国家重点基础研究发展计划(2006cb500700) 作品数:65 被引量:156 H指数:5 相关作者: 汪华侨 唐北沙 郭纪锋 严新翔 陈生弟 更多>> 相关机构: 中南大学 中山大学 上海交通大学医学院附属瑞金医院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 一般工业技术 哲学宗教 更多>>
应用SYBR Green I实时荧光定量聚合酶链反应检测常染色体隐性遗传早发性帕金森综合征的parkin基因外显子重排突变 被引量:5 2009年 目的建立应用SYBR Green I实时荧光定量聚合酶链反应(Real—time PCR,RT—PCR)检测parkin基因外显子重排突变的技术平台,应用该技术对常染色体隐性遗传早发型帕金森综合征(autosomal recessive early—onset parkinsonism,AREP)家系进行parkin基因外显子重排突变分析。方法应用SYBR Green I RT—PCR技术对32个中国AREP家系进行parkin基因外显子重排突变分析。结果14个家系先证者存在parkin基因外显子重排突变,其中3个为纯合缺失突变、3个为复杂杂合缺失突变和8个杂合缺失突变,未发现外显子重复突变,突变主要累及第2~4号外显子。结论建立了应用SYBR Green IRT-PCR技术检测parkin基因外显子重排突变的基因检测平台;中国AREP家系的parkin基因外显子重排突变频率为43.8%,与国外报道相似。 聂利珞 郭纪锋 张海南 张学伟 王磊 沈璐 江泓 夏昆 唐北沙 严新翔关键词:帕金森障碍 有机化学品 老年性痴呆的蛋白质组学研究进展 被引量:4 2007年 蛋白质组学是全景式研究蛋白质网络及其动态变化的一门新兴科学,其研究成果为疾病临床诊断、发病机制等提供了理论依据和技术基础。双向电泳技术、质谱技术和生物信息学是蛋白质组学的三大支撑技术。本文阐述了蛋白质组学在老年性痴呆患者脑脊液、脑组织、外周血中的研究进展,重点阐述其在探索发病机制、寻找诊断标志物等方面的应用。 任美峰 范海虹 汪华侨关键词:老年性痴呆 双向电泳技术 发病机制 生物信息学 诊断标志物 过表达OGCP对鱼藤酮和突变型Parkin致HEK293细胞毒性的保护作用 2010年 目的研究α-酮戊二酸载体蛋白(2-oxoglutarate carrier protein,OGCP)和Parkin对HEK293细胞功能的影响。方法采用流式细胞术检测经鱼藤酮、OGCP和/或Parkin处理的HEK293细胞细胞凋亡、线粒体膜电位和细胞内活性氧水平。结果①野生型Parkin和OGCP能够提高经鱼藤酮诱导的HEK293细胞的线粒体膜电位,降低细胞内活性氧和细胞凋亡率,而突变型Parkin(R42P和T240R)则降低HEK293细胞尤其是经鱼藤酮诱导的HEK293细胞的线粒体膜电位,增加细胞内活性氧,促进细胞凋亡;②此外,还发现OGCP可以抑制由于Parkin突变(R42P和T240R)导致的线粒体膜电位降低和活性氧增加,减少Parkin突变(R42P和T240R)导致的细胞凋亡。结论①Parkin蛋白和OGCP可能与维持线粒体正常功能相关;②过表达突变型Parkin(R42P和T240R)蛋白可能抑制线粒体功能,促进细胞凋亡;③过表达OGCP可能对鱼藤酮和突变型Parkin蛋白细胞毒性有一定的保护作用。 王春喻 唐北沙 张海南 汤建光 郭纪锋 严新翔 谭利明关键词:PARKIN 帕金森病相关蛋白的作用研究进展 2006年 帕金森病(Parkinson disease,PD)是第二常见的神经变性疾病。其主要临床特征是静止性震颤、肌强直、运动减少和姿势平衡障碍等;主要病理改变是中脑黑质多巴胺能神经元进行性变性坏死,残存神经元中Lewy小体形成。5~10%帕金森病患者有家族史。虽然,大部分帕金森病病例为散发型,但阐明家族性帕金森病的分子机理对于整个帕金森病发病机制的研究有着重大的意义。本文就目前已经明确的帕金森病相关蛋白的作用机理作一综述。 肖彬 郭纪峰 唐北沙关键词:家族性帕金森病 相关蛋白 中脑黑质多巴胺能神经元 神经变性疾病 姿势平衡障碍 静止性震颤 阿尔茨海默病免疫异常及Aβ免疫应答功能的调节 被引量:2 2006年 近年研究表明免疫功能异常与阿尔茨海默病(AD)的发生密切相关,免疫炎症机制在AD发生发展过程中具有重要作用。