国家高技术研究发展计划(2003AA249031)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：王选年王青胡建和杨苏珍张改平更多>>
- 相关机构：河南科技学院西北农林科技大学河南省动物免疫学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 新城疫病毒F基因真核表达载体的构建及瞬时表达
- 2007年
- 应用PCR扩增出新城疫病毒F基因,将其克隆入pGEM-T载体,测序。然后将NDVF基因与高效的真核表达载体pcDNA4/HisMax相连,构建NDVF基因重组真核表达质粒pc4F,采用Superfect转染试剂将pc4F瞬时转染COS-7细胞,应用细胞免疫组化法检测其在细胞中的表达情况。结果表明,F基因能够在COS-7细胞中成功表达。
- 王青张彦明王选年张改平胡建和杨苏珍赵东邢广旭徐彦召赵光辉段艳华
- 关键词：新城疫病毒F基因真核表达
- 新城疫病毒F48E9株F1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 2008年
- 根据GenBank中新城疫病毒(NDV)F48E9株F1基因序列和原核表达载体pET-28a的克隆位点,设计1对引物,通过PCR方法获得了F1基因;将F1双酶切产物插入原核表达载体pET-28a,得到的重组子命名为pET-F1。用IPTG进行诱导将其在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行了表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blot分析,结果表明,NDV F1在pET-F1中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为31 ku。表达的重组蛋白为进一步研究NDV的免疫特性和分子生物学功能奠定了基础。
- 赵坤李敬玺王选年王三虎
- 关键词：新城疫病毒克隆原核表达
- 新城疫病毒F基因在大肠埃希菌中的表达及其抗原性分析被引量：1
- 2009年
- 构建新城疫病毒融合蛋白F基因的原核表达载体,并将其在宿主菌BL21(DE3)感受细胞中表达。以含有融合蛋白F基因的重组质粒pMD19T-F为模板,设计特异性引物,应用PCR技术扩增获得F基因的F1片段,定向插入原核表达载体pET-28a,构建重组质粒pET-F1,将构建成功的重组质粒pET-F1转化宿主菌BL21(DE3)感受态细胞经IPTG诱导,将其在宿主菌细胞中表达,表达产物用SDS-PAGE和Western blot方法检测。结果显示,成功克隆出了新城疫病毒F1基因片段序列852 bp。构建的pET-F1载体经PCR、双酶切、测序鉴定均无误,转化表达宿主菌后经SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,目的基因被成功表达,并具有良好的反应原性。成功构建了新城疫病毒的融合蛋白F基因原核表达载体,转化宿主细胞后成功表达了融合蛋白F1重组蛋白片段。
- 王青徐彦召胡建和王选年杭柏林
- 关键词：新城疫病毒F基因抗原性
- 鸡新城疫病毒分子生物学特性及检测方法研究进展被引量：2
- 2007年
- 王青张改平赵森林王选年胡建和王自良杨苏珍鲁晓翠肖治军
- 关键词：鸡新城疫病毒分子生物学特性败血性传染病RNA聚合酶副黏病毒分子结构
