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基于滚环扩增技术的蛋白质高灵敏检测被引量：1: 2012年; 目的:基于滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)结合免疫反应建立一种蛋白质的高灵敏检测方法。方法:根据双抗体夹心法原理,以链酶亲和素为桥梁,生物素修饰的单链寡核苷酸引物可以高亲和力地链接到生物素标记的免疫复合物上,建立蛋白质的滚环扩增技术检测平台,并将其用于血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的检测。结果:在优化实验条件下,对VEGF检测的灵敏度达到10fM。结论:与常规的酶标二抗体系ELISA法相比,本方法具有更高的灵敏度,适于低丰度蛋白质的检测,此方法的进一步完善将为疾病新的蛋白标志物的筛选以及临床诊断提供有力的工具。; 张俊曾照芳鲁卫平; 关键词：滚环扩增 VEGF 高灵敏度蛋白质检测

表面等离子共振技术结合滚环扩增法检测丙型肝炎病毒: 2012年; 目的研究滚环扩增(RCA)技术结合特异性表面等离子共振(SPR)金膜芯片检测丙型肝炎病毒(HCV)的方法。方法根据丙型肝炎x-tail区域的特异检测序列,设计并合成针对RCA法检测HCV的探针和引物,分成3组(实验组、阴性样品组和阳性样品组)进行RCA实验,验证RCA法检测HCV的特异性。将模板浓度按10倍梯度稀释,评价SPR技术结合RCA法检测的检测限。在普通金膜芯片的基础上进行表面化学处理,形成高特异性核酸芯片,用抗蛋白实验验证芯片抗蛋白能力。采用双通道SPR仪对RCA反应及信号放大反应进行实时观测。运用SPR技术结合RCA法检测63例临床血液样品,并与Real-Time PCR法比较,评价其灵敏度和特异度。结果 SPR技术结合RCA法对HCV阳性标准品的最低检测浓度为1 pmol/L,低于Real-TimePCR法的检测限(0.1 nmol/L)。SPR芯片具备良好的抗蛋白质非特异性吸附能力。双通道SPR仪对RCA芯片系统的检测信噪比为100,实现了对HCV的检测。对临床样品的检测灵敏度为90.0%(27/30),特异度为84.8%(28/33)(χ2=8.10,P=0.004)。结论 SPR技术结合RCA法将生物传感技术及原位扩增技术相结合,实现了快速、非标记和实时检测HCV。; 季明辉胡贵方郑义顾大勇龙军鲁卫平何建安谈书勤史蕾刘春晓赵纯中徐云庆徐华欧青叶孙秋香滕娟; 关键词：表面等离子共振丙型肝炎滚环扩增

生物传感器在分子生物学诊断中的应用被引量：1: 2013年; 生物传感器是含有生物识别元件与信号转换器的一类传感设备。它便携低耗，操作简单，可以提供快速、实时及准确的结果，因此在分子诊断领域有巨大的应用前景。本文分析了近年来生物传感器在病原微生物的分子诊断、临床药物检测以及分子遗传学诊断等方面的研究应用进展。; 陈鸣; 关键词：分子诊断技术

RCA技术联合免疫反应检测低丰度蛋白质的研究: 2013年; 目的:建立一种检测微量蛋白质的滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)。方法:以血管内皮生长因子为研究对象,利用链亲和素做桥接,将免疫反应和RCA技术进行有效的结合,构建一种新型的蛋白质检测方法。结果:通过优化实验条件,对血管内皮生长因子检测的灵敏度达到10fM,大大超过传统的ELISA方法。结论:RCA技术联合免疫反应能够高特异性、高灵敏度地检测低丰度蛋白质,具有广阔的临床应用前景。; 张俊曾照芳; 关键词：RCA 血管内皮生长因子

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重庆市科技攻关计划(2011AC5033)

文献类型

领域

主题

机构

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