国家自然科学基金(30972168)
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
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- 清道夫受体在树突状细胞提呈口蹄疫病毒VP1-VP4抗原中的作用
- (目的)为研究清道夫受体在树突状细胞提呈口蹄疫病毒VP1-VP4融合蛋白中的作用,(方法)构建了pET32a-VP1-VP4原核表达载体,获得重组蛋白VP1-VP4。制备骨髓源树突状细胞(BMDC)和淋巴结T细胞,首先通...
- 高云欢李娜安鹏丽董昌海唐然肖李丽敏王蓓蓓孟明王家鑫
- 关键词：口蹄疫病毒树突状细胞抗原提呈T细胞
- 文献传递
- 甘露糖受体在树突状细胞启动抗口蹄疫病毒VP1-VP4 T细胞应答中的作用
- 本研究的目的是探明树突状细胞(DC)表面的甘露糖受体是否有助于捕获口蹄疫病毒(FMDV)VP1-VP4融合蛋白,并活化T细胞产生应答。通过pET32a-VP1-VP4原核表达系统,表达并纯化FMDVVP1-VP4融合蛋白...
- 高云欢李娜安鹏丽董昌海唐然肖李丽敏王蓓蓓孟明王家鑫
- 关键词：树突状细胞甘露糖受体抗原提呈
- 文献传递
- 负载灭活口蹄疫病毒树突状细胞启动的CD4^+T细胞应答被引量：2
- 2011年
- 为研究负载灭活口蹄疫病毒(iFMDV)树突状细胞对CD4+T细胞的活化效应,用重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和白介素-4(rmIL-4)将小鼠外周血单核细胞诱导分化成树突状细胞(MoDCs),以信号阻断法制备淋巴结CD4+T细胞,利用负载iFMDV的MoDCs与CD4+T细胞共培养,以iFMDV+MoDCs作为对照,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。用溶酶体抑制剂处理MoDCs,2h后再负载iFMDV,并与CD4+T细胞共培养,对照组则用iFMDV+MoDCs+CD4+T细胞,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。结果显示,在共培养后第9和48小时,CD4+T细胞组与对照组比较差异均极显著(P<0.01)。共培养后第24和36小时,CD4+T细胞组与对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。溶酶体抑制剂处理后,共培养第9、24、36和48小时组与对照组比较,均有显著性差异(P<0.05)。这表明MoDCs可通过溶酶体-MHC-Ⅱ途径向CD4+T细胞提呈iFMDV抗原,并且活化的CD4+T细胞可分化成Th1细胞。
- 张丽石玮张雷李杰李娜安鹏丽张悦王蓓孟明王家鑫
- 关键词：口蹄疫病毒树突状细胞CD4+T细胞Γ干扰素
- 负载灭活口蹄疫病毒树突状细胞启动的CD8^+T细胞应答
- 2012年
- 探讨在体外条件下负载灭活口蹄疫病毒(iFMDV)树突状细胞对CD8+T细胞的活化效应。用重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和白介素-4(rmIL-4)将小鼠外周血单核细胞诱导分化成树突状细胞(MoDCs),用信号阻断法从淋巴结T细胞制备CD8+T细胞,利用负载iFMDV的MoDCs与CD8+T细胞共培养,以iFMDV+MoDCs作为对照,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。用蛋白酶体抑制剂处理MoDCs,2h后再负载iFMDV,并与CD8+T细胞共培养,对照组则用iFMDV+MoDCs+CD8+T细胞,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。结果表明,同对照组相比,在共培养后9,12,24,36,48h,CD8+T细胞组均产生高水平的IFN-γ。而且,经抑制剂预处理的MoDCs与CD8+T细胞共培养后,其分泌的IFN-γ量不仅没有降低,反而显著升高。因此得出,MoDCs可与蛋白酶体等加工iFMDV抗原,并通过交叉提呈途径激活CD8+T细胞。
- 张雷石玮张丽李杰李娜张悦安鹏丽王蓓孟明王家鑫
- 关键词：口蹄疫病毒树突状细胞CD8+T细胞Γ-干扰素
- 进境检疫中动物粪便的风险及防控
- 本文首先介绍了黄岛口岸进境检疫中检出的动物粪便情况,2008年至今共在进境棉花、棉短绒及木质包装等货物中检出动物粪便77批,主要来自印度、美国、澳大利亚、土库曼斯坦等国家。其中棉花、棉短绒等棉麻制品易受动物粪便侵染,约占...
