国家自然科学基金(39893290-4-3)
- 作品数：9 被引量：51H指数：5
- 相关作者：金宁一殷震金扩世王兴龙郭志儒更多>>
- 相关机构：解放军军需大学吉林大学第二医院军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科委资助项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鉴别新城疫病毒弱毒株的抗多肽抗体制备被引量：1
- 2000年
- 针对鸡新城疫病毒 (NDV )弱毒株F蛋白前体 (F0 )F2片段的特异结构 ,人工合成特异性多肽 ,将多肽与牛血清白蛋白 (BSA)化学偶联制备成全抗原后免疫小鼠 ,制备抗多肽血清。经ELISA检测 ,该抗体与NDV弱毒株呈阳性反应 ,而与鸡痘病毒 (FPV)、鸡传染性腔上囊病病毒 (IBDV)、NDV强毒F4 8E8株和四平株呈阴性反应。试验结果证明该抗体可以用于鉴别NDV弱毒株。
- 古长庆金宁一王兴龙丁壮李太元殷震王艳军
- 关键词：新城疫病毒
- 新城疫病毒在不同的细胞上增殖特性的研究被引量：6
- 2000年
- 研究新城疫病毒 (NewscastlediseaseVirus,NDV)强、弱毒株在不同的传代细胞的生物学特征。F4 8E8强毒株在BHK、Vero和CEF中都能增殖并产生细胞病变 ,而V4生弱毒株不能在BHK和Vero中增殖。当MEM含 1 0ug/mL胰蛋白酶时 ,NDV弱毒株在BHK和Vero中能较好地复制 ,将V4株在Vero中传代培养后 ,Vero中传代的V4毒株的HA较低 ,但毒力增强 ,BHK中传代的V4毒株的毒力和HA都提高 ,能达到其鸡胚毒上的毒力和HA效价。如果进一步研究能够证实在BHK上适应增殖的V4毒株的免疫原性比较好 ,那么就可能用BHK细胞系替代鸡胚增殖V4株作为疫苗的病毒抗原。使用BHK等传代细胞制备的NDV疫苗具有避免传统疫苗散播其他疾病的危险、降低成本和大规模生产等优点。使用传代细胞代替鸡胚来生产NDV疫苗 。
- 古长庆金宁一金扩世李萍殷震
- 关键词：新城疫病毒疫苗细胞病变传代细胞
- 新城疫病毒弱毒疫苗的免疫研究被引量：16
- 2000年
- 新城疫病毒长春株 (NDV CC株 )经生物学及分子生物学特性研究证明为新城疫病毒弱毒株 ,以NDV CC毒株制成弱毒疫苗 ,采用饮水、滴鼻和肌肉注射免疫等方式 ,分别免疫 7日龄雏鸡 ,免疫鸡未出现不良反应。免疫后 7d HI效价为 2 5以上 ,6 0 d后均能维持较高的 HI值 ,免疫后 1 4 d用 NDV强毒攻击 ,其保护率可达到 1 0 0 % (1 0 /1 0 )
- 金扩世金宁一王兴龙丁壮郭志儒王宏伟殷震
- 关键词：新城疫弱毒疫苗免疫试验免疫保护率
- 表达新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶基因重组禽痘病毒的构建及其抑瘤作用被引量：5
- 2006年
- 来源于新城疫病毒的血凝素-神经氨酸酶(hemagglutinin-neuramidinase,HN)蛋白不仅能够介导受体识别,还具有水解这些受体中N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminicacid,NAcneu,唾液酸)成分的神经氨酸酶(neuraminidase,NA)活性.研究表明,HN蛋白可针对包括人类在内的哺乳动物产生抗肿瘤作用和免疫刺激作用.为探索HN基因在肿瘤基因治疗中的应用,构建了表达HN的重组禽痘病毒(vFV-HN),并通过体内外实验比较了其与野生型禽痘病毒(FPV)的抗肿瘤作用.实验结果表明,虽然B16肿瘤细胞对FPV感染所致细胞毒作用具有一定耐受性,但vFV-HN具有显著的抑瘤作用.并且,与FPV相比,vFV-HN免疫可显著延长荷瘤动物模型的生存期.另外,vFV-HN免疫可刺激产生B16肿瘤细胞特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应和促进CD4+和CD8+T淋巴细胞的增殖.研究还发现,vFV-HN免疫可刺激小鼠分泌IL-2和IFN-γ等Th1类细胞因子,说明vFV-HN的抑瘤作用与Th1类免疫反应相关.实验结果提示,vFV-HN免疫具有潜在的肿瘤基因治疗研究价值.
