安徽省自然科学基金(050410301)
- 作品数:17 被引量:208H指数:7
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- 磁性纳米氮化铝颗粒固定化β-葡萄糖苷酶的性质被引量:5
- 2008年
- 以戊二醛为交联剂,研究了磁性纳米氮化铝颗粒固定化β-葡萄糖苷酶的条件及固定化酶的结构特征,并考察了固定化酶的某些酶学性质.结果表明,在4.5ml磁性纳米氮化铝颗粒悬液(100mg/ml)中加入0.5ml戊二醛溶液(2%)超声波分散后,加入5mlβ-葡萄糖苷酶溶液(50mg/ml),于20℃,pH5.0和100r/min条件下固载3.5h,酶蛋白和酶活回收率分别为82.6%和78.4%.固定化β-葡萄糖苷酶的结构松散,不改变酶的结构特征.与游离酶相比,固定化酶对对硝基苯基-β-D-葡萄糖苷水解反应的最佳反应温度有所降低,最佳反应pH值有所升高,而米氏常数Km值有所增大,且具有良好的贮存稳定性和操作稳定性,表明磁性纳米氮化铝颗粒适合作为β-葡萄糖苷酶的固定化载体.
- 潘利华罗建平王贵娟徐学玲宛雯
- 关键词:磁性纳米颗粒氮化铝葡萄糖苷酶固定化戊二醛
- 稀土元素对怀槐悬浮培养细胞异黄酮合成及氧化还原态的影响被引量:15
- 2008年
- 在培养基中添加不同浓度的硝酸铈和硝酸镧,并检测怀槐细胞悬浮培养过程中异黄酮含量、苯丙氨酸裂解酶(PAL)酶活、还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽含量的变化,以探讨稀土元素对怀槐细胞合成异黄酮的影响和机制.结果表明,20mmolL-1硝酸铈和10mmolL-1硝酸镧较适合诱导怀槐悬浮培养细胞合成异黄酮;细胞培养过程中,硝酸铈和硝酸镧诱导异黄酮合成的变化趋势与PAL酶的活性变化一致;氧化还原态变化分析发现,硝酸铈和硝酸镧处理的细胞中GSH/GSSG比例分别在d3和d2达到最大值,是同期对照的1.46和1.47倍,而异黄酮含量则在d4和d3达到最大值,分别达到了271.42μgg-1(DW)和279.32μgg-1(DW).研究结果显示,怀槐细胞悬浮培养中添加稀土元素提高次生代谢产物异黄酮的合成可能与稀土元素诱导细胞氧化还原态的改变有关.
- 罗建平曹磊潘利华查学强
- 关键词:稀土元素铈镧异黄酮氧化还原态
- 交联β-葡萄糖苷酶聚集体的制备及其性质被引量:12
- 2007年
- 交联酶聚集体法是一种新型的无载体酶固定化方法。本实验用该法固定化黑曲霉β-葡萄糖苷酶,对其制备条件、结构特征、酶学性质进行了研究。结果表明,β-葡萄糖苷酶酶液在冰水浴中经90%的硫酸铵沉淀30min后,以5%戊二醛水溶液进行酶聚集体交联反应,可获得较高活性的交联酶聚集体,酶活回收率达75%,对对-硝基苯基-β-D-葡萄糖苷作用的最适温度、最适pH值和Km值分别为60℃、pH4.0和4.61×10-3mol/L,与游离酶相比,表现更高的底物亲和力。将其用于大豆异黄酮活性苷元染料木素的合成,40min内对染料木苷转化率达到66%。
- 罗建平欧杰潘利华
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶交联酶聚集体大豆异黄酮
- 乳酸菌原位生物降解胡柚果汁中柠檬苦素的研究被引量:6
- 2008年
- 探讨了乳酸菌对常山胡柚果汁柠檬苦素的降解性能并对其降解条件进行了优化。结果表明,被试的乳酸菌中有5株能够以胡柚果汁为唯一生长基质进行细胞生长并转化柠檬苦素,其中1株对柠檬苦素的降解率大于50%。该菌株降解柠檬苦素的最适条件为:温度37℃、果汁原始pH值、250mL三角瓶装150mL果汁、静置培养,此时对柠檬苦素的降解率为66.7%。胡柚果汁经乳酸菌处理后柠檬苦素和柚皮苷含量大幅度降低,固形物和糖度稍有增加,但是pH值和可滴定酸度变化不大。
- 罗水忠罗建平潘利华姜绍通
- 关键词:胡柚柠檬苦素生物降解乳酸菌
- 异黄酮代谢动力学研究被引量:3
- 2006年
