钢穆丹梅白宇杨木蕾郑敏吴东来
- 关键词：纯化多克隆抗体
- 文献传递
- 乳腺浸润性导管癌的超声表现与病理及Id3mRNA表达关系的研究
- 2008年
- 目的初步探讨Id3mRNA表达与乳腺浸润性导管癌(IDC)超声表现之间的关系。方法应用实时荧光定量RT-PCR检测36例IDC样本中Id3mRNA的表达,并与IDC超声表现对照分析。结果Id3mRNA在正常组织中的表达低于癌组织(P<<0.01)。IDC超声表现为毛刺征、周边导管扩张者Id3mRNA均呈高表达(P<0.01)。结论IDC声像图表现与病理组织学变化密切相关。IDC的二维超声征象可在一定程度上反应Id3mRNA的表达水平。
- 郑敏穆丹梅戴险峰郑淼魏晓冬刘磊杨木蕾
- 关键词：浸润性导管癌病理组织学
- 人分化抑制因子Id-3基因在大肠埃希菌中的高效表达及其多克隆抗体的制备
- 2008年
- 目的在大肠杆菌中表达人Id-3与谷胱甘肽-S转移酶(GST)的融合蛋白,并制备抗人Id-3的多克隆抗体。方法从乳腺癌组织中提取总RNA,用RT-PCR扩增出Id-3的编码序列,克隆至表达载体pGEX-6P-1中,重组质粒经PCR、酶切、测序鉴定后,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达获得GST-Id-3融合蛋白,SDS-PAGE分析表达产物,Western-Blot检测重组抗原的免疫原性。通过亲和层析法纯化表达的GST-Id-3融合蛋白,并以此为抗原制备多克隆抗体。结果经PCR、酶切、测序鉴定证明,Id-3基因已正确克隆至pGEX-6P-1中,经IPTG诱导后,表达出相对分子量为39000GST-Id-3融合蛋白。ELISA和琼扩试验鉴定所制备的多克隆抗体可以与GST-Id-3融合蛋白发生特异性反应。结论Id-3基因在大肠杆菌中的成功表达及制备的多克隆抗体,为检测Id-3及其在各种组织中的表达水平提供了一种检测途径,也为分析Id-3分子结构、抗原表位和生物学功能奠定了基础。
- 林燕童铁钢穆丹梅白宇杨木蕾郑敏吴东来
- 关键词：纯化多克隆抗体
