国家自然科学基金(31360223)
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 相关作者：苏晓三汪珺杨柳陈睿乔飞更多>>
- 相关机构：昆明医科大学昆明市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨髓间充质干细胞预防手术后肿瘤肺转移动物模型研究被引量：2
- 2017年
- 背景与目的:近年来研究发现,肿瘤患者术后髓系抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)较术前升高,且其促肿瘤血管生成和肿瘤生长作用增强,骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)可抑制MDSCs活化与增殖。但围手术期MDSCs的变化与肿瘤术后转移的关系及BMSCs能否通过抑制MDSCs预防手术后肿瘤转移尚不清楚。该研究拟探讨围手术期MDSCs变化与手术后肿瘤转移的相关性及BMSCs对围手术期MDSCs和手术后肿瘤转移的影响。方法:C57BL/6小鼠经尾静脉注射LLC细胞后分为4组:对照组(C组)、麻醉组(A组)、麻醉后开腹组(AL组)及麻醉后开腹并肝叶切除组(ALH组)。AL组小鼠手术后分为2组:术后无治疗组(AL1组)和术后给予同系BMSCs治疗组(ALB组)。流式细胞术检测小鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中Gr-1+CD11b+细胞的含量;第14天计数小鼠肺表面转移灶。小鼠骨髓细胞体外诱导MDSCs体系中加入BMSCs共培养的方法探讨BMSCs对MDSCs生成的影响。结果:与C、A组相比,AL和ALH组小鼠肺转移灶显著增多(P<0.01);且ALH组较AL组显著增多(P<0.05)。手术后AL和ALH组小鼠PBMCs中Gr-1+CD11b+细胞与C、A组相比显著升高;与AL组比较,ALH组Gr-1+CD11b+细胞显著升高。第14天,AL及ALB组小鼠肺表面转移灶数量分别为38.00±9.57和6.54±1.49,差异有统计学意义(P<0.01)。ALB组小鼠PBMCs中Gr-1+CD11b+细胞与AL1组相比明显降低。小鼠骨髓细胞体外诱导MDSCs体系中加入BMSCs可显著抑制MDSCs的活化和增殖。结论:手术应激诱导MDSCs并促肿瘤肺转移形成,BMSCs可以抑制MDSCs的生成进而抑制手术后肺转移形成。
- 汪珺苏晓三杨柳乔飞王翼寅陈睿
- 关键词：间质干细胞髓系细胞手术后期间
- 肺癌围手术期髓系抑制细胞与调节性T细胞的相关性被引量：1
- 2018年
- 目的检测肺癌患者围手术期外周血CD11b^＋CD33^＋人类自细胞抗原DR基因（HLA-DR）^-髓系抑制细胞（MDSCs）和CD4^＋CD25^＋又状头／翅膀状螺旋转录因子（Foxp3）^＋调节性T细胞（Treg）的变化并探罚两者的相关性。方法选择择期开胸肺癌根治术患者98例，年龄42-77岁，体重49～73k。分别于术前（T1）、术中（T2）、术后第1天（T3）、术后第3天（T4）和第7天（T5）采集外周血，采用流式细胞术（FCM）和血细胞分析测定MDSCs和Treg浓度并分析T1-T5时两者的相关性，FCM和免疫磁珠法分别分选T1～T5时MDSCs与T1时CD4^＋细胞，将MDSCs与CD4^＋细胞混合培养（未加Transwell小室组）或采用Transwell小室将MDSCs与CD4^＋细胞相隔共培养（加入Transwell小室组），体外培养至第5天时FCM检测Treg。结果T3～T5时MDSCs浓度较T1显著升高[分别为（0．684±0．326）×10^9／L、（0．545±0．307）×10^9／L、（0．496±0．302）×10^9／L和（0．219±0.133）×10^9／L，P值分别为0．000、0．000和0．004]；T5时Treg浓度较T1显著升高[分别为（0．051±0．033）×10^9／L和（0．034±0．020）×10^9／L，P=0．006]。T3-T5时MDSCs和Treg浓度呈正相关（Pearson相关系数r分别为0．2998、0．4342和0．4773，P值分别为0．004、0．000和0．000）；T3-T5时MDSCs体外诱导Treg细胞数较T1时明显增多[Treg细胞数分别为（11．24±2．85）×10^4、（10．80±3．10）×10^4和（14．94±4．22）×10^4和（6．71±2．56）×10^4个，P值分别为0．003、0．000和0．000]，与未加Transwell小室组比较，加入Transwell小室组T1-T5时MDSCs诱导Treg细胞数显著下降（P值分别为0．008、0．004、0．000、0．000和0．000）。结论肺癌患者术后MDSCs与Treg呈正相关，术后MDSCs诱导Treg能力较术前增强且MDSCs诱导Treg依赖细胞间相互接触。
- 汪珺杨柳苏晓三王翼寅陈睿洪志鹏
- 关键词：肺癌围手术期调节性T细胞
- 肺癌围手术期髓系抑制细胞的变化及对肿瘤生长和血管生成的影响被引量：3
