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甘肃省自然科学基金(1107RJZA106)

作品数：7 被引量：6H指数：2
相关作者：惠玲吕同德闫蔚王晓辉杨霄鹏更多>>
相关机构：兰州军区兰州总医院青海大学更多>>
发文基金：甘肃省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 3篇蛋白
  • 3篇整合素
  • 3篇细胞
  • 2篇人脐
  • 2篇人脐带
  • 2篇人脐带间充质...
  • 2篇逆转
  • 2篇逆转录
  • 2篇逆转录病毒
  • 2篇脐带间充质干...
  • 2篇转录
  • 2篇结合蛋白
  • 2篇结合蛋白1
  • 2篇基因
  • 2篇间充质干细胞
  • 2篇胶质
  • 2篇胶质瘤
  • 2篇干细胞
  • 2篇钙
  • 2篇充质干细胞

机构

  • 7篇兰州军区兰州...
  • 3篇青海大学

作者

  • 6篇惠玲
  • 3篇杨霄鹏
  • 3篇王晓辉
  • 3篇吕同德
  • 3篇闫蔚
  • 2篇马明仁
  • 2篇杨雯
  • 1篇王宏宾
  • 1篇哈小琴
  • 1篇付学锋
  • 1篇刘晓花
  • 1篇王剑峰
  • 1篇王君
  • 1篇张国华
  • 1篇唐瑜
  • 1篇万东君
  • 1篇王剑锋
  • 1篇王美亮
  • 1篇谭大勇
  • 1篇牛海峰

传媒

  • 5篇解放军医药杂...
  • 1篇细胞与分子免...
  • 1篇现代生物医学...

