江苏省卫生厅医学科研项目(H200920)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：范志海左保齐沈忆新张焕相吴鹏更多>>
- 相关机构：苏州大学附属第二医院苏州大学更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅医学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同直径丝素蛋白纳米纤维对嗅鞘细胞生长影响的研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨不同直径丝素蛋白纳米纤维(SFS)对嗅鞘细胞(OECs)生长及迁移的影响,为脊髓损伤(SCI)修复材料的选择提供实验基础和理论依据。方法运用静电纺丝技术制备SFS,并通过扫描电镜观察。取SD大鼠嗅球新鲜分离的OECs,采用改良差速贴壁法纯化培养。将纯化后的OECs分别接种至以左旋多聚赖氨酸(对照组)和SFS(400nm,1200nm)(实验组)包被盖玻片的培养皿中进行复合培养。复合培养不同时间点行倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞形态、生长、分布及与材料黏附情况。NGFRp75及GFAP免疫荧光染色测定细胞表型,MTT法测定支架材料上OECs的增殖情况。结果倒置相差显微镜示SFS上培养的OECs与对照组相比,细胞沿丝素纤维迁移,细胞突起方向走向较一致,形态特征无明显差异。扫描电镜观察显示SFS平均直径约为(395±3)nm、(1210±7)nm,纤维呈三维立体网状结构,分布均匀,OECs与材料结合紧密,且细胞突起方向与纤维走向较一致,形态与对照组无明显差异。培养4d时,免疫荧光染色显示实验组NGFRp75/GFAP阳性,OECs在SFS材料上仍保留其特有的表现型。MTT检测显示:培养第4天时,对照组OECs的吸光度值较1200nm直径的材料OECs的吸光度值有统计学差异(P<0.05),培养第7天时,对照组OECs的吸光度值较实验组吸光度值有统计学差异(P<0.05),而且OECs在400nmSFS材料上的吸光度值比在1200nmSFS材料上的吸光度值高,有统计学差异(P<0.05)。400nmSFS相比1200nmSFS更能促进OECs的增殖。死活细胞染色试剂检测显示:在培养第4、7天时,实验组细胞形态较对照组正常,成活率较高,两组死亡细胞数比较无明显差异。流式细胞术检测结果显示:在培养第4天时,实验组OECs较对照组OECs的凋亡率无统计学差异(P>0.05)。结论不同直径SFS对OECs的生长与迁移均具有支持作用,SFS有望成为一种新型的组织工程支架材料结合OECs移植修复脊髓损伤。
- 范志海吴鹏左保齐张焕相沈忆新
- 关键词：丝素蛋白嗅鞘细胞纳米纤维