- 大豆异黄酮是大豆生长中形成的一类次生代谢产物,是大豆中主要的多酚化合物。异黄酮主要来源于豆类食物,已证实具有预防退行性疾病,例如癌症、心血管疾病、糖尿病、高脂血症等。为了深入探讨异黄酮的生物学效应与生物代谢之间的关系,我们利用动物实验进行了小鼠血液中异黄酮的峰值浓度(Cmax)、峰值时间(Tmax)、曲线下面积(AUC)、消除半衰期(t1/2)以及粪便排泄量等代谢动力学参数的测算。本实验用甲醇溶解异黄酮和紫外分光光度计测定取得了较好效果;小鼠灌胃(i.g.)10mg/kgbw和20mg/kgbw两种剂量,结果显示低剂量组的血液含量0.65μg/ml;高剂量组的血液含量为0.75μg/ml,但是出现了首过消除现象;两组的消除半衰期差异不大;24h小鼠的粪便排泄量为总摄入量的19.87%,小于吸收排泄量11%,因此可得异黄酮的排泄主要是经过尿液排泄,经肝肠循环为次要排泄途径。
- 范远景伍玉菡李鑫罗建平
- 关键词:大豆异黄酮排泄代谢动力学
- 高活性大豆异黄酮糖苷酶的分离原料筛选、纯化及性质研究被引量:2
- 2009年
- 通过对32种植物β-葡萄糖苷酶水解染料木苷的活性比较,发现鹰嘴豆β-葡萄糖苷酶具有4.19U/mg的大豆异黄酮糖苷水解酶活性。该酶经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Cellulose-52离子交换、Sephadex G-100凝胶层析纯化,纯化了10.1倍,收率为7.2%;SDS-PAGE和Sephadex G-100凝胶层析结果表明,该酶的分子量为73.2kD,含两个亚基;该酶的最适反应温度为45℃;最适pH6.0;当以染料木苷和大豆苷为底物时该酶的米氏常数分别为11.0和19.0μg/ml。温度在30~45℃、pH值在4.5~6.5范围内该酶较稳定:Ag^+、Hg^(2+)和D-葡萄糖酸内酯对该酶有强烈抑制作用。该酶能水解染料木苷和大豆苷,但不能水解纤维二糖和α-乳糖。
- 潘利华罗建平罗水忠徐学玲王贵娟
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶鹰嘴豆酶学性质
- 海藻酸钠固定化β-葡萄糖苷酶的制备及其性质研究被引量:9
- 2007年
- 在活性炭、明胶等8种固定化载体筛选的基础上研究了以海藻酸钠为载体,戊二醛为交联剂固定化β-葡萄糖苷酶的条件,并对固定化酶的酶学性质及其在催化制备大豆异黄酮活性苷元染料木素中的应用进行了研究。β-葡萄糖苷酶在0.20%戊二醛溶液中交联2 h后再与20 g/L海藻酸钠混合,然后逐滴加到4 g/LCaCl2溶液中,固化1 h后过滤、洗涤得固定化β-葡萄糖苷酶,固定化酶的酶活回收率为83.67%。固定化酶的最适温度、热稳定性、pH值稳定性以及与底物的亲和力都有所提高,最适pH值基本不变。该固定化酶重复使用6次后其活力仍保持90.94%,染料木苷转化率达60.02%。
- 潘利华罗建平查学强王贵娟李想
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶海藻酸钠固定化酶染料木素
- 大豆功能因子对心血管疾病作用的研究进展被引量:5
- 2005年
- 大豆是油脂和植物蛋白的重要来源,又含有大豆异黄酮、大豆皂甙等多种功能因子。本文就大豆中天然生物活性物质对心血管疾病作用的研究进行了综述。
- 潘利华罗建平
- 关键词:大豆功能食品心血管疾病
- β-葡萄糖苷酶的研究及应用进展被引量:113
- 2006年
- β-葡萄糖苷酶是一种能够水解结合于末端非还原性的β-D-葡萄糖苷键的水解酶,在纤维素降解、食品风味的改善等领域具有重要的应用价值。本文概述了β-葡萄糖苷酶的生物化学特性、分子生物学、固定化及应用进展。
- 潘利华罗建平
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶固定化酶纤维素降解食品风味
- 同步辐射对黑曲霉β-葡萄糖苷酶产生条件及酶学性质的影响被引量:3
- 2008年
- 本实验对出发菌黑曲霉M85和经软X射线Nk同步辐射所得突变株(产β-葡萄糖苷酶)的营养条件、培养条件和产酶动力学进行了比较,并研究了两菌株β-葡萄糖苷酶的酶学性质。实验结果表明,与出发菌相比,突变株在营养需求、培养条件、产酶动力学和产物的酶学性质都有所改变。突变株的氮源谱更宽,对KH2PO4的需求从0.2%降为0.1%;培养条件实验表明突变株需氧量增加;突变株发酵周期缩短了16h,产酶能力提高了约80%;突变株β-葡萄糖苷酶的最适反应温度从60℃降为50℃,最适反应pH由4升为5。
- 潘利华罗建平罗水忠
- 关键词:黑曲霉Β-葡萄糖苷酶软X射线酶学性质