广东省科技计划工业攻关项目(0711220600357)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：冀晨阳张金明董月桐韦喆潘淑娟更多>>
- 相关机构：中山大学附属第二医院中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠肌源性干细胞高表达CD34、Sca-1、Bcl-2和desmin
- 2011年
- 目的:探讨小鼠肌源性干细胞(MDSCs)的生物学特性和表型。方法:取小鼠骨骼肌,用酶分步消化,应用差速贴壁法进行纯化获取MDSCs,观察细胞的形态,对MDSCs分别进行增殖能力、克隆形成率和融合情况等鉴定;通过流式细胞术、免疫荧光法及免疫印迹法(Western blotting)等检测初步确定细胞表型。结果:经差速贴壁法获取的MDSCs为圆形或短梭形细胞,聚集成簇,呈对数生长;细胞倍增时间(9.69±2.08)h,克隆形成率(13.35±2.54)%;细胞在高汇合度(>50%)或低血清(2%FBS)培养时,极易融合成肌管或肌细胞链;流式细胞术和免疫荧光技术鉴定:CD34、Sca-1、Bcl-2和desmin在原代MDSCs中的表达均>90%;Western blotting检测显示随着细胞的纯化,desmin表达越来越强,α-SMA表达越来越弱。结论:MDSCs通过差速贴壁法获取时纯度较高,它具有高水平表达CD34、Sca-1、Bcl-2和desmin的生物学特性,这4种蛋白可作为鉴定MDSCs的标志物。MDSCs增殖旺盛,可在体外大量扩增,是组织工程研究的一种新型种子细胞。
- 韦喆张金明安庚冀晨阳潘淑娟
- 关键词：肌源性干细胞CD34蛋白质BCL-2结蛋白
- 兔肌源性干细胞分离培养及诱导分化为神经细胞的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨兔肌源性干细胞（MDSC）分离纯化及诱导分化为神经细胞的方法。方法取2—3周龄新西兰兔大腿肌肉，采用改进的Preplating技术分离MDSC，并应用流式细胞仪（FCM）、免疫细胞化学检测细胞表型。添加神经生长因子、全反式维甲酸、β-巯基乙醇诱导MDSC分化为神经细胞并运用免疫细胞化学和FCM检测特异性神经巢蛋白（Nestin）的表达。结果经过连续6d的差速贴壁分离得到小圆形及小菱形细胞，传代后进一步纯化，FCM结果显示这些细胞〉90％为desmin^＋，〉90％为bcl-2^＋，〉95％为CD45^-。免疫细胞化学显示大多数细胞为desmin^＋及bcl-2^＋。诱导后的细胞〉90％为Nestin^＋．结论采用改进的Preplating技术能很好地分离出MDSC，并能在体外诱导分化为神经细胞，为构建组织工程化尿道海绵体提供种子细胞。
- 董月桐冀晨阳张金明
- 关键词：肌源性干细胞神经细胞分化