- 2016年
- 目的:检测肺癌围手术期外周血髓系抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)的变化,并探讨其对肿瘤生长和肿瘤血管生成的影响。方法:采用FCM和血细胞分析技术检测98例肺癌患者围手术期外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中CD11b^+CD33^+HLA-DR^-细胞百分比和浓度,蛋白芯片和ELISA检测血清中细胞因子的浓度。将围手术期CD11b^+CD33^+人类白细胞抗原DR(human leukocyte antigen-DR,HLA-DR)^-细胞和人肺腺癌细胞A549接种至裸鼠皮下,观察其对肿瘤生长和肿瘤血管生成的影响。结果:肺癌患者术后PBMCs中CD11b^+CD33^+HLA-DR-细胞百分比和浓度均较术前显著升高(P值均<0.05);外周血清CXC趋化因子配体5(CXC chemokine ligand 5,CXCL5)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白1α(macrophage infl ammatory protein-1α,MIP-1α)/MIP-1β和MIP-3α等趋化因子以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的浓度均较术前显著升高(P值均<0.05)。裸鼠致瘤能力观察结果显示,术后MDSCs促肿瘤生长和肿瘤血管生成的能力较术前MDSCs显著增强(P值均<0.05)。结论:肺癌患者术后PBMCs中MDSCs较术前增加,且其促肿瘤血管生成和肿瘤生长的作用增强,提示MDSCs可能成为预防肿瘤术后转移的新靶点。
- 汪珺苏晓三乔飞杨柳王益寅尹燕锋洪志鹏
- 关键词：肺肿瘤围手术期细胞免疫髓系细胞
- 骨髓间充质干细胞通过抑制髓系抑制细胞预防肺纤维化形成
- 2021年
- 目的探讨Gr-1^(+)CD11b^(+)髓系抑制细胞(MDSC)在博来霉素(BLM)诱导小鼠肺纤维化形成中的作用以及骨髓间充质干细胞(MSC)对肺纤维化治疗作用的可能机制。方法体外分离培养6周龄雄性BALB/c小鼠间充质干细胞(MSC)。将104只雌性BALB/c小鼠按随机数字表法分为3组:对照组(32只)气管内注入生理盐水(NS)后经尾静脉注射NS;BLM组(32只)气管内注入BLM后经尾静脉注射NS;MSC组(40只)气管内注入BLM后经尾静脉注射MSC(细胞总数1.5×106个)。于造模后第1、3、5、8、11、14、18、21、25、32天采集各组小鼠尾静脉血,流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中Gr-1^(+)CD11b^(+)细胞含量。于造模后第3、8、18和32天各组均处死8只小鼠并摘取小鼠肺脏流式细胞术检测小鼠肺组织中Gr-1^(+)CD11b^(+)细胞含量,同时留取肺组织行Masson染色。提取MSC组小鼠肺组织的DNA,通过聚合酶链反应(PCR)-琼脂糖电泳法检测小鼠的性别决定基因(sry基因)。结果 MSC组第3和第8天时肺泡炎较BLM组减轻(分别为1.32±0.25和2.53±0.56;1.06±0.42和2.27±0.82,均P<0.01);MSC组第18和第32天时肺纤维化较BLM组减轻(分别为1.02±0.44和1.81±0.74;1.51±0.73和2.72±0.54,均P<0.05)。BLM组小鼠PBMC和肺组织中Gr-1^(+)CD11b^(+)细胞较对照组显著升高;MSC组小鼠PBMC和肺组织中Gr-1^(+)CD11b^(+)细胞较BLM组明显降低(P<0.05)。PCR检测结果显示,在MSC治疗后第12、24、48、72和96 h小鼠肺组织可以检测到sry基因。结论 MDSC参与BLM诱导的肺纤维化形成,MSC可以通过抑制MDSC预防肺纤维化形成。
- 尹燕锋杨柳于璐王翼寅陈睿周开华苏晓三
- 关键词：肺纤维化间充质干细胞博来霉素
- 小鼠骨髓源树突状细胞的体外培养及鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的建立小鼠骨髓源树突状细胞(bone marrow dendritic cell,BMDC)的培养方法并对其表型和功能进行鉴定.方法无菌取BALB/c小鼠股骨、胫骨中的骨髓细胞,以粒-巨噬细胞集落刺激因子体外诱导分化为BMDC,倒置显微镜动态观察BMDC增殖和形态变化情况,流式细胞术分析细胞表型,并检测其抗原吞噬功能.结果小鼠骨髓细胞体外诱导可获得大量未成熟和成熟BMDC,呈现典型的树突状形态.未成熟BMDC的细胞表型为CD11chighCD40lowCD86low MHC-IIlow,具有较强的抗原吞噬能力.未成熟BMDC经细菌脂多糖刺激后可分化为高表达CD11c、CD40、CD86及MHC-II类分子的成熟BMDC.结论体外诱导培养可获得小鼠骨髓来源的未成熟和成熟DC.
- 王翼寅陈睿汪珺苏晓三张蕾
- 关键词：树突状细胞小鼠近交系骨髓细胞
