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广东省卫生厅资助课题(A2005223)
作品数:
1
被引量:5
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2007
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TrkA基因修饰、诱导神经干细胞分化为胆碱能神经元
被引量:5
2007年
目的研究外源性TrkaA基因修饰C17.2神经干细胞,对神经干细胞定向分化的影响。方法采用脂质体法将携带有TrkA基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/TrkA转染C17.2神经干细胞,Western blot观察转染后基因表达情况;将正常生长的C17.2神经干细胞随机分成两组(A组和C组),将重组质粒转染阳性的C17.2神经干细胞随机分成两组(B组和D组),并用100ng/mg神经生长因子(NCF)分别作用于C组及D组,应用间接免疫荧光染色方法,观察各组细胞胆碱乙酰转移酶(CHAT)的表达。结果Western blot结果显示转染组TrkA蛋白表达明显高于非转染组,说明外源性TrkA基因导入靶细胞,并实现蛋白表达;间接免疫荧光染色显示,经NGF孵育的转染组细胞(D组)约有26%呈ChAT阳性,而非转染组(C组)约为9%,未经NGF孵育的A、B组未观察到CHAT阳性细胞。结论应用外源性TrkA基因修饰神经干细胞,造成TrkA基因过度表达,在NGF作用下,可以诱导更多的神经干细胞向胆碱能神经元分化。
贺峰
刘中霖
叶剑虹
刘军
肖颂华
刘运林
黄仕雄
邢诒刚
关键词:
神经干细胞
分化
胆碱能神经元
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