来自实验及临床的研究资料提示AD动物模型及AD患者的体液免疫反应和细胞免疫反应功能异常。AD患者与健康同龄老人血清和脑脊液中T细胞、B细胞及细胞因子等出现明显差异。本文就AD发病的免疫异常机制和AD的特异性细胞免疫、体液免疫及细胞因子进行综述,并简要概述β淀粉样蛋白免疫应答功能的调节。 郑敏 汪华侨关键词:阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白 体液免疫 细胞免疫 hTERT基因转染对人胚胎大脑皮质神经元生长的影响 被引量:7 2008年 目的观察hTERT基因转染后对人胚胎大脑皮质神经元生长活力的影响。方法制备pSU-CMV-hTERT腺病毒,以MOI感染人胚胎大脑皮质神经元。免疫细胞化学荧光染色观察神经元内hTERT表达。MTT法测量接种病毒后24h、72h、1周、2周、3周的神经元活力。结果经鉴定正确的重组质粒pSU-CMV-hTERT与骨架质粒正确重组,经包装扩增后得到含hTERT基因的腺病毒。病毒转染24h时荧光染色可见神经元内有hTERT表达,第3周末表达减弱。hTERT基因转染后的神经元平均活力较对照组高,转染病毒后24h、72h、1周、2周、3周,hTERT基因转染对神经元的保护率分别为27.4%、42.4%、17.3%、7.4%和15.9%。结论hTERT基因转染对人胚胎大脑皮质神经元有一定的保护作用。 张洁 廖亚平 吴灵芝 孔令平 郑敏 汪华侨关键词:端粒酶 大脑皮质神经元 脊髓小脑性共济失调14型的研究进展 2008年 脊髓小脑性共济失调14型(spinocerebellar ataxia 14,SCA14)是一种常染色体显性遗传的神经系统退行性疾病,表现为共济失调、构音障碍、眼球震颤等,其致病基因——蛋白激酶Cγ基因(PRKcG)已被定位及克隆,并已证实PRKCG点突变而非核苷酸重复突变。 易继平 唐北沙关键词:脊髓小脑性共济失调 神经系统退行性疾病 常染色体显性遗传 蛋白激酶C 构音障碍 眼球震颤 中国汉族散发早发性帕金森综合征的parkin基因突变分析 背景帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种中老年人群常见的运动障碍疾病,60岁以上人群患病率为1%,50岁以下患病较少见,约占PD人群的5%~10%。60岁以上发病的PD称为迟发性PD,50岁以下... 聂利珞 郭纪锋 张海南 左星 王磊 张学伟 严新翔 沈璐 潘乾 夏昆 唐北沙线粒体DNA缺失细胞(ρ^0细胞)的构建与鉴定 被引量:3 2010年 目的探讨构建线粒体缺失细胞(ρ0细胞)的方法,为后继研究提供细胞模型。方法采用5μg/mL和7.5μg/mL两种浓度溴化乙锭持续作用于SH-SY5Y细胞构建线粒体缺失细胞,透射电镜观察和PCR法鉴定。结果 SHSY5Y细胞经过7.5μg/mL溴化乙锭持续作用95d后可见细胞线粒体肿胀变圆,基质消失,变成只剩外壳的"鬼影样"结构,线粒体嵴极少且变形;mtDNAPCR扩增未见目的条带。结论成功构建线粒体缺失细胞,为后继研究奠定细胞模型基础。 刘妍 孔令平 陈胜国 汪华侨关键词:溴化乙锭 线粒体 18/19F-PET药物自动化合成模拟实验的教学实践 被引量:1 2017年 放射性药物是PET显像的核心技术之一,其制备过程要求快速、高效、自动化完成。随着PET技术的快速推广,各国对放射性药物专业人才的需求不断增加。为培养本科生对放射化学应用技术的兴趣、普及放射性药物知识,在国家973、863项目资助下,将科研成果转化为教学实践:自2012年起,开设“本科生综合设计实验”课程——18/19F-PET药物自动化合成模拟实验,在自行研制的具有模拟合成PET药物功能、便于拆装的Synth8型自动化合成装置上完成教学实验,并利用TLC和LC-MS/MS方法定性和定量分析产物。本课程与当前放射性药物的实际应用紧密结合,将最新科研成果转化为教学实践,有助于拓展大学生科研思路,培养科学素养,提升科研能力。 姚新月 张利芳 曹建花 张岩 乔晋萍 李崧 朱霖关键词:自动化合成 LC-MS/MS