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海藻糖酶法合成途径及其酶基因的重组表达研究被引量：14: 2007年; 在生物抗逆研究中,海藻糖合酶基因是继甘露醇、脯氨酸、甜菜碱合成酶基因之后又一个与抗逆相关的基因。海藻糖具有独特的生物学功能,能提高生物体对干旱、高温、冷冻和渗透压的抗性,发现以来就受到人们的普遍关注。随着对海藻糖化学性质、生理功能、作用机理及代谢途径等方面研究的深入,其在生物制品、食品、医药、作物育种及精细化工等领域广阔的应用前景日益显现。就海藻糖在生物体中的合成途径,以及海藻糖合成酶的基因工程研究进展进行了综述。; 李镭丁宏标余晓斌乔宇; 关键词：海藻糖酶法合成基因工程异源表达

富硒酵母的营养价值研究被引量：6: 2008年; 富硒酵母作为有机硒饲料添加剂,具有硒利用率高、毒性低、对环境污染小等优点,其添加效果优于亚硒酸钠。就目前国内外对富硒酵母在动物营养中的研究进展及在动物饲料中的应用现状进行了综述。; 沈银书丁宏标; 关键词：富硒酵母有机硒动物营养

谷氨酸棒杆菌麦芽寡糖基海藻糖合成酶基因的克隆与表达被引量：2: 2009年; 采用PCR方法从谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)基因组中分离得到2.4 kb的麦芽寡糖基海藻糖合成酶基因(TreY),将其插入原核表达载体pET-30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS获得重组基因工程菌。经IPTG诱导表达得到约90 kDa的目的蛋白,可溶性蛋白占细胞总蛋白的45.3%。重组酶作用于麦芽糊精,可使其DE值降低,得到麦芽寡糖基海藻糖的混合物。; 张文德乔宇丁宏标; 关键词：麦芽糊精谷氨酸棒杆菌

海藻酸裂解酶基因在毕赤酵母中的表达及重组酶性质的初步研究被引量：2: 2007年; 褐球固氮菌（Azotobacter chroococcum）是一种海藻酸降解菌.本实验采用PCR的方法,以褐球固氮菌基因组DNA为模板,克隆出约1.05 kb的海藻酸裂解酶基因algL的成熟蛋白编码序列,并将其插入巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）表达载体pPIC9K中,获得重组质粒pPIC9K-algL.重组质粒线性化后用聚乙二醇（PEG）法导入毕赤酵母菌株GS115中,获得高效分泌表达海藻酸裂解酶的毕赤酵母工程菌株.用甲醇诱导培养基进行摇瓶发酵,表达得到43 kDa的目的蛋白,酶活力可达1 400 U/cm^3左右.经测定,该重组酶的最适反应pH为8.5,最适反应温度为40℃,并且在20-55℃,pH2.0-11.0具有较好的稳定性.另外,10 mmol/cm^3的Cu^2＋,Fe^2＋,Co^2＋,Mn^2＋和Ca^2＋对酶有不同程度的抑制作用.; 岳明丁宏标乔宇; 关键词：毕赤酵母

海藻酸裂解酶酶学与基因工程研究进展及应用被引量：1: 2006年; 海藻中富含海藻酸盐,海藻酸裂解酶降解后产生的寡糖物质具有很强的生物活性及益生作用,酶法降解海藻酸盐的生物降解取代传统的化学降解已日益受到人们的关注,就海藻酸盐降解酶的来源、作用机制、应用效果和影响因素进行了全面综述,阐明了海藻酸盐降解酶的研究具有显著的理论意义和应用价值。; 岳明丁宏标乔宇; 关键词：海藻寡糖

海藻糖对AA肉鸡生长及屠宰性能的影响被引量：2: 2009年; 采用灌喂试验研究AA肉鸡对海藻糖的吸收机理,以及日粮添加海藻糖对AA肉鸡生长及屠宰性能的影响,结果表明,海藻糖是以完整二糖形式直接吸收进入血液,而其他二糖一般分解为葡萄糖后吸收,此为海藻糖消化吸收原理方面的新发现。日粮添加海藻糖能显著促进肉鸡的生长,降低死淘率,显著提高半净膛率和全净膛率,提高屠宰性能。以0.1%添加量效果最优,可显著提高肉鸡体重9.42%(P<0.05),料肉比显著低于对照组(P<0.05)。; 黄俊丁宏标赵国琦; 关键词：海藻糖 AA肉鸡屠宰性能

耻垢分枝杆菌海藻糖合成酶基因TreS的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2: 2007年; 耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)在环境胁迫下具有合成海藻糖的能力。实验采用PCR的方法,克隆了来源于耻垢分枝杆菌的一段核苷酸序列,与已报道的海藻糖合成酶有60%以上同源性,推测该基因的编码产物具有海藻糖合成酶的活性,为进行其功能验证而在大肠杆菌中进行了表达。目的蛋白以可溶性蛋白为主,约占细胞可溶性总蛋白48%,为目前相关报道的最高值。经活性测定,表达的重组酶无需复性,能够催化麦芽糖生成海藻糖,在20℃反应20 h对麦芽糖的转化率可达61%,具有较高的应用价值。; 李镭丁宏标余晓斌乔宇; 关键词：耻垢分枝杆菌海藻糖合成酶克隆

铜绿假单胞菌algL基因在毕赤酵母中的表达及其性质研究被引量：2: 2008年; 【目的】通过构建毕赤酵母工程菌株,以期获得重组海藻酸裂解酶,并对其性质加以研究。【方法】采用PCR的方法,以铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)基因组DNA为模板,克隆出约1.0kb的海藻酸裂解酶基因algL的成熟蛋白编码序列,并将其插入巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPIC9K中,获得重组质粒pPIC9K-algL。重组质粒线性化后用聚乙二醇(PEG)法导入毕赤酵母菌株GS115中表达。【结果】用甲醇诱导培养基进行摇瓶发酵,表达得到40kD的目的蛋白,酶活力达540U·ml-1左右。经测定,该重组酶的最适反应pH为8.5,最适反应温度为40℃,并且在20～45℃,pH3.0～12.0具有较好的稳定性。50mmol·L-1的Co2+和Ca2+对酶活力均有显著的促进作用,Zn2+、Cu2+和Fe2+在不同浓度下对酶活力均有不同程度的抑制作用。在重组酶的辅助作用下,抗生素的抑菌效果明显提高。【结论】用重组毕赤酵母可高效表达外源海藻酸裂解酶,为其今后在工农业中的应用奠定了基础。; 岳明丁宏标乔宇; 关键词：毕赤酵母

鸡球虫入侵机理、免疫学性质及基因工程在疫苗研制上的应用被引量：4: 2007年; 鸡球虫病是严重危害养禽业的一种寄生虫病。长期以来主要以化学药物进行防治。但由于球虫抗药性和药物残留等问题日益严重,使得新药开发和应用受到限制。在免疫学中强毒活苗应用广泛但生产费用昂贵,从而促使我们转向对重组亚单位疫苗的研究。不同种类的球虫有较为严格的寄生部位。且不同发育阶段的球虫其免疫原性和抗原构成也有很大差异。在真核寄生生物中,由于受到宿主免疫系统的限制,选用鸡球虫免疫保护性抗原做重组疫苗目前还没有很大突破,因此我们需要采用新方法发现新抗原,有效防治鸡球虫病。; 陈静丁宏标乔宇韩德强; 关键词：球虫病重组抗原基因工程疫苗

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国家高技术研究发展计划(2005AA246010)