年份

  • 1篇2017
  • 3篇2014
  • 2篇2013
  • 1篇2011
共 7 条 记 录，以下是 1-7
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排序方式：
鬼臼毒素衍生物Lg-2对人肝癌细胞系HepG-2凋亡的诱导作用
2013年
目的研究N-(1-烃氧基-2,2,6,6-四甲基-4-哌啶基氧羰基)-L丙氨酸-4'-去甲-4-脱氧鬼臼酯(Lg-2)对人肝癌细胞系HepG-2的诱导凋亡作用及机制。方法分别设阴性对照组(只加HepG-2细胞)、VP-16处理组及Lg-2处理组3组,采用MTT法检测Lg-2对HepG-2细胞生长的影响,流式细胞术检测Lg-2对HepG-2细胞周期和凋亡的影响,荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)技术检测Lg-2对HepG-2细胞凋亡相关基因p53、Bax、Bc1-2、p21、Caspase 3表达的影响;设阴性对照组及Lg-2处理组2组,Hoechs33258染色检测Lg-2对HepG-2细胞形态学的影响。结果 MTT法证实Lg-2对HepG-2细胞增殖有明显的抑制作用,药物处理48 h,随药物浓度增加(同一时间时)抑制效应增强,Lg-2处理组各浓度HepG-2抑制率均高于VP-16处理组(P<0.05)。随药物作用时间的延长(同一浓度时)抑制效应增强,Lg-2处理组各作用时间HepG-2抑制率均高于VP-16处理组(P<0.05)。流式细胞术显示,Lg-2作用于HepG-2细胞24和48 h时,Lg-2处理组S期细胞比例与阴性对照组及VP-16处理组比较均明显增高,而G2/M期细胞显著减少。qRT-PCR检测细胞凋亡相关基因,结果表明Lg-2处理组与VP-16处理组相比Bc1-2 mRNA的表达显著降低(P<0.05),而p53、Bax、p21、Caspase3 mRNA的表达显著增高(P<0.05)。Hoechst33258染色显示Lg-2处理组细胞核固缩、碎裂,呈凋亡样改变。结论 Lg-2可抑制肝癌细胞增殖,使细胞阻滞在G2/M期,该过程可能与其上调p53、bax、p21、caspase3表达和下调bc1-2基因的表达有关。
牛海峰景鸿恩惠玲闫蔚王君王宏宾王晓临周通张国华谭大勇
关键词：鬼臼毒素衍生物依托泊甙HEPG-2
人脐带间充质干细胞向血管内皮细胞的定向分化及临床应用进展被引量：3
2013年
间充质干细胞是1974年被科学家Friedenstein等[1]。首次从骨髓细胞中分离并鉴定的新型干细胞，主要存在于中胚层，是一种具有自我复制能力的多潜能细胞。这种细胞普遍存在于动物骨膜、松质骨及脂肪组织中[2]，且在一定条件下可以诱导分化为软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、神经细胞及支持造血的基质等。其弱的免疫原性在很大程度上降低了移植物抗宿主病的发生概率，使其成为细胞组织工程与细胞水平疾病治疗的一个重要来源。特别是近年随着干细胞治疗越来越广泛地应用于临床研究与治疗，
杨雯惠玲吕同德
关键词：间充质干细胞脐带内皮细胞
钙整合素结合蛋白1慢病毒干扰载体的构建及表达
2014年
目的构建人钙整合素结合蛋白1(calcium-and integrin-binding protein 1,CIB1)基因RNA干扰慢病毒载体,获得稳定下调CIB1表达的慢病毒。方法根据CIB1的序列,设计siRNA序列,克隆入慢病毒核心质粒pGV112中,并与辅助质粒一起转染293T细胞进行病毒包装,用慢病毒感染293T细胞并测定病毒滴度。以CIB1干扰慢病毒感染人胶质瘤细胞SHG44后,应用Western blotting方法检测CIB1的表达。结果成功构建CIB1干扰慢病毒载体,包装后获得慢病毒颗粒,病毒滴度检测可达6×108pfu/ml,感染细胞CIB1蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。结论成功构建人CIB1基因RNA干扰慢病毒,为后续CIB1生物学功能研究奠定基础。
惠玲李晓云王晓辉王美亮杨霄鹏马明仁桑春艳王剑锋
关键词：慢病毒胶质瘤RNA干扰
人脐带间充质干细胞的成脂诱导分化及其相关基因鉴定被引量：2
2014年
