吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目(201149)
- 作品数：3 被引量：14H指数：3
- 相关作者：王春凤孟菲胡静涛杨桂连张旺更多>>
- 相关机构：吉林农业大学生物技术有限公司吉林大学更多>>
- 发文基金：吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目吉林省科技发展计划基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- GFP标记的重组新城疫病毒HN基因乳酸菌表达载体的构建及原核表达被引量：4
- 2012年
- 为构建具有示踪特性的新城疫病毒(NDV)HN基因乳酸菌穿梭表达载体,采用PCR方法扩增NDV HN基因与绿色荧光蛋白(GFP)基因,将两基因克隆至乳酸菌表达载体pW425et中,转化入表达宿主菌BL21(DE3)后利用IPTG诱导表达。用荧光显微镜检查重组菌的绿色荧光效应,采用SDS-PAGE和Western-blotting检测其在大肠杆菌中的表达情况。结果显示,NDV HN和GFP基因与表达载体pW425et正确重组。荧光显微镜下可见阳性重组菌落的绿色荧光,且该重组菌传代30代次以上,荧光效应依然稳定。SDS-PAGE显示表达出约63ku的条带,与已知表达的HN蛋白大小相符。Western-blotting进一步证实该蛋白能被NDV阳性血清所识别,具有反应原性。构建了GFP标记的重组NDV HN基因乳酸菌穿梭表达载体且能在大肠杆菌中表达。
- 胡静涛杨文涛肖冲佟盼盼孟菲王春凤丁壮
- 关键词：新城疫病毒
- 重组NDV HN基因乳酸菌穿梭表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 2013年
- 为构建新城疫病毒乳酸菌穿梭表达载体,采用RT-PCR方法从新城疫病毒中扩增了HN基因,将其克隆到pMD18-T Simple Vector中。经测序鉴定正确后,定向克隆至乳酸菌表达载体pW425et中,并转化入表达宿主菌BL21(DE3),利用IPTG诱导表达。采用SDS-PAGE和Western blotting检测重组菌在大肠杆菌中的表达情况。结果表明:NDVHN基因与表达载体pW425et正确重组,且该重组菌传50代次以上,重组质粒依然稳定。SDS-PAGE显示表达出约63 kD的条带,与已知表达的HN蛋白大小相符。Western blotting进一步证实该蛋白能被NDV阳性抗体所识别,具有反应原性。表明构建了重组NDVHN基因乳酸菌穿梭表达载体。
- 郭衍冰胡静涛于丹曹岩峰王一鸣张旺王春凤
- 关键词：新城疫病毒大肠杆菌
- 益生菌与肠上皮细胞间相互作用和免疫调节机制研究进展被引量：6
- 2013年
- 定殖于肠道的益生菌能够通过调节上皮细胞中的信号途径如NF-κB和MAPK等来上调或抑制下游途径,从而改变胃肠道的生理机能,改善胃肠道微环境,因而常被用于预防或治疗多种疾病,但其作用机制目前尚未完全阐明。本文将从益生菌调节上皮细胞炎症信号通路、刺激产生热激蛋白以及调节细胞凋亡等方面入手,对益生菌与肠道上皮细胞间相互作用机制作以简单论述。
- 孟菲王春凤杨桂连
- 关键词：益生菌肠上皮细胞信号通路
