国家自然科学基金(30370333)
- 作品数:2 被引量:13H指数:2
- 相关作者:向本琼田文洪吴润果岳觇宇李宁更多>>
- 相关机构:北京师范大学河北旅游职业学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家基础科学人才培养基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- SMART法构建蚕豆全植株cDNA文库被引量:11
- 2007年
- 采用了一种简单而快速的全长cDNA文库构建法,即SMART法,并应用cDNA片段与质粒共转化大肠杆菌的方法,成功地构建了蚕豆全植株cDNA文库.
- 岳觇宇吴润果田文洪向本琼
- 关键词:共转化
- 大肠杆菌碱性磷酸酶突变体的构建及其结构与功能研究被引量:2
- 2007年
- 以大肠杆菌碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)高活性突变株(L138PG233S)为亲本,采用重叠延伸PCR的方法进行定点突变,成功获得了氨基酸替换突变体3个,并对它们的酶活性、特性、内源荧光发射峰等与亲本酶进行了比较分析.结果发现:与亲本酶相比,突变体酶的酶活性降低了18%-85%,Vmax值降低,Km增加,内源荧光发射峰λmax增大等.与亲本酶相同,Zn^2+,Mn^2+,Mg^2+仍是它们的激活剂,Na3PO4是它们的抑制剂;这些实验结果说明突变体酶活性的降低直接与其构象变化有关,被替换的氨基酸在维持碱性磷酸酶的结构和功能方面具有特定的作用.
- 王秋颖李宁向本琼
- 关键词:重叠延伸PCR突变体特性分析荧光光谱