国家自然科学基金(10074016) 作品数:38 被引量:265 H指数:9 相关作者: 黄卓烈 巫光宏 何平 初志战 詹福建 更多>> 相关机构: 华南农业大学 茂名职业技术学院 华南理工大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 理学 轻工技术与工程 更多>>
纤维素酶在二甲基亚砜微扰条件下的动力学行为和光谱学变化 被引量:5 2011年 为了探索二甲基亚砜对纤维素酶催化活性的影响,以羧甲基纤维素钠(CMC)为底物来研究纤维素酶纯酶在二甲基亚砜中的动力学变化、紫外吸收光谱、紫外差示光谱和荧光发射光谱。实验表明:在3%的二甲基亚砜中,纤维素酶的催化活性下降了46.78%;其Km值从缓冲液中的2.500 mg/mL上升到二甲基亚砜中的3.922 mg/mL;在二甲基亚砜中,酶分子的肽键紫外吸收稍有改变,但其氨基酸基团的紫外吸收没有改变;其紫外差示光谱出现明显的正峰和负峰;其荧光发射光谱没有改变。研究结果证明:二甲基亚砜通过轻微改变酶分子的肽链结构,使分子构象改变,导致酶分子对底物的亲和力下降,从而降低其催化活性。 梁娟然 戴菲辉 苏思莹 黄卓烈关键词:纤维素酶 光谱分析 超声波对猪胰脂肪酶催化活性影响的机理研究 被引量:3 2007年 猪胰脂肪酶(porcine pancreas Lipase,PPL)反应系统经适宜参数的超声波处理,催化活性提高了11.22%~24.42%。PPL经超声波处理后,其动力学参数Km和Vmax都变小,酶分子的紫外吸收光谱不变,荧光发射光谱不变。而酶分子经超声波处理后,其紫外差示光谱出现了明显的正峰或负峰。探讨了超声波影响PPL活性的作用机理。 郭诗静 黄卓烈 初志战 黎春怡 巫光宏 詹福建关键词:超声波 动力学 光谱分析 功率超声对酶促反应的影响 被引量:39 2001年 本文评述了功率超声在水溶液和有机溶剂中对酶促反应的影响,对固定化酶的影响。同时探讨了功率超声影响酶促反应的可能机理,并评价功率超声作为一种工业生物化学反应促进手段的可能性。 朱国辉 黄卓烈 丘泰球 刘石生关键词:功率超声 酶活性 酶促反应 固定化酶 甲醇溶液对木瓜蛋白酶催化活性的影响 被引量:8 2005年 试验结果表明,木瓜蛋白酶在一定浓度甲醇溶液中水解酪蛋白的活性显著上升;动力学测定表明,该酶在甲醇溶液中Km下降;在甲醇溶液中木瓜蛋白酶催化酪蛋白水解反应的最适pH为8.5,最适温度为70℃;紫外差示光谱研究表明,在甲醇溶液作用下木瓜蛋白酶的二级结构发生了变化;荧光发射光谱研究表明,木瓜蛋白酶在甲醇溶液中发射峰位向低波长移动,荧光峰值明显增高。 初志战 黄卓烈 巫光宏 何平 詹福建关键词:木瓜蛋白酶 有机溶剂 酶活 动力学 构象 超声波对固定化酶活性的影响 被引量:14 2002年 本文介绍了超声波对固定化酶的影响,同时对作用过程中的影响因素进行了阐述,并探讨了超声波影响固定化酶的可能机理。 陈小丽 黄卓烈 丘泰球关键词:超声波 固定化酶 酶活性 功率 蛋白变性剂对多聚半乳糖醛酸酶及其化学修饰酶催化活性的影响 被引量:9 2012年 为了探索几种蛋白质变性剂对多聚半乳糖醛酸酶的作用效果,以水溶性低分子量壳寡糖(COS,分子量约5000)作为修饰剂对已纯化的多聚半乳糖醛酸酶(PG)进行化学修饰,得到纯化的化学修饰酶(COS-PG),然后,测定不同蛋白变性剂(尿素、盐酸胍、SDS和苯酚)对纯化的PG和COS-PG催化活性的影响。结果表明,修饰后COS-PG的比活性是340.10 U(mg protein)1,比修饰前的PG提高了153%,COS-PG的糖含量比PG提高了43.11%,COS-PG的氨基修饰率为32.85%。SDS(十二烷基硫酸钠)、苯酚对PG和COS-PG活性有抑制作用,1 mmol L 1的SDS分别抑制了PG和COS-PG活性的80.99%和91.14%。10 mmol L 1的苯酚分别抑制了PG和COS-PG活性的34.08%和32.70%。低浓度的尿素和盐酸胍对PG有激活作用,5 mmol L 1的尿素使PG活性提高157.79%,3 mmol L 1的尿素使COS-PG的活性提高67.32%。