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河北省卫生厅资助项目(08054)
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
相关作者:
马翠卿
宋小天
刘海楠
范秀华
张玲
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相关机构:
河北医科大学
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发文基金:
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作者
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马翠卿
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郭奕阳
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A族链球菌表面蛋白FbaA单克隆抗体FbaAmAb2的免疫功能研究
被引量:2
2012年
目的通过侵袭抑制及攻毒试验检测A族链球菌表面蛋白FbaA的单克隆抗体FbaAmAb2的免疫功能,为进一步探索A族链球菌的致病机制和感染后的治疗策略奠定基础。方法通过亚克隆、全菌ELISA方法