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实时定量PCR方法检测鼻咽癌病人全血EB病毒拷贝数的实验研究被引量：4: 2003年; EBV在多种肿瘤中存在,并在相关肿瘤的发病中起一定的作用.本文应用实时定量PCR方法检测鼻咽癌与健康对照全血EBV拷贝数.结果表明在73例鼻咽癌病人与83例正常对照中,NPC组中EBV阳性率为46.6%,对照组阳性率为13.3%.对照组平均EB病毒拷贝数为3.9×104拷贝/μgDNA,高于鼻咽癌组(1.7×105拷贝/μgDNA).全血EBV的感染与鼻咽癌的发生相关,而裂解状态EBV在细胞转化过程中的作用可能更大.应用实时定量PCR进行全血EBV的检测可用于鼻咽癌的分子诊断.; 王海邓琳陈苏红王升启曹亚; 关键词：鼻咽癌病人

蛋白质组学在信号转导研究中的应用被引量：7: 2004年; 新近发展起来的蛋白质组学高通量技术引入到信号转导通路研究中 ,产生了一个新的研究领域 :信号转导蛋白质组学。其作为功能蛋白质组学的一个重要组成部分 ,以研究信号转导通路以及其中的信号分子改变的蛋白质组学。克服了传统地针对单条信号转导通路以及其中的单个信号分子研究策略的局限性 ,能够在一次实验中系统地研究多条信号转导通路中的蛋白质蛋白质间的相互作用、蛋白质磷酸化等翻译后修饰和下游靶蛋白的改变 ,有助于全面阐述信号转导通路 ,已成为一个新的研究热点。; 晏光荣曹亚; 关键词：信号转导蛋白质组学高通量

EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞系中通过NF-κB、AP-1促进MMP9表达被引量：34: 2002年; 目的　探讨EB病毒 (Epstein BarrVirus,EBV)LMP1是否通过NF κB和AP 1促进MMP9表达 ,为全面阐明LMP1的分子致瘤机制提供实验依据。方法　将MMP9 CAT表达质粒导入HNE2 pSG5、HNE2 LMP1、HNE2 LMP1(1 185 )、HNE2 LMP1(1 2 31)、HNE2 LMP1Δ187 35 1鼻咽癌 (nasopharyngealcarcinoma ,NPC)细胞系 ,比较各组细胞系的氯霉素乙酰转移酶 (CAT)活性 ,以确定LMP1或其不同的结构域是否上调MMP9转录 ;采用明胶Zymography法检测上述细胞产生MMP9的活性 ,以确定LMP1或其不同的结构域是否促进MMP9蛋白表达 ;借助报道基因分析法确定在NPC中野生型LMP1能否激活NF κB和AP 1的活性 ,进一步将突变了NF κB或AP 1结合位点的MMP9 CAT表达质粒导入上述细胞系 ;比较相应的CAT活性 ,以确定LMP1或其不同的结构域是否通过NF κB或AP 1上调MMP9表达。结果　与导入载体pCDNA3比较 ,HNE2 LMP1、HNE2 LMP1(1 185 )、HNE2 LMP1(1 2 31)和HNE2 LMP1Δ187 35 1NPC细胞系CAT活性分别提高 7.2 ,1.3,3.3和 4.0倍。明胶Zymography法检测显示 ,在HNE2 LMP1、HNE2 LMP1(1 2 31)和HNE2 LMP1Δ187 35 1细胞系中 ,均可检测到 92 0 0 0MMP9活性 ,而HNE2 pSG5、HNE2 LMP1(1 2 31)几乎均为阴性。较之母细胞 ,野生型LMP1活化NF; 王承兴邓锡云李晓艳顾焕华易薇翁新宪夏林庆曹亚; 关键词：EB病毒 LMP1 NF-ΚB AP-1 鼻咽癌

EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞系中通过TRAF2活化NF-kB被引量：18: 2000年; 目的：为了探讨ＥＢ病毒（ＥＢＶ）中ＬＭＰ１的致瘤机制，对鼻咽癌ＬＭＰ１激活重要的核转录因子ＮＦ－_ＫＢ的机制进行了研究。方法：①以ＬＭＰ１阴性的鼻咽癌细胞系ＨＮＥ２及表达载体（ｐＳＧ５）的鼻咽癌细胞系ＨＮＥ２－ｐＳＧＳ为对照，采用免疫共沉淀－Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ方法在稳定表达ＬＭＰ１的鼻咽癌细胞系ＨＮＥ２－ＬＭＰ１中证实ＬＭＰ１与ＴＲＡＦ２是否直接结合形成免疫共沉淀复合物；②在ＨＮＥ２－ＬＭＰ１细胞系导入ＴＲＡＦ２表达质粒或不同剂量ＴＲＡＦ２显性负性突变体（ＴＲＡＦ２Ａ６－８６）表达质粒，以ＮＦ－ｋＢ报道基因方法确定ＬＭＰ1是否通过ＴＲＡＦ2活化ＮＦ－ｋＢ；③将ＬＭＰ１（１－２３１）（ＣＴＡＲ２缺失区）或ＬＭＰ１△１８７－３５１（ＣＴＡＲＩ缺失区）及不同剂量ＴＲＡＦ２Ａ６－８６瞬时导入ＨＮＥ２中以证实ＬＭＰ１ＣＴＡＲ１或ＣＴＡＲ２是否介导了这种效应；④以转染或未转染ＴＲＡＦ２６－８６的ＨＮＥ２－ＬＭＰ１细胞系为材料，应用免疫共沉淀－Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ方法，确定ＴＲＡＦ２△６－８６是否竞争性抑制ＴＲＡＦ２与ＬＭＰ１结合。结果：①在ＨＮＥ２－ＬＭＰ１中ＬＭＰ１与ＴＲＡＦ２形成复合物?; 王承兴李晓艳肖绘邓锡云曹亚; 关键词：LMP1 TRAF2 NF-KB EB病毒

EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌中结合磷酸化的TRAFs被引量：3: 2001年; 对鼻咽癌中潜伏膜蛋白 1 (LMP1 )是否结合磷酸化的肿瘤坏死因子受体相关因子 (tumornecrosis factor receptor- associated factors,TRAFs)信号分子进行探讨 .首先应用 CSA/SP双染色法在 30例鼻咽癌活检组织中发现 1 6例 (52 % ) LMP1与 TRAF1、TRAF2和 TRAF3共表达于癌细胞胞膜及胞浆同一部位 .这提示 EB病毒 LMP1在鼻咽癌中可能结合 TRAF1、TRAF2或TRAF3发挥作用 .进一步以导入载体 p SG5的鼻咽癌细胞系 HNE2 - p SG5为对照 ,建立了稳定表达 LMP1的鼻咽癌细胞系 HNE2 - LMP1 ,利用这两种细胞系 ,以免疫共沉淀 - Western印迹方法 ,证实了 LMP1可与磷酸化的 TRAF1、TRAF2或 TRAF3直接或间接作用形成免疫共沉淀复合物 .; 王承兴李晓艳顾焕华邓锡云曹亚; 关键词：鼻咽癌潜伏膜蛋白1 肿瘤坏死因子受体相关因子 EB病毒

鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白1活化cyclinD1的表达被引量：33: 2001年; 为了探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(EBV LMP1)促进细胞增殖 ,参与EBV相关疾病致瘤的分子机制 ,研究了LMP1在鼻咽癌细胞中调节cyclinD1表达 ,进而影响细胞周期行进及细胞恶性表型改变 ,并初步确定了LMP1发挥该功能的结构域 .利用已建株的Tet on LMP1 HNE2鼻咽癌细胞系 ,蛋白质印迹实验分析LMP1诱导cyclinD1蛋白质表达的表达动力学 ,包括时间效应及剂量效应 ;利用三种LMP1功能区缺失的突变体及野生型LMP1,以载体型细胞为对照 ,确定LMP1活化cyclinD1表达的结构域 .同时结合基因诱导表达及反义寡聚核酸技术阻断基因表达的实验方法 ,进一步确定LMP1上调的cyclinD1功能 ,即对细胞周期行进及细胞恶性表型的影响 .结果表明LMP1确实可以诱导cyclinD1的表达 (2～ 4倍 ) ,且诱导具有时间依赖性及剂量依赖性 ;利用三种LMP1功能区缺失的突变体及野生型LMP1,以载体型细胞为对照 ,结合报道基因分析法 ,确定与空白载体细胞系比较 ,野生型LMP1从转录水平可反式激活cyclinD1报道基因活性约 11 2倍 ,其中CTAR1及CTAR2均可活化cyclinD1表达 ,但以CTAR2为主 ,与野生型LMP1诱导cyclinD1反式激活活性比较 ,CTAR1缺失导致cyclinD1报道基因活性下降 2 3 6 % ,CTAR2缺失导致cyclinD1活性下降约 80 7% ,C端均缺失时cyclinD1活性只?; 赵晓荣王承兴罗非君顾焕华唐敏夏林庆邓琳易薇邓锡云曹亚; 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白1 周期蛋白D1 鼻咽癌细胞

