博士科研启动基金(2010)
- 作品数：87 被引量：366H指数：9
- 相关作者：郑斌尹志奎张依裕徐昌进李万贵更多>>
- 相关机构：新乡医学院贵州大学贵州财经大学更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金国家自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生理学经济管理更多>>
- 刚地弓形虫MIC8 CTD作用蛋白的筛选及鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的从刚地弓形虫速殖子裂解液中筛选并鉴定微线体蛋白8羧基端胞质尾（MIC8CTD）的作用蛋白。方法分别以GST—MIC8CTD蛋白和GST蛋白（对照）作为探针蛋白，采用GSTpull—down技术从弓形虫裂解液中筛选目标蛋白并进行SDS-PAGE分析；将目标蛋白转印至PVDF膜，测序，通过BLAST2在线对比搜索相似蛋白序列，初步确定目标蛋白；以目标蛋白抗体为一抗进行Westernblot，分析GSTpull—down产物与目标蛋白抗体的相互作用；分别用GST—MIC8CTD多克隆抗体和兔免疫前血清结合的sepharose与弓形虫裂解液进行免疫共沉淀试验，沉淀物进行SDS—PAGE和Westernblot分析。结果PAGE显示GST—MIC8CTD蛋白的pull—down产物中有一蛋白条带（分子质量单位约35～45ku），GST蛋白的pull—down产物中无此蛋白；BLAST2比对目标蛋白的氨基酸序列与弓形虫醛缩酶序列一致；ECM检测GST—MIC8CTD多克隆抗体的免疫共沉淀产物中有蛋白组分可被相应的抗体识别，免疫前血清的免疫共沉淀产物中无可被识别的蛋白。结论经GSTpull—down技术和免疫共沉淀试验筛选、鉴定，弓形虫MIC8CTD的作用蛋白为醛缩酶。
- 郑斌尹志奎史明珠任红斌詹希美
- 关键词：刚地弓形虫醛缩酶免疫共沉淀
- 河南新乡地区猪弓形虫感染与风险因素分析被引量：4
- 2017年
- 为了解河南新乡地区猪弓形虫感染的情况及风险因素,用间接血凝法对2011年-2013年采集的猪血样进行检测。采用SPSS13.0统计分析资料,χ~2检验比较年度间及各风险因素的差异。结果显示,新乡地区2011年-2013年猪弓形虫血清阳性率分别为20.9%、34.4%和23.9%,年度间弓形虫血清阳性率差异不显著(P>0.05);弓形虫感染的风险因素中,猫出现次数的高低之间、是否接触啮齿类(鼠类)之间、有否与狗接触之间和有无流产史之间差异显著(P<0.05)。调查结果表明,河南新乡地区的猪弓形虫感染普遍存在,猫出现的次数、接触啮齿类(鼠类)、接触狗和有流产史等因素对猪感染弓形虫有影响。
- 郑斌尹志奎李金娜姚志军王帅任红斌张海珠
- 关键词：刚地弓形虫血清学调查
- 兴义鸭CYP7A1基因外显子3多态性与血清生化指标的关联性研究被引量：6
- 2014年
- 本研究采用PCR-SSCP和DNA直接测序技术相结合来检测兴义鸭CYP7A1基因外显子3的SNP位点,分析其与血清生化指标的关联性。结果表明,检测到3种基因型AA、AB和BB,2个等位基因A和B,AA和A分别为优势基因型和等位基因,频率分别为0.882和0.921,序列比对发现5个SNP位点G744A、G783A、T858C、C951G和G960A,均为同义突变。关联分析显示,BB基因型个体的血清白蛋白、球蛋白和总蛋白显著高于AA基因型(P<0.05),AA基因型白球比值显著高于AB型(P<0.05),推测CYP7A1基因外显子3的多态可能对兴义鸭血清蛋白有一定影响,BB基因型可能是血清蛋白组成的有利基因型,等位基因B可能是有利等位基因。
