黑龙江省“十五”科技攻关项目(GA02C101)
- 作品数：17 被引量：175H指数：8
- 相关作者：周东坡赵凯马玺平文祥王世伟更多>>
- 相关机构：黑龙江大学齐齐哈尔大学黑龙江东方学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省“十五”科技攻关项目国家自然科学基金黑龙江省海外学人科研资助项目更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生农业科学更多>>
- 内生真菌发酵生产紫杉醇的研究现状与展望被引量：37
- 2008年
- 抗癌药物紫杉醇已在临床上广泛应用,但受原料红豆杉树木短缺的制约,存在巨大的供需差距,而内生真菌发酵生产紫杉醇是解决紫杉醇药源问题的很有前景的途径之一。结合课题组多年来开展的科学试验研究工作,概述了内生真菌发酵生产紫杉醇的优势、产紫杉醇内生真菌的分离研究现状和生物多样性及提高内生真菌生物合成紫杉醇量的途径。
- 赵凯平文祥周东坡
- 关键词：紫杉醇生物合成内生真菌
- 紫杉醇产生菌及其工程菌株之间的AFLP遗传差异分析被引量：1
- 2005年
- 采用AFLP技术对三株紫杉醇产生菌(HQD33、HQD48、HQD54)及HQD33菌株经复合诱变后再经原生质体诱变得到的两株诱变株UL50-6和UV40-19及其融合菌株J1-3进行了分析,结果表明三株紫杉醇产生菌分属不同的种属,同时首次从分子水平上证实Z35-8、J1-3为两株不同的融合子,为下一步的基因工程育种工作中的基因定位和分子克隆提供丰富可靠的分子标记。
- 王世伟王福全马玺刘军齐小辉周东坡
- 关键词：紫杉醇产生菌扩增片段长度多态性
- 紫杉醇产生菌HU1353分类地位的探讨被引量：7
- 2004年
- 研究了从东北红豆杉(Taxus cuspidarta)树皮中分离到的一株内生真菌HU1353,经微生物发酵法证明可产生紫杉醇后,进一步对其群体形态和个体形态进行了观察,并探讨其分类地位为链格孢属(Alternaria)一新种。模式菌株保存于黑龙江大学微生物重点实验室。
- 葛菁萍平文祥周东坡
- 关键词：紫杉醇产生菌链格孢属
- 紫杉醇高产菌株的原生质体诱变选育及其遗传变异初探被引量：23
- 2005年
- 以紫杉醇产生菌NCEU_1为出发菌株,分别采用紫外线和紫外线与氯化锂复合诱变方法对其原生质体进行诱变,获得了两株高产紫杉醇的突变株———UV4 0 - 1 9和UL50 - 6 ,其紫杉醇产量从出发菌株的314 0 7μg L分别提高至376 38μg L和392 6 3μg L ;同时,又采用RAPD和同工酶技术对出发菌株NCEU_1与两高产株UV4 0 - 1 9和UL50 - 6 间的遗传差异进行了研究。结果表明,出发菌株与诱变菌株之间以及两诱变菌株之间都存在明显差异。
- 赵凯平文祥马玺刘军周东坡
- 关键词：紫杉醇产生菌原生质体诱变
- 紫杉醇产生菌的细胞总核酸提取被引量：4
- 2003年
- 树状多节孢 (Nodulisporiumsylviforme)为中国新记录属种 ,首次发现它可产生特效抗癌药物紫杉醇 ,国内外尚未见其DNA提取等方面的研究报道。为了获得高质量的DNA ,利用单因素试验对其细胞总核酸的提取方法进行了探索。找到了一套适合紫杉醇产生菌DNA的提取较为简便易行可靠的方法。用此法直接从紫杉醇产生菌中提取DNA ,并将所提取DNA进行随机引物扩增 (RAPD) 。
- 张鹏王世伟解玉红张彦丰葛菁萍平文祥马玺赵凯齐小辉马玉超周东坡
- 关键词：树状多节孢RAPD东北红豆杉中国新记录属CTAB法
- 一种适合抗癌药紫杉醇产生菌AFLP分析的DNA提取方法被引量：4
- 2006年
- 比较研究了2种常规的DNA提取方法及一种新改进的抗癌药紫杉醇产生菌DNA提取方法.结果表明,CTAB提取法DNA产量低,多糖和蛋白质含量高;高盐低pH法(SD S法)提取DNA的产量较高,蛋白质和多糖含量高,需要进一步去除;新改进的DNA提取方法,DNA产量极高,而且蛋白质含量和多糖含量也低,适合AFLP分子标记技术对该菌的分子生物学研究.
- 王世伟董原李铁马玺周东坡
- 关键词：DNA提取方法紫杉醇产生菌AFLP
- 红豆杉细胞培养生产紫杉醇被引量：12
- 2004年
- 红豆杉细胞培养是工业化生产紫杉醇的很有前景的途径之一。综述了红豆杉细胞培养过程中外植体的选择、愈伤组织的诱导、培养方式、生物反应器及培养动力学等方面的最新研究进展 。
- 马玺马英刘威周东坡
- 关键词：红豆杉细胞培养紫杉醇
- 产紫杉醇菌株原生质体诱变育种的研究被引量：29
- 2005年
- 对紫杉醇产生菌NCEU_1的原生质体进行了紫外线和氯化锂复合诱变,筛选制霉菌素抗性突变株,共筛选出了4株正突变株。经发酵筛选试验,获得了一株遗传性状稳定、高产紫杉醇的原生质体诱变菌株———UL04-5,其紫杉醇产量从出发菌株的314.07μgL提高至418.24μgL。
- 赵凯周东坡平文祥刘军马玺金涛
- 关键词：紫杉醇紫杉醇产生菌原生质体诱变
- 基于PCR的基因差异表达分析技术被引量：6
- 2004年
- 基因差异表达分析是研究许多生物学过程的分子基础的一条直接、有效的途径。自DDRT-PCR技术建立以来,一系列基于PCR的基因差异表达分析技术,如SAGE、SSH、RDA和DNA微阵列等相继发展起来,为分析和克隆差异表达的基因提供了更为快速、灵敏的工具。本文对这几种方法进行了简要综述,比较了不同方法的优缺点,并展望了今后基因差异表达研究技术的发展方向。
- 齐小辉马玺李姗姗周东坡
- 关键词：PCR基因差异表达抑制消减杂交DNA微阵列
- NTG和UV复合诱变选育紫杉醇高产菌株的研究被引量：16
- 2008年
- 对紫杉醇产生菌HD1-3的孢子分别进行了紫外线照射(UV)、亚硝基胍(NTG)和UV+NTG复合诱变处理,筛选制霉菌素抗性突变株。试验所确定的Nodulisporium sylviforme紫杉醇产生菌HD1-3孢子诱变的适宜条件为:将孢子悬液经过3.0mg·mL-1 NTG、处理20min后,在电磁搅拌下,用紫外灯(30w,距离30cm)照射处理45s。共筛选出17株正突变株。经发酵筛选试验,获得了一株遗传性状稳定、高产紫杉醇的诱变菌株——UN25-3,其紫杉醇产量从出发菌株的(232.73±4.61)μg·L-1提高至(327.14±7.63)μg·L-1。
- 赵凯王颖王旋孙宇石平文祥周东坡
- 关键词：紫杉醇内生真菌诱变