2 mmol L 1的盐酸胍使PG活性提高57.64%,1 mmol L 1的盐酸胍使COS-PG的活性提高5.76%。 刘小林 伍志权 黄磊 黄卓烈 黎春怡关键词:化学修饰 菠萝茎蛋白酶的纯化及酶活力受超声处理影响的机理 被引量:5 2012年 对菠萝茎蛋白酶进行纯化和鉴定,并研究酶活力受超声处理影响的机理。采用羧甲基纤维素柱层析纯化、PAGE鉴定纯度,测定纯化的酶经超声波处理后的酶活性、动力学参数以及紫外和荧光光谱。柱层析分离出3个蛋白峰区域,其中第二蛋白峰经电泳鉴定纯度较高。酶经超声处理后Km变小,Vm也减小;紫外吸收光谱不变,而差示光谱出现了明显的正峰和负峰,荧光发射光谱基本不变。羧甲基纤维素柱层析对菠萝茎蛋白酶纯化效果较好,超声处理可能通过改变菠萝茎蛋白酶的构象从而改变酶活力。 陈小丽 黄卓烈关键词:纯化 酶活力 超声波 构象 木瓜蛋白酶的固定化及其性质研究 被引量:5 2008年 在海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶(immobilized papain on sodium alginate-chitosan,IPSAC)的实验中,当给酶量为1mgg-1载体时,酶活性为39.2U,酶活力回收为21.1%。在尼龙布固定化木瓜蛋白酶(immobilized papain on nylon,IPN)的实验中,当每块尼龙布(3cm×3cm)给酶量为1mg时,酶活性为35.6U,酶活力回收为19.2%。木瓜蛋白酶(papain,PA)、IPSAC、IPN的最适pH分别为7.2、7.2和6.8。PA及IPSAC在70℃以下活性稳定;IPN在50℃以下活性稳定。IPSAC与IPN半衰期分别为59d和66d。 何平 黄卓烈 黎春怡 巫光宏 初志战 詹福建关键词:木瓜蛋白酶 固定化酶 海藻酸钠 尼龙布 EDTA和金属离子对多聚半乳糖醛酸酶酶活力的影响及其动力学研究 被引量:1 2010年 实验以EDTA和不同金属离子为效应物,果胶为反应底物,研究不同浓度的EDTA,Na+,K+,Ca2+,Cu2+,Zn2+,Mn2+,Fe2+,Fe3+,Ag+和Ba2+对多聚半乳糖醛酸酶(PG)催化活性的影响。结果表明,一定浓度的Cu2+,Zn2+,Mn2+,Fe2+和Fe3+对PG有激活作用,对PG产生最大激活作用的浓度分别为0.3mmol/L,0.4mmol/L,0.3mmol/L,0.3mmol/L和0.6mmol/L,EDTA,Ca2+,Ag+和Ba2+对PG有抑制作用,Na+和K+对PG活性没有影响。动力学研究表明,0.3mmol/LNa+和K+处理后,PG的Km和Vmax基本没有发生变化,2mmol/LEDTA和0.3mmol/LCa2+处理后,PG的Km和Vmax均下降,0.3mmol/LCu2+,Zn2+,Mn2+,Fe2+,Fe3+处理后,PG的Km和Vmax都上升,0.3mmol/LAg+和Ba2+处理后,PG的Km上升,Vmax下降。 刘小林 伍志权 卓怡 黄卓烈关键词:多聚半乳糖醛酸酶 金属离子 动力学 脂肪酶在丙二醇溶液中的活性变化及其机理 被引量:2 2009年 目的:研究猪胰脂肪酶(porcine pancreas lipase,PPL)在丙二醇单相共溶体系中催化橄榄油水解反应的活性变化及其作用机理。方法:测定PPL在不同体积浓度的丙二醇溶液中催化橄榄油水解的活性、动力学参数变化及紫外光谱、紫外差示光谱、荧光光谱的变化情况。结果:体积分数为17%的丙二醇使PPL活性提高了55%;丙二醇处理后,PPL的vmax基本不变,而Km值则明显下降;光谱分析发现,经丙二醇处理后,PPL的紫外吸收光谱发生蓝移,而紫外差示光谱则出现了两个明显的负峰,荧光发射峰强度显著降低。结论:体积分数为17%的丙二醇对PPL有一定的激活作用,该激活作用可能是由于在丙二醇溶液中PPL发生构型和构象的变化,提高了酶分子对底物的亲和力,从而引起酶活性的升高。 黎春怡 黄卓烈 巫光宏 初志战 何平 朱国辉关键词:丙二醇 光谱分析 动力学分析