国家重点基础研究发展计划(2013CB530803)
- 作品数:26 被引量:129H指数:7
- 相关作者:张旭马鑫李新涛高宇王保军更多>>
- 相关机构:中国人民解放军总医院南京医科大学华中科技大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金卫生行业科研专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人微管蛋白辅助因子A基因真核表达载体的构建鉴定及对肾癌细胞株786—0增殖的影响
- 2014年
- 目的构建含有人微管蛋白辅助因子A(TBCA)的真核表达载体并观察其对。肾癌细胞株786-0增殖的影响。方法构建真核表达载体pcDNA3.0.Flag-TBCA和pCMV-TBCA—IRES—EGFP,并进行酶切、测序检验、脂质体转染细胞后利用Western blot法检测蛋白表达。以四唑氮化合物(MTS)法绘制细胞生长曲线。结果成功构建了真核表达载体pcDNA3.0-Flag—TBCA和pCMV—TBCA—IRES-EGFP。转染后TBCA在细胞中表达明显升高(P〈0.05)。但在转染后第3、4、5、6天,重组质粒组吸光度值分别为0.52±0.04、0.85±0.04、1.20±0.08、1.61±0.11;与对照组比较无统计学意义(P〉0.05)。结论TBCA的过表达载体构建成功,但在786-0细胞中过表达TBCA后对并不能对细胞增殖产生明显影响。
- 逄海港张鹏宋尔霖李新涛马鑫张旭
- 关键词:肾癌增殖
- TD—IκBα病毒包装及其对肾癌细胞株ACHN增殖和侵袭的影响被引量:3
- 2014年
- 目的构建pLVX-TD—IκBα—IRES—ZsGreenl慢病毒表达载体及包装病毒,观察稳定转染TD-IκBα对肾癌细胞株ACHN增殖和侵袭的影响。方法从pCFG5-IEGZ—TD—IκBα质粒上获得的目的基因片段克隆入pLVX-IRES—ZsGreenl载体,并进行测序。将慢病毒载体与包装质粒delta8.91和p-VSVG以4:3:2比例共转染293T细胞,收集病毒上清并感染肾癌细胞株ACHN,5d后采用Western blot检测TD-IκBα蛋白的表达,使用四唑氮化合物(MTS)和Transwell侵袭实验方法检测细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果成功构建pLVX—TD—IκBα—IRES—ZsGreenl慢病毒表达载体,包装病毒后成功感染ACHN细胞株,感染组细胞株中的TD—IκBα蛋白显著表达增高。感染组细胞在490nm处吸光度值明显下降(P〈0.05)。细胞迁移和侵袭实验中,相对于阴性对照组穿膜细胞数[(361.400±42.379)个和(328.500±27.031)个],感染组穿膜细胞数[(252.200±26.142)个和(127.300±35.572)个]显著减少(P〈0.05)。结论成功构建pLVX—TD—IκBα-IRES—ZsGreenl重组慢病毒表达载体并包装病毒,过表达TD—IκBα蛋白可显著降低ACHN细胞株的增殖、迁移和侵袭能力。
- 李新涛马鑫逄海港高宇范阳张旭
- 关键词:IΚBΑ肾透明细胞癌增殖
- 糖尿病肾脏疾病预后标志物的研究进展被引量:1
- 2015年
- 糖尿病是当前最具挑战性的公共健康问题之一,全世界的患病人数高达3.47亿。其中糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)的发生率为25%~40%。DKD患者有较高的终末期肾脏病(end-stage renal disease,ESRD)的风险,是慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者透析的主要原因,早期识别可能进展至ESRD的高危人群非常重要。
- 董哲毅陈香美
- 关键词:终末期肾脏病肾脏保护肾脏疾病疾病预后炎症标志物
- KCNJ5基因148dupT突变对H295R细胞醛固酮分泌的影响
- 2014年
- 目的:研究KCNJ5基因148dupT突变对H295R细胞醛固酮分泌的影响及相关机制。方法:构建KCNJ5基因148dupT突变和非突变型质粒,选取H295R肾上腺腺瘤细胞系和293T人胚肾细胞系,应用jetPRIME转染试剂将突变和非突变以及对照质粒转染H295R细胞系以及293T细胞系,使用DiSBAC2染料检测293T细胞膜电位的变化、放射免疫分析法检测H295R细胞醛固酮的合成以及实时定量PCR检测CYP11B1和CYP11B2基因的表达。结果:148dupT突变型KCNJ5基因转入293T细胞可以导致膜电位去极化;转入H295R细胞可以导致醛固酮分泌增加,和CYP11B1和CYP11B2基因的表达增加。结论:148dupT突变型KCNJ5基因可能通过细胞膜电位去极化使得醛固酮合酶基因表达增加,进而导致H295R细胞醛固酮分泌增多和醛固酮瘤的发生发展。