Immunoglobulin Expression and Its Biological Significance in Cancer Cells被引量：8: 2008年; It is generally believed that the expression of a gene is restricted "within the right place and at the right time". This principle has long been considered applicable as well to the expression of immunoglobulin (Ig) lymphocytes of B cell lineage. However, increasing evidence has shown Ig "paradoxically" expressed in malignant tumors of epithelial origin. We reviewed the recent progress in the study of cancer-derived Ig, and also discussed its mechanisms and possible functions, trying to arouse interest and attention to those working in the field of immunology and oncology.; Duosha HuHui ZhengHaidan LiuMing LiWei RenWei LiaoZhi DuanLili LiYa Cao; 关键词：免疫球蛋白癌细胞生物学

EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞系中通过NF-κB、AP-1促进IL-8分泌被引量：3: 2002年; 目的　探讨EB病毒LMP1分子致瘤机制 ,在已证实鼻咽癌细胞系中LMP1有效激活NF κB或AP 1的基础上 ,对LMP1是否通过NF κB或AP 1促进IL 8分泌进行探讨。方法　以稳定表达LMP1及其 3种突变体、空白载体的鼻咽癌细胞系 [HNE2 LMP1、HNE2 LMP1(1 185 )、HNE2 LMP1(1 2 31)、HNE2 LMP1△ 187 35 1和HNE2 pSG5 ]及antisense LMP1处理的HNE2 LMP1鼻咽癌细胞系为材料 ,将IL 8报道质粒瞬时导入这些细胞系中 ,通过测定luciferase值以反映LMP1是否促进IL 8转录 ;将mutAP 1 IL 8 luc或IκBα(S32A S36A)表达质粒导入HNE2 LMP1细胞系中 ,比较其IL 8报道活性 ,以确定LMP1是否通过AP 1或NF κB诱导IL 8转录 ;利用ELISA方法测定HNE2 LMP1、HNE2 pSG5、anti sense LMP1处理的HNE2 LMP1鼻咽癌细胞系中的IL 8浓度 ,进一步从蛋白水平上确定LMP1是否促进IL 8分泌。结果　与HNE2 pSG5相比 ,在HNE2 LMP1、HNE2 LMP1△ 187 35 1和HNE2 LMP1(1 2 31)细胞系中IL 8报道活性分别升高了原来水平的 11.5、8.6和 3.4倍 ,而HNE2 LMP1(1 185 )对IL 8报道活性不影响。在HNE2 LMP1细胞系中IL 8蛋白水平提高了 17.4倍 ,而antisense LMP1则使HNE2 LMP1细胞的IL 8报道活性及蛋白水平分别下降到原来水平的 18.3%和 9.2 % ;; 王承兴顾焕华邓锡云李晓艳夏林庆易薇翁新宪曹亚; 关键词：EB病毒 IL-8分泌 NF-ΚB AP-1 鼻咽癌

JIP抑制鼻咽癌细胞中LMP1诱导的AP-1活性及机理的研究被引量：3: 2002年; 目的 :探讨鼻咽癌细胞中JIP抑制激活蛋白 1(AP - 1)信号转导途径的分子机制。方法 :用Dox诱导L7(Tet-on -LMP1-HNE2 )细胞表达LMP1,观察AP - 1活性的动力学变化 ,然后用不同浓度的JIP质粒转染L7细胞后 ,观察JIP的表达对LMP1诱导的AP - 1活性的影响 ,并用荧光免疫组化方法观察JIP抑制JNK核移位引起磷酸化的JNK在胞浆中的滞留。结果 :在转染JIP表达质粒 2 4h之后 ,抑制了活化的JNK核移位 ,下调了AP - 1的生物活性。结论 :JIP能够通过抑制磷酸化的JNK核移位 ,从而下调AP - 1活性。; 胡智罗非君邓锡云殷莉群赵燕唐发清唐敏顾焕华易薇曹亚; 关键词：NF-KAPPA JIP 活性 AP-1

哺乳动物细胞中cyclin的转录调控被引量：1: 2001年; 各类 cyclin在转录水平的精确调控为细胞周期有序运行的重要机制之一。转录因子被相应的信号传导途径激活后通过激活或抑制 cyclin的转录。; 邓琳; 关键词：CYCLIN 转录调控细胞周期

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