国家自然科学基金(31201990)
- 作品数：8 被引量：15H指数：2
- 相关作者：林亚秋钟红梅张润锋郑玉才张明更多>>
- 相关机构：西南民族大学成都市妇女儿童中心医院湖北师范学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省应用基础研究计划项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- PGC-1α对C2C12成肌细胞增殖的影响被引量：1
- 2014年
- PGC-1α(Peroxisome Proliferators Activated Receptor gamma coactivator 1 alpha)是一种核受体转录辅助激活因子,广泛参与机体的生物氧化和能量代谢活动.本实验以小鼠C2C12成肌细胞为材料,通过转染pc DNA3.1-flag-PGC-1α真核表达载体,并且与转染空载体的实验对照组比较,利用荧光定量PCR检测转染效果,利用MTT比色法检测PGC-1α对成肌细胞增殖的影响;结果显示,PGC-1α在C2C12成肌细胞中被成功超表达,在转染后的2-5 d,转染真核表达载体组与转染空载体组相比,显著抑制细胞增殖(P<0.05),但在第6 d差异不显著.
- 林亚秋谈永萍赵燕英贺庆华罗敏邱翔钟红梅
- 关键词：PGC-1Α增殖
- 齐口裂腹鱼PGC-1α基因编码区的克隆及其在肌肉组织中的表达被引量：6
- 2013年
- 目的：获得齐口裂腹鱼过氧化物酶体增殖物激活受体Y辅助活化因子1a（PGC-1a）cDNA序列，探讨其在齐口裂腹鱼肌肉组织中的表达规律。方法：根据斑马鱼基因PGC-1a序列设计引物，提取齐口裂腹鱼肌肉组织总RNA，经RT-PCR扩增PGC-1a仪基因序列；利用半定量RT-PCR分析齐口裂腹鱼PGC-1a基因在红肌和白肌中的mRNA表达特性。结果：获得齐口裂腹鱼PGC-1a基因序列2633bp，GenBank登陆号为JNl95738，其中ORF为2631bp，编码876个氨基酸残基，与同鲤科的斑马鱼、草鱼和金鱼的同源性较高，为88％～93％，但与哺乳动物和禽类如人、小鼠、大鼠、猪、牛和鸡的同源性较低，为49％～50％。在基础状态下，PGC-1a在齐口裂腹鱼红肌中的表达显著高于白肌，禁食可显著诱导PGC-1a在红肌和白肌中的表达水平。结论-首次克隆得到齐口裂腹鱼PGC-1a基因序列，其在红肌中的表达显著高于白肌中，禁食可显著诱导其在红肌和白肌中的表达，为研究PGC-1a在齐口裂腹鱼肌肉中的作用提供了理论依据。
- 李瑞文林亚秋郑玉才张润锋宫佳琦晁珊珊
- 关键词：齐口裂腹鱼白肌
- 小鼠FAM134B基因慢病毒表达载体的构建
- 2017年
- 为了应用基因重组技术,构建小鼠FAM134B基因慢病毒超表达和短发夹(shRNA)载体,试验根据Gen Bank上登录的小鼠FAM134B基因序列设计引物,扩增该基因开放阅读框(ORF)序列,并克隆到酶切的FUGW载体,同时设计3对FAM134B-siRNA序列克隆到酶切的PsicoR载体,将获得的重组质粒与包装质粒(PSPA和PMD2G)共转染293T细胞包装成病毒颗粒,感染体外培养的3T3-L1前体脂肪细胞,实时荧光定量PCR(q PCR)检测FAM134B基因的超表达及干扰效果。结果表明:重组质粒FUGW-PGC-1α-GFP及PsicoR-FAM134B-GFP测序验证成功,包装后感染3T3-L1前体脂肪细胞发现该基因被成功超表达和干扰。说明成功构建小鼠FAM134B慢病毒超表达和干扰载体,可为该基因在脂代谢中的作用提供重要的工具。
- 罗璠李虎林亚秋钟红梅
- 关键词：超表达SHRNA慢病毒
- 齐口裂腹鱼PGC-1α超表达及干扰慢病毒载体构建
- 2018年
- 利用基因重组方法构建齐口裂腹鱼PGC-1α超表达和干扰慢病毒载体,为最终阐明PGC-1α调控齐口裂腹鱼肌纤维类型转化的分子机理提供重要基础。根据GenBank上登录的齐口裂腹鱼PGC-1α基因序列(GenBank登录号为JN195738)设计引物,经过PCR扩增、双酶切、连接来构建PGC-1α超表达和干扰的慢病毒核心质粒,然后将其与穿梭质粒及包装质粒共同转染293T细胞包装成病毒颗粒,感染体外培养的C2C12成肌细胞,利用实时荧光定量PCR(qPCR)检测PGC-1α在被超表达和干扰表达慢病毒载体感染C2C12成肌细胞72h后的表达水平,确定其超表达及干扰效果。重组质粒FUGWPGC-1α-RFP及PsicoR-PGC-1α-GFP测序验证成功,包装后感染C2C12成肌细胞经qPCR检测后结果显示,超表达组PGC-1α基因表达水平极显著高于对照组(P<0.01),而转染shRNA1组及shRNA2组的PGC-1α基因表达水平极显著低于对照组(P<0.01),证明该基因被成功超表达和干扰。成功构建齐口裂腹鱼PGC-1α超表达及干扰慢病毒载体,为进一步研究该基因在成肌细胞分化中的作用提供重要的基础数据。