- 李万贵张依裕潘兰兵杨永强林家栋刘若余
- 关键词：PCR-SSCP血清生化指标
- 后路经肌间隙入路与开放入路内固定治疗胸腰椎骨折脱位的疗效比较被引量：35
- 2018年
- 目的比较后路经肌间隙入路与开放入路椎弓根螺钉内固定治疗胸腰椎骨折脱位的临床疗效。方法采用回顾性病例对照研究分析2013年1月-2016年1月收治的40例胸腰椎骨折脱位患者临床资料。手术均采用后正中切口，根据手术入路分为肌间隙入路组（A组）和传统开放入路组（B组），每组20例。A组男12例，女8例；年龄21—60岁[（41．5±9．6）岁]。B组男13例，女7例；年龄18—58岁[（39．1±13．1）岁]。其中A组行后路经肌间隙置钉、椎管减压、复位、椎体间植骨融合内固定术，B组行传统后路开放置钉、椎管减压、复位、椎体间植骨融合内固定术。椎管减压、复位、椎体间植骨融合手术程序相同。比较两组手术时间、术中出血量、术后引流量、视觉模拟评分（VAS）、末次随访伤椎椎管通畅率、责任节段前柱高度百分比及Cobb角。采用MRI评估术后椎旁肌的萎缩程度，采用美国脊髓损伤协会（ASIA）分级评估患者的神经功能恢复情况。结果患者均获随访9—33个月，其中A组（19．3±5．6）个月，B组（22．5±4．9）个月（P〉0．05）。手术时间A组为（240．5±38．3）min，B组为（258．5±43．7）min（P〉0．05）。术中出血量A组为（525．0±168．2）m1，B组为（770．0±269．2）ml（P〈0．05）。术后引流量A组为（190．1±78．9）m1，B组为（281．7±122．3）ml（P〈0．05）。术后24h及末次随访VASA组分别为（6．4±1．0）分和（1．6±0．5）分，B组分别为（7．8±0．7）分和（2．2±0．4）分（P均〈0．05）。末次随访时伤椎椎管通畅率、责任节段前柱高度百分比及Cobb角A组分别为（85．3±3．7）％、（85．5±2．7）％和（4．7±1．2）°，B组分别为（85．8±1．8）％、（88．8±1．3）％和（5．3±1．5）°（P均〉0．05）。术后椎旁肌MRI评分A组为（2．1±0．6）分，B组为（1．2±0．6）分（P〈0．05）�
- 范红松刘连敖俊廖文波伍富俊刘磊
- 关键词：脊柱损伤胸椎腰椎
- 三穗鸭兴义鸭樱桃谷鸭肉质和血清生化指标的差异性分析被引量：7
- 2014年
- 笔者对饲养于贵州大学试验场,同批孵化出雏的三穗鸭、兴义鸭、樱桃谷鸭适时采血采样,进行肉质、血清生化指标及脂肪酸测定,并分析各指标在三个品种之间的差异。结果表明,地方品种三穗鸭和兴义鸭的肉质综合水平优于引进培育品种樱桃谷鸭,表现出良好的保水性和嫩度。三种鸭的血清生化指标差异分析显示,总体水平上,三穗鸭优于兴义鸭,兴义鸭优于樱桃谷鸭,这间接地反映了这三种鸭的产蛋性能的优异程度,三穗鸭、兴义鸭到樱桃谷鸭呈依次减弱趋势。脂肪酸差异分析表明,三穗鸭和兴义鸭的脂肪酸组成总体水平上优于樱桃谷鸭,更适合人们健康的需要。
- 何照波李万贵王艳张依裕潘兰兵
- 关键词：三穗鸭樱桃谷鸭肉质血清生化指标
- 弓形虫actin蛋白多克隆抗体的制备及纯化
- 2013年
- 目的制备弓形虫肌动蛋白(actin)的多克隆抗体并纯化。方法以弓形虫cDNA链为模板PCR扩增1 131bp actin基因,亚克隆至pET30a载体后转化入大肠埃希菌BL21中,用1mmol/L IPTG诱导表达actin-His6蛋白,采用亲和层析法纯化;取200μg纯化蛋白加等量佐剂混合,免疫SD大鼠4次,收集抗血清,用亲和纯化柱纯化。结果 PCR扩增出actin基因并成功构建actin/pET30a/BL21表达系统,获得actin-His6蛋白,制备的大鼠源性actin-His6蛋白多克隆抗体纯化后为单一蛋白抗体。结论制备并纯化了抗弓形虫actin的多克隆抗体,为弓形虫入侵机制的研究奠定了基础。