目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的分离提取、体外诱导分化为脂肪细胞的能力及其相关基因的表达情况。方法:取新生儿脐带经组织培养法提取后分离培养于αMEM完全培养基中,经大量纯化与扩增后,采用倒置显微镜观察其形态与细微结构;流式技术检测其细胞周期及表面标志;以含有成脂诱导剂的αMEM培养基对P3的hUC-MSCs进行培养,诱导其向脂肪细胞方向分化,对其对诱导后的细胞进行检测。应用油红"O"染色对其进行定性鉴定;应用实时定量RT-PCR对LPL、Leptin的基因含量进行测定。结果:经过组织培养法后,细胞呈贴壁生长,细胞呈梭性或旋涡状,形态不规则,多数有凸起,细胞核较大,核仁明显;第7代以前的细胞具有较强的生长活性;流式技术检测发现此类细胞高表达CD44、CD73和CD105等细胞表面标记,而几乎不表达CD34、CD45、CD31和HLA-DR。培养至第3代的细胞约72.724%的细胞处G1期、S期的细胞仅占18.069%,第7代时G1期细胞约为83.875%、S期为9.606%左右;经成脂诱导剂诱导分化后,细胞经油红"O"染色,分化为脂肪细胞的细胞着色并呈红色,实时定量RT-PCR结果显示该部分细胞表达脂肪细胞的标志性基因LPL和Leptin。结论:P7以前的hUC-MSCs具有较强的生长分化能力,可以向脂肪细胞进行分化并表达一定量的特定标志性基因。
杨雯惠玲吕同德闫蔚王鲲
关键词：人脐带间充质干细胞体外诱导脂肪细胞基因鉴定
携带LMO3基因逆转录病毒载体的构建及其在NIH/3T3细胞中的表达
2014年
目的构建单纯LIM蛋白3(LMO3)的逆转录表达载体,并观察其在NIH/3T3细胞中的表达情况。方法重组载体pLXSN-LMO3经酶切及测序鉴定后,脂质体法转染到pA317包装细胞,G418筛选稳定的病毒产生细胞株。重组逆转录病毒体外感染NIH/3T3,并对其进行病毒滴度检测,NIH/3T3细胞分为3组:以pLXSN-LMO3转染为实验组,以pLXSN转染为阴性对照组,正常细胞为空白对照组。采用免疫荧光组化染色和蛋白印迹(Western blot)法鉴定NIH/3T3细胞中LMO3的表达。结果重组逆转录病毒载体pLXSN-LMO3经酶切及测序鉴定构建正确,其病毒滴度平均可达4.04×106cfu/ml,各组NIH/3T3细胞免疫荧光组化染色及Western blot检测均有LMO3蛋白表达,其中实验组高表达LMO3,与阴性对照组、空白对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了携带LMO3基因逆转录病毒载体,并能在NIH/3T3细胞中高表达LMO3蛋白,为下一步开展基因治疗奠定了基础。
罗芸张新宇万东君刘晓花付学锋
关键词：NIH3T3细胞LIM
CIB1下调表达对U87胶质瘤细胞增殖和细胞周期的影响
2017年
目的探讨钙整合素结合蛋白1(CIB1)下调表达对U87胶质瘤细胞增殖和周期调节的作用。方法体外培养U87胶质瘤细胞,通过感染携带si CIB的p GV-si CIB1慢病毒获得CIB1下调表达的U87胶质瘤细胞,将细胞分为p GV-si CIB感染组、对照慢病毒感染组和对照组,采用甲基噻唑基四唑检测细胞增殖情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡和细胞周期的改变,定量反转录聚合酶链反应、蛋白免疫印迹法检测U87胶质瘤细胞相关基因和蛋白表达情况。结果p GV-si CIB1感染U87细胞的最适感染复数值为5。si CIB1感染组CIB1 mRNA和蛋白表达低于对照慢病毒感染组和对照组(P<0.05)。p GV-si CIB1感染组FOXO1、MDM2 mRNA及Cyclin D1、Bcl-2 mRNA和蛋白、p-AKT蛋白表达水平低于对照慢病毒感染组,而Bax、p53、Caspase3 mRNA和蛋白表达水平高于对照慢病毒感染组(P<0.05,P<0.01)。p GV-si CIB1感染组U87胶质瘤细胞抑制率、凋亡率与对照慢病毒感染组相比显著增加,与对照组和对照慢病毒感染组相比,G0/G1期细胞增加,S期细胞减少(P<0.05)。结论 CIB1下调表达抑制胶质母细胞瘤的生长,促进细胞凋亡。AKT信号通路可能是CIB1发挥作用的途径之一,提示CIB1有可能作为胶质瘤靶向治疗的靶点。
惠玲闫蔚张富婷王晓辉杨霄鹏马明仁贾庆华唐瑜马俊
关键词：神经胶质瘤细胞增殖细胞周期
携带钙整合素结合蛋白基因逆转录病毒表达载体的构建及包装细胞系的建立被引量：1
2011年
目的:构建钙整合素结合蛋白(CIB)的逆转录病毒表达载体,并建立包装细胞系。方法:质粒pet32-CIB经EcoRI和XhoI双酶切后亚克隆至逆转录病毒载体pLXSN,构建重组逆转录病毒表达载体pLXSN-CIB,PCR及双酶切鉴定后,通过脂质体转染导入包装细胞pA317,G418稳定筛选后获得抗性克隆,NIH3T3细胞进行逆转录病毒颗粒滴度测定。结果:重组逆转录病毒表达载体pLXSN-CIB质粒测序结果与GenBank中序列一致,经PCR及酶切鉴定证实,获得了大约574bp的基因片段,且正确插入pLXSN-CIB载体中;建立了pA317-CIB包装细胞系,采用NIH3T3细胞测定病毒滴度为6.81×105CFU/mL。结论:pLXSN-CIB结构正确,成功构建了CIB基因的逆转录病毒表达载体并建立了pLXSN-CIB包装细胞系。
王晓辉惠玲吕同德哈小琴王剑峰张军莉杨霄鹏
关键词：CIB逆转录病毒载体PLXSN
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