- 李新涛王保军马鑫吕香君逄海港范阳高宇艾青张旭
- 关键词:醛固酮瘤基因突变
- 肾原发性神经内分泌癌诊治分析(附10例报告)被引量:2
- 2016年
- 目的:探讨肾原发性神经内分泌癌(NECK)的临床病理特点,提高对该疾病的诊治水平。方法:回顾分析2000年1月~2015年11月期间诊治的10例病理诊断为NECK患者的临床病理资料。归纳总结该类肿瘤的临床特点、病理学特点、诊疗手段及临床预后。结果:10例患者病理诊断均为NECK,其中男2例,女8例,平均年龄40.1(22~70)岁。左肾2例,右肾8例。肿瘤最大径平均7.35(2.5~21.0)cm。TNM分期:T1N0M02例,T2N0M03例,T3N0M04例,T3N1M01例。10例患者均行手术治疗。平均随访21.2(1~75)个月,1例失访,2例患者术后发生远处转移,2例死亡。结论:NECK临床罕见,诊断依赖病理组织学及免疫组化检查,治疗以手术为主,辅以化疗,其中类癌恶性度较低,预后相对较好,其余类型恶性度高,发展迅速,预后较差。
- 武翀马明辉赵超飞王雷刘侃孟庆禹姚远新罗国雄郭爱桃张旭
- 关键词:肾肿瘤
- 中国肝移植发展概况被引量:14
- 2018年
- 肝移植起源于欧美国家,我国肝移植的发展离不开国际器官移植和肝移植发展的大背景。
一、国际器官移植和肝移植发展的里程碑事件
1905年,carre首创血管缝合法突破血管吻合技术的瓶颈,从此真正开展了血管吻合的各种器官移植实验研究,并因对器官移植的贡献于1912年获得诺贝尔奖。
- 王少发陈孝平
- 关键词:肝移植血管吻合技术器官移植诺贝尔奖
- 多房囊性肾细胞癌26例临床诊治分析被引量:2
- 2015年
- 目的:探讨多房囊性肾细胞癌的诊断与治疗。方法:回顾性分析2008年1月~2014年2月收治26例多房囊性肾细胞癌患者的临床表现、诊断方法、手术方式、病理结果及预后情况。结果:26例患者中,行开放手术4例,其中因术中粘连严重中转开放手术2例,微创手术22例,其中腹腔镜手术4例,后腹腔镜手术17例,机器人辅助腹腔镜手术1例;保留肾单位手术14例,根治性肾切除术12例。26例患者术后病理报告均为多房囊性肾细胞癌,26例均获随访,随访12~82个月,平均43.8个月,均未见肿瘤复发和转移。结论:多房囊性肾细胞癌是一种恶性程度低的肾肿瘤,预后良好。影像学检查对其早期诊断有重要价值,手术治疗为多房囊性肾癌的首选治疗方式。
- 赵超飞陈路遥罗国雄李世超王雷孟庆禹姚远新高宇张瑜马鑫
- 关键词:肾肿瘤多房囊性肾细胞癌
- 老年人慢性肾脏病替代治疗的特点及选择被引量:7
- 2016年
- 随着发病率的日益增加,慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)己成为重要的全球性的非传播性疾病。近20年来,美国CKD的患病率由10.3%增长至13.2%,在大于70岁的老年人群中增幅最为明显,由37%增至47%,其中肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)〈60ml/(min·1.73m^2)者超过1/3。
- 汪妍裴小华赵卫红
- 关键词:慢性肾脏病老年人群肾小球滤过率传播性疾病患病率CKD
- 转化生长因子-β1诱导肾小管上皮细胞老化及其作用机制的研究被引量:3
- 2017年
- 目的本研究旨在明确转化生长因子-β1(TGF-β1)与肾脏老化之间的关系并初步探讨其作用机制。方法体内实验:自然状态下不同年龄段C57小鼠通过肾脏免疫组化、蛋白改变来验证小鼠肾脏内TGF-β1表达随增龄发生的变化。体外实验:不同浓度的TGF-β1刺激肾小管上皮细胞48 h,观察老化指标改变,并用其抑制剂Decorin进行干预验证。结果体内实验中,小鼠肾脏内TGF-β1的表达随增龄而增加,幼龄组表达量很少或无表达;体外实验中,20 ng/ml TGF-β1可明显诱导肾小管上皮细胞老化,其中β-半乳糖苷酶、p53、p16等老化相关蛋白表达量均显著增加;而加入TGF-β1抑制剂Decorin干预组,Smad2、Smad3及p53、p16蛋白表达减少,Smad7蛋白表达增加。结论 TGF-β1在老化肾脏中表达显著增加;其可能主要通过激活其下游信号分子Smad2、Smad3,抑制Smad7来激活肾小管上皮细胞肌纤维细胞转分化的作用,继而促进了老化相关纤维化的发生。
- 孙晗赵亚亚裴小华赵卫红
- 关键词:转化生长因子-Β1肾小管上皮细胞
- 糖尿病合并肾脏损害患者肾活检的临床意义被引量:8
- 2015年
- 糖尿病肾脏疾病(DKD)是导致慢性肾衰竭的主要原因,其中2型糖尿病所致的肾脏病变占绝大多数。肾活检病理检查是诊断的"金标准",对患者治疗方案的选择及预后判断具有重要价值,对新药的开发具有重要意义,也是DKD流行病学调查、确定临床病理联系和开发无创诊断方法的重要依据。因此,对糖尿病尤其是2型糖尿病合并肾脏损害的患者积极开展肾活检病理检查具有重要的临床意义。
- 董哲毅邱强陈香美
- 关键词:糖尿病糖尿病肾脏疾病肾活检肾脏病理