- 杨卫海王荣孙铮张吉夏明星徐月静
- 关键词：人畜共患病动物粪便
- 文献传递
- 负载重组口蹄疫病毒VP4蛋白的树突状细胞启动的T细胞应答
- 2012年
- 为研究负载口蹄疫病毒VP4蛋白的树突状细胞对淋巴结T细胞的活化效应,构建了pET32a-VP4原核表达载体,经过诱导表达和纯化获得重组VP4蛋白。同时制备骨髓源树突状细胞(BMDCs)和淋巴结T细胞,以VP4蛋白负载BMDCs后与淋巴结T细胞共培养。收集不同时间点的共培养上清液,用ELISA法检测其IFN-γ的含量。结果显示,负载VP4蛋白的BMDCs与T细胞共培养后3、9和48h,试验组上清液中IFN-γ含量与对照组相比,均有极显著差异。这表明负载口蹄疫病毒VP4蛋白的BMDCs可有效激活淋巴结T细胞,使其分泌大量IFN-γ。
- 安鹏丽李娜李丽敏张丽张雷高云欢王家鑫
- 关键词：口蹄疫病毒原核表达树突状细胞T细胞
- 负载口蹄疫病毒VP1蛋白质的树突状细胞对T细胞产生IFNγ-的影响
- 2011年
- 目的:研究负载口蹄疫病毒VP1蛋白质的树突状细胞对淋巴结T细胞产生IFNγ-的影响。方法:构建pET32a-VP1原核表达载体,经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白VP1。制备骨髓源树突状细胞(BMDC)和淋巴结T细胞,将纯化的VP1蛋白质负载BMDC后与淋巴结T细胞共培养,收集不同时间点的共培养上清液,用ELISA检测其IFNγ-的含量。结果:本实验成功构建了pET32a-VP1原核表达载体,并获得了VP1蛋白质。在负载VP1蛋白质的BMDC与T细胞共培养后,实验组各时间点上清液的IFNγ-含量均高于对照组(3小时除外),特别是在共培养后9、24和48小时,差异显著。结论:负载FMDV VP1蛋白质的BMDC可有效激活淋巴结T细胞,从而启动Th1细胞免疫应答,分泌大量IFNγ-。
- 李娜张雷安鹏丽高云欢张丽王家鑫
- 关键词：口蹄疫病毒原核表达树突状细胞T细胞
- 清道夫受体在树突状细胞提呈口蹄疫病毒VP1-VP4抗原中的作用
- 2014年
- 为研究清道夫受体在树突状细胞提呈口蹄疫病毒VP-VP4融合蛋白中的作用,构建了pET一32a-VP1-VP4原核表达系统,以此获得VP1-VP4融合蛋白。制备骨髓源树突状细胞(BMDCs)和淋巴结T细胞,首先用清道夫受体抑制剂poly(I)处理.BMDCs,然后再将VPl-VP4.融合蛋白负载经poly(I)处理后的BMDCs,并与淋巴结T细胞共培养,收集不同时间点的共培养上清液,用ELISA检测其中IFN-γ含量。结果显示,经poly(I)处理的试验组在每个时间点产生的IFN-γ含量均明显高于对照组,且差异极显著(P<0.01)。表明清道夫受体可识别口蹄疫病毒VPl-VP4融合蛋白,并在BMDCs提呈VPl-VP4抗原的过程中发挥负调节作用。
- 高云欢李娜董昌海唐然肖李丽敏王家鑫
- 关键词：树突状细胞抗原提呈
- 负载灭活口蹄疫病毒树突状细胞活化CD8^+ T细胞的非蛋白酶体依赖途径被引量：2
- 2011年
- 为研究树突状细胞加工和呈递灭活口蹄疫病毒(FMDV)抗原并活化CD8+T细胞的途径,用灭活FMDV负载经抑制剂预处理的小鼠单核细胞源树突状细胞(MoDCs),与CD8+T细胞共培养,对照为负载FMDV的正常MoDCs与CD8+T细胞。收集上清液,检测γ干扰素(IFN-γ)的含量。结果显示,试验组CD8+T细胞在共培养的第9小时分泌大量IFN-γ,然后逐渐下降。至第24小时,CD8+T细胞分泌IFN-γ的量降至最低,随后逐渐升高,在第48小时,CD8+T细胞分泌IFN-γ的量升至最高。对照组CD8+T细胞在共培养的第9小时的IFN-γ分泌量显著低于试验组(P<0.01);随后逐渐升高,并在共培养的第24小时达到高峰,而后逐步下降,至第48小时,CD8+T细胞分泌IFN-γ的量降到最低,显著低于试验组(P<0.01)。结果表明,MoDCs不仅以蛋白酶体依赖途径加工灭活FMDV抗原,而且还可通过蛋白酶体非依赖途径加工灭活FMDV抗原,并通过交叉呈递途径活化CD8+T细胞。
- 王若张丽张雷李娜张悦孟明王家鑫
- 关键词：口蹄疫病毒树突状细胞抗原呈递蛋白酶体
- 负载口蹄疫病毒VP1-VP4融合蛋白质的树突状细胞对T细胞的活化效应被引量：4
- 2012年
- 为研究负载口蹄疫病毒VP1-VP4融合蛋白质的树突状细胞对淋巴结T细胞的活化效应,通过构建pET32a-VP1-VP4原核表达系统制备VP1-VP4融合蛋白。将纯化VP1-VP4融合蛋白负载骨髓源树突状细胞(BMDC)后与淋巴结T细胞共培养,用ELISA检测不同时间点的共培养上清液中IFN-γ的含量。结果表明,负载FMDVVP1-VP4融合蛋白后的BMDC可通过溶酶体-MHC-Ⅱ类分子途径有效地激活淋巴结T细胞,从而启动Th1细胞免疫应答,分泌大量IFN-γ。
- 李娜李丽敏安鹏丽高云欢董昌海王家鑫
- 关键词：口蹄疫病毒原核表达树突状细胞T细胞