- 李霄金宁一连海管国芳孙丽丽李雪梅郑洪玲
- 关键词：新城疫病毒HN基因抗肿瘤
- Construction and anti-tumor effects of recombinant fowlpox virus expressing Newcastle disease virus hemagglutinin-neuramidinase gene被引量：9
- 2006年
- Hemagglutinin-neuramidinase (HN ) ，纽卡斯尔疾病导出病毒的蛋白质，不是仅仅调停受体识别而且拥有 neuraminidase (NA ) 活动，劈开那些受体的一个部件的能力， N-acetylneuraminic 酸(NAcneu， sialic ) 。包括人，在哺乳动物的种类的这蛋白质有有趣的反肿瘤以及有免疫力的刺激性质，这被知道。在癌症基因治疗探索 HN 基因的使用，我们构造了表示 HN 蛋白质(vFV-HN ) 的一个 recombinant 家禽痘病毒并且在 vivo 并且在 vitro 把 recombinant 病毒的 theanti 肿瘤活动与野类型的家禽痘病毒(FPV ) 的作比较。这里，我们发现尽管 B16 房间对野类型的家禽痘病毒的基础细胞毒素的效果有点抵抗，有 vFV-HN 的感染引起了显著细胞毒素的效果并且，与 vFV-HN 使免疫的忍受肿瘤的老鼠的幸存显著地与独自与 FPV 使免疫的老鼠的幸存相比被增加。而且，有 vFV-HNelicited 的老鼠的免疫 B16 肿瘤特定的细胞毒素的 T 淋巴细胞(CTL ) 回答和在 vivo 的 bothCD4+ 和 CD8+ T 房间人口的同种细胞的扩大。另外，从老鼠的淋巴节点的 T 房间种牛痘， Th1 cytokine IL-2 和 IFN-v 高级的 vFV-HN 藏匿了，显示肿瘤房间的回归与 Th1 类型主导的有免疫力的回答有关。这些结果证明有 vFV-HN 的种痘可以是为癌症基因治疗的潜在的策略。
- LI XiaoJIN NingyiLIAN HaiGUAN GoufangSUN LiliLI Xue meiZHENG Hongling
- 关键词：NDVHN基因
- 新城疫病毒长春株F基因和HN基因的序列分析被引量：1
- 2000年
- 从长春地区分离到一株新城疫病毒 ,经过对其进行生物学研究表明该毒株具有新城疫病毒弱毒株的一些特性。本试验通过 RT-PCR方法测定出该毒株 F基因的核苷酸序列为 1758bp,编码有 53 3个氨基酸残基 ;HN基因核苷酸序列为 173 1bp,编码 577个氨基酸残基。与国外发表的部分新城疫病毒强毒株和弱毒株之间相同序列进行比较 ,F基因核苷酸序列的同源性在 88.2 %～ 96.7%之间 ,氨基酸序列的同源性在 90 .1%～ 98.1%之间 ;HN基因核苷酸序列的同源性在 88.4 %～ 98.1%之间 ,氨基酸序列的同源性在 91.2 %～ 98.1%之间。 F蛋白裂解位点区 ( 112～ 117)氨基酸组成与弱毒株一致 。
- 金扩世金宁一王兴龙丁壮郭志儒王宏伟殷震
- 关键词：新城疫病毒F基因HN基因同源性比较
- 凋亡素基因对人喉癌细胞Hep-2的抑制效应研究被引量：2
- 2007年
- 鸡贫血病病毒（chicken anemia virus,CAV）主要以诱导细胞凋亡方式破坏宿主细胞，VP3基因被认为是CAV的主要功能基因，其具有细胞核定位集积域和DNA结域，
- 孙丽丽金宁一李霄管国芳连海李雪梅郑洪玲李萍
- 关键词：HEP-2人喉癌细胞凋亡素鸡贫血病病毒
- 表达凋亡素基因的重组禽痘病毒对人喉癌细胞Hep-2的抑制效应研究被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨含鸡贫血病病毒(CAV)凋亡素(Apoptin)基因的重组禽痘病毒vFVApoptin诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡的作用及其作用方式。方法:用vFVApoptin感染体外培养的人喉癌细胞Hep-2,运用MTT染色法检测重组质粒对肿瘤细胞的抑制作用;并运用流式细胞仪检测肿瘤细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)和细胞内活性氧(ROS)水平变化情况;通过免疫印迹检测细胞色素c(Cytoc)释放;应用底物显色法检测Caspase-3/9活性。结果:vFVApoptin感染可明显抑制Hep-2肿瘤细胞,并具有下调肿瘤细胞ΔΨm,上调其ROS水平,促进Cytoc释放和激活Caspase-3/9的功能。结论:vFVApoptin通过上调Hep-2肿瘤细胞内线粒体ROS产生,造成Cytoc的释放,激活Caspase-9,进而激活Caspase-3等下游凋亡因子,最终通过线粒体途径诱导细胞凋亡抑制Hep-2肿瘤细胞。
- 管国芳金宁一李霄孙丽丽金春顺娄玮史平郝延茹
- 关键词：禽痘病毒凋亡素基因细胞凋亡
- 应用抗多肽抗体鉴别新城疫病毒强弱毒株被引量：10
- 2000年
- :在克隆我国流行的新城疫病毒 ( NDV)强毒株 F4 8E8株、四平株及弱毒株长春株、V4株的 HN和 F基因并进行测序的基础上 ,针对我国流行的 NDV强毒株 F蛋白前体 ( F0 )的 F2片段的特异结构 ,人工合成特异性多肽 ,将其与小牛血清白蛋白 ( BSA)化学偶联制备成全抗原 ,免疫小鼠制备出抗多肽血清。经 ELISA检测 ,该抗体与 NDV强毒株呈强阳性反应 ,而与鸡痘病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、NDV弱毒株长春株和 V4株呈阴性反应。试验结果表明 ,该抗体可以用于
- 古长庆金宁一金扩世郭志儒龚伟王兴龙李萍刘子殷震
- 关键词：新城疫病毒毒力鉴定
