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国家自然科学基金(C160605)
作品数:
2
被引量:1
H指数:1
相关作者:
王共先
刘胜来
陈捷
熊礼生
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相关机构:
南昌大学第一附属医院
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医药卫生
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间充质干细胞
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骨髓间充质
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骨髓间充质干...
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作者
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陈捷
2篇
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2011
1篇
2010
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mFVII/Fc融合基因慢病毒载体的构建及在hBMSCs中表达的研究
2011年
目的构建人凝血因子VII(FVII)与免疫球蛋白Fc片段融合基因(mFVII/Fc)的慢病毒表达载体,并检测其在人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)中的表达情况,获取mFvII/Fc稳定表达的干细胞载体。方法体外克隆人凝血因子VII,用点突变技术在基因水平将341部位Lys突变为Ala后,利用DNA连接酶与免疫球蛋白IgG1 Fc片段的基因融合,经酶切整合,测序鉴定后转染人胚肾293T细胞包装为重组mFVII/Fc慢病毒载体,鉴定载体构建成功后,测定慢病毒滴度。确定转染第三代hBMSCs的最佳MOI值后批量转染,荧光显微镜下观察GFP的表达情况,RT—PCR、ELISA分别在不同时间点对mFVII/Fc的mRNA及蛋白表达进行相对定量分析。结果所构建融合基因与GenBankID:AF272774对比,除同义变异外完全相符;包装的慢病毒滴度为2×10^8TU/ml;hBMSCs鉴定结果为CD+(98.08%)、CD+(97.63%)、CD;(0.31%)、CD+(0.58%);转染hBMSCs72h后的效率为(84±3)%,经RT—PCR及ELISA证实转染mFVII/Fc基因的hBMSCs有大量mRNA转录和蛋白表达水平。结论实验成功获得了融合基因的hBMSCs稳定遗传表达载体,为靶向前列腺癌组织因子研究及肿瘤基因治疗研究提供了实验依据。
刘胜来
陈捷
王共先
汪泱
汪新辉
余刚
薛金雄
熊礼生
关键词:
人骨髓间充质干细胞
融合基因
慢病毒载体
骨髓间充质干细胞与前列腺癌相互作用的研究进展
被引量:1
2010年
骨髓间充质干细胞(MSCs)作为一种成体干细胞,具有肿瘤组织定向趋化能力,参与肿瘤间质形成,又具有恶性转化及潜在移植后致瘤性,使其与肿瘤的关系密不可分。骨骼是前列腺癌转移最常见的靶器官,超过70%的晚期前列腺癌患者发生以脊柱病变为表现的骨转移,其发生机制尚未完全明确。鉴于MSCs独特的生物学特性及前列腺癌特殊的生长环境与转移途径,
刘胜来
陈捷
王共先
关键词:
骨髓间充质干细胞
前列腺癌患者
相互作用
肿瘤组织
成体干细胞
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