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PSMA7对A549细胞表面黏附分子表达的影响被引量：1: 2014年; 目的探讨PSMA7表达量的变化对A549细胞表面黏附分子ICAM-1,VCAM-1和CD44表达的影响。方法采用流式细胞仪分别检测高表达PSMA7的A549细胞[pcDNA3.1(-)/PSMA7组]和低表达PSMA7的A549细胞(shPSMA7组)表面黏附分子ICAM-1,VCAM-1和CD44的表达情况。结果与高表达阴性对照组[pcDNA3.1(-)组]相比,pcDNA3.1(-)/PSMA7组的ICAM-1(t=86.325,P=0.000)和VCAM-1(t=16.337,P=0.000)的表达量均显著降低,CD44表达量则无明显变化(t=-0.545,P=0.615),而与低表达阴性对照组(shNC组)相比,shPSMA7组ICAM-1(t=-119.827,P=0.000)和VCAM-1(t=-26.68,P=0.000)表达量均显著增高,CD44表达量则无明显变化(t=-848,P=0.444)。与pcDNA3.1(-)组相比,pcDNA3.1(-)/PSMA7组穿膜侵袭细胞的数量明显减少(t=3.553,P=0.024),而shPSMA7组明显高于shNC组(t=-3.207,P=0.033)。结论高表达或干扰PSMA7可影响A549细胞表面黏附分子ICAM-1,VCAM-1的表达,提示PSMA7可能因此参与肺腺癌细胞的侵袭和转移。; 黄湘王莹袁春雷谭家余; 关键词：A549细胞黏附分子

靶向抑制UBE2C基因对SMMC-7721细胞生物学行为的影响: 2013年; 目的将构建好的UBE2C干扰质粒转入SMMC-7721细胞中,观察其对SMMC-7721细胞生物学行为的影响。方法采用脂质体法将构建好的UBE2C干扰质粒转入SMMC-7721细胞株中,潮霉素筛选4周,并经Western blot鉴定,选出干扰效果最佳的低表达稳定株(shUBE2C组)用于后续实验。用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,软琼脂克隆形成实验检测克隆形成能力。结果 Western blot检测显示,转shUBE2C组UBE2C的蛋白表达水平低于转阴性对照shNC组(P<0.05)。shUBE2C组的SMMC-7721细胞生长曲线明显右移,显示靶向抑制UBE2C可降低SMMC-7721细胞的增殖能力。与shNC组相比,shUBE2C组细胞的G1期细胞比例明显增高(P﹤0.05),而S期的比例明显降低(P﹤0.05),提示其延缓细胞周期进程。shUBE2C组的克隆形成率明显低于shNC组(P﹤0.05),提示其降低克隆形成能力。结论 UBE2C低表达可改变SMMC-7721细胞的生物学行为。; 黄湘谭家余李冬秀; 关键词：SMMC-7721细胞增殖细胞周期

过表达HSPC238对Bel7402细胞周期的影响被引量：10: 2011年; 目的:构建pcDNA3.1(-)/HSPC238真核表达载体,研究过表达HSPC238基因对人肝癌细胞株Bel7402细胞周期的影响。方法:采用PCR法从pET28b/HSPC238重组质粒中克隆得到HSPC238 cDNA全长序列,并将该片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)中,构建pcDNA3.1(-)/HSPC238真核表达质粒。经酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染Bel7402细胞,随后经G418筛选4周,得到阳性克隆细胞株。用RT-PCR和Western blot技术分别检测HSPC238基因在Bel7402中的mRNA和蛋白水平的表达。随后用饥饿法使各组细胞周期同步化,再用流式细胞仪分析HSPC238过表达对细胞周期的影响。结果:pcDNA3.1(-)/HSPC238经酶切鉴定及DNA测序证实,目的基因HSPC238的序列完全正确;RT-PCR和Western blot检测显示,与转染pcDNA3.1(-)组和未转染组相比较,转染pcDNA3.1(-)/HSPC238组的mRNA和蛋白表达水平均明显增高,但前两者间没有差异。用饥饿法同步化后,流式细胞仪检测显示过表达HSPC238可延缓Bel7402细胞株从G1期进入S期。结论:成功构建了pcDNA3.1(-)/HSPC238真核表达载体,并在Bel7402中表达。初步发现过表达HSPC238可延缓肝癌细胞的细胞周期,为更进一步研究HSPC238蛋白的功能奠定了基础。; 黄湘谭家余王穗海李明; 关键词：过表达 BEL7402 细胞周期

过表达泛素偶联酶E2C对293T细胞增殖的影响被引量：2: 2011年; 目的:构建稳定过表达人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)的293T人胚肾细胞株,初步探讨其对293T细胞增殖的影响。方法:采用脂质体法将已成功构建的pcDNA3.1(-)/UBE2C真核表达质粒转入293T人胚肾细胞株中,随后经G418筛选4周,得到阳性克隆细胞株;用Western blot技术检测并鉴定UBE2C基因在293T细胞中的表达情况;用MTT法检测UBE2C对293T细胞增殖的影响。结果:Western blot检测显示,转pcDNA3.1(-)/UBE2C组293T细胞的UBE2C蛋白表达水平明显高于转pcDNA3.1(-)组(P<0.01)。MTT法检测结果显示转pcDNA3.1(-)/UBE2C组293T细胞的增殖速度明显快于转pcDNA3.1(-)组(P<0.01)。结论:成功建立稳定过表达UBE2C的293T细胞株,过表达UBE2C可促进293T细胞的增殖。; 黄湘邱玉林谭家余乔亚峰李明; 关键词：过表达增殖

人蛋白酶体α7亚基在原发性肝细胞肝癌中的表达及临床意义被引量：3: 2012年; 目的:探讨人蛋白酶体α7亚基(PSMA7)与原发性肝细胞肝癌(HCC)发生发展的关系。方法:采用免疫组织化学法检测254例HCC中PSMA7蛋白的表达。结果:在癌组织细胞质中,发现不同临床分期和病理分级之间,PSMA7的表达均无明显差异(P>0.05),但不同肝硬化程度间具有显著性差异(P<0.01),以早期肝硬化患者肝细胞表达量最高。在癌组织细胞核中,不同临床分期之间PSMA7的表达无明显差异(P>0.05),但不同病理分级之间具有显著性差异(P<0.05),同时与肝硬化的程度有一定关系(P<0.05),亦以早期肝硬化患者肝细胞表达量最高。另外,PSMA7的表达在癌组织和癌旁组织的细胞质中无明显差异(P>0.05),而在细胞核中具有显著性差异,癌组织高于癌旁组织(P<0.01)。淋巴结转移组细胞核中的PSMA7表达高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论:PSMA7在HCC细胞核中表达增高,与病理分期有关。此外,PSMA7的表达与肝硬化程度和淋巴结转移有关。; 黄湘邹浩元杨宇辉谭家余邱玉林; 关键词：肝细胞肝癌肝硬化

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广东省科技计划工业攻关项目(2010B031600307)