- 郑斌尹志奎詹希美
- 关键词：弓形虫肌动蛋白多克隆抗体
- 人工鱼群算法研究综述被引量：15
- 2013年
- 针对近年来人工鱼群算法的文献进行了总结和研究。首先介绍了鱼群算法的基本计算原理;随后,分析了鱼群算法的部分参数对于算法寻优结果的影响,并介绍了鱼群算法的相关改进方法和部分应用成果,指出了鱼群算法未来的改进与研究方向。
- 王培崇
- 具有时滞的计算机网络病毒传染模型分支分析被引量：4
- 2013年
- 研究了一类具有时滞的计算机网络病毒传染模型。通过分析模型的特征方程及考虑不同的时滞对系统动力学行为的影响,得到了模型的平衡点稳定及Hopf分支产生的条件。数值模拟验证了所得理论分析结果的正确性。
- 徐昌进姚凌云
- 关键词：稳定性HOPF分支时滞
- 兴义鸭体重生长曲线拟合与比较被引量：10
- 2013年
- 为了对兴义鸭的标准化养殖和育种提供参考依据,测定了不同性别兴义鸭的早期体重,并运用Logistic、Von Bertalanffy和Gompertz 3种非线性生长模型拟合其生长曲线。结果表明,兴义鸭0～4周龄体重处于快速增长期,母鸭的生长速度高于公鸭;6～10周龄体重增长逐渐变慢,公鸭高于母鸭;3种模型均能较好地拟合兴义鸭体重的生长曲线,复相关指数(R2)均高于0.99,结合残差平方和(E)和卡方(χ2)适合性检验,Gompertz模型拟合效果最好,公鸭y=1 404.492e-4.079exp(-0.382t),母鸭y=1 301.985e-4.324exp(-0.433t)。综合兴义鸭体重变化规律和生长曲线拟合分析认为,兴义鸭划分为0～4周、5～10周、11周至成年3个饲养阶段较为理想。
- 张依裕赵素阁潘兰兵伍悦刘传朝张明王俊肖纯猛
- 关键词：体重
- GST沉降技术验证弓形虫醛缩酶与肌动蛋白的相互作用被引量：6
- 2011年
- 目的通过GST沉降技术(GST pull-down)验证刚地弓形虫醛缩酶(aldolase)与肌动蛋白(actin)的相互作用。方法 PCR扩增弓形虫cDNA中aldolase和actin基因,分别亚克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1和pET30a,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,亲和层析法纯化表达产物。采用腹部皮内多点注射免疫SD大鼠15只,首次免疫Actin-His6蛋白量为200μg/只,第2次起免疫蛋白量为100μg/只,共免疫4次,每次间隔7 d,末次免疫后5 d收集心脏血,制备Actin-His6抗血清。以纯化的GST-Aldolase蛋白作为探针蛋白与Actin-His6蛋白液进行GST沉降实验,实验产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析。结果获得了弓形虫aldolase和actin基因序列,构建了相应的原核表达载体。表达并纯化了GST-Aldolase和Actin-His6蛋白。Actin-His6蛋白免疫SD大鼠后获得其抗血清,经抗体亲和纯化柱纯化,获得Actin-His6多克隆抗体。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,GST沉降实验产物中的蛋白条带可被Aldolase-His6多克隆抗体和Actin-His6多克隆抗体识别。结论弓形虫醛缩酶与肌动蛋白存在相互作用。
- 郑斌尹志奎何蔼李卓雅詹希美
- 关键词：刚地弓形虫醛缩酶肌动蛋白蛋白相互作用