- 池永东陈智慧邱翔钟红梅陈官璐林亚秋
- 关键词：齐口裂腹鱼成肌细胞PGC-1Α慢病毒
- MRFs家族基因在鲤鱼红肌和白肌中的表达差异被引量：1
- 2015年
- 为探索生肌调节因子(myogenic regulator factors,MRFs)家族基因在鲤鱼肌纤维形成中的基本作用,利用荧光定量PCR技术分别检测MRFs家族各成员在鲤鱼红肌、白肌中的表达差异,并与红肌纤维的标志基因My HCⅠ及白肌纤维的标志基因My HCⅡ的表达水平进行关联分析。结果表明,Myo D基因在鲤红肌中的表达极显著高于在白肌中的表达,并与My HCⅠ基因的表达呈显著正相关,Myf6在鲤鱼白肌中的表达极显著高于其在红肌中的表达水平,并与My HCⅡ基因的表达呈显著正相关,Myf5、Myo G在鲤鱼红肌、白肌中的表达水平差异不显著。
- 张明吕明李瑞文徐梓钧邬杨楠左璐璐林亚秋
- 关键词：腹肌
- 肉质性状相关基因在四种鲤科鱼类肌肉组织中的表达差异研究被引量：1
- 2016年
- 为了阐明肉质性状相关基因在四种鲤科鱼类中的表达差异,以齐口裂腹鱼(雅鱼,Schizothorax prenanti)、草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、鲤鱼(Cyprinus carpio)和鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix)四种鲤科鱼类为研究对象,利用索式抽提法和物性测定仪测定四种鱼类背部与腹部肌内脂肪(IMF)含量和肌肉剪切力,并利用荧光定量PCR(q PCR)检测心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、过氧化物酶体激活增殖受体γ(PPARγ)、过氧化物酶增殖剂受体γ亚型的辅激活因子1α(PGC-1α)、钙蛋白酶抑制蛋白(CAST)等肉质性状相关基因在四种鱼肌肉组织中的表达.结果显示,齐口裂腹鱼背部与腹部肌肉的IMF含量极显著高于其他鱼类(P<0.01),而肌肉剪切力均显著低于其他三种鱼类(P<0.05),PGC-1α在齐口裂腹鱼背部及腹部肌肉中表达水平最高,PPARγ和CAST在齐口裂腹鱼背部及腹部肌肉中表达水平最低.研究结果为阐明齐口裂腹鱼优良肉质形成的分子机制提供重要的参考数据.
- 赵燕英李瑞文李虎李倩林亚秋陈娟
- 关键词：齐口裂腹鱼鲢鱼肌内脂肪含量
- MyHC基因在C2C12成肌细胞分化过程中的时序表达被引量：2
- 2014年
- 以体外培养的C2C12成肌细胞为研究对象,然后利用荧光定量PCR检测肌球蛋白重链(myosin heavy chains,MyHC)的3种亚型MyHC1、MyHC2x和MyHC2b在成肌诱导分化中(0-8 d)中的时序表达规律.结果表明,MyHC1基因在诱导分化的0-4 d表达呈上升趋势,4-8 d又呈下降趋势,在第4 d和第6 d的表达水平显著高于其他天数(p<0.05).MyHC2x基因在诱导分化的0-6 d表达呈上升趋势,但在第8 d又开始下降.MyHC2b在诱导分化的0-8 d中表达一直呈上升趋势,第6 d和第8 d表达水平显著高于其他天数(p<0.05).
- 林亚秋张明邬杨楠李瑞文郑玉才
- 人工养殖鲟鱼生长与肌肉品质的研究进展被引量：4
- 2014年
- 鲟鱼肉和卵极具营养价值,鲟鱼养殖规模稳定扩大,中国已经成为世界上最大的鲟鱼养殖国家。尽管国内外在鲟鱼保护生物学和应用技术方面取得了一系列科研成果,但对养殖鲟鱼的生长和肌肉品质的发育规律所知甚少。本文综述了国内外养殖鲟鱼异速生长模式和肌肉品质分析的研究现状,发现现有鲟鱼生长于肌肉品质的研究主要集中于幼鱼或某一个生长期,缺少系统性和完整性。因此,建议针对主要养殖鲟鱼品种,从幼鱼到成鱼系统开展养殖鲟鱼生长与肌肉品质变化规律的研究,揭示鲟鱼肌肉品质的生长发育规律。
- 张润锋余翔万年春任华孙宏懋林亚秋蓝泽桥
- 关键词：鲟鱼肌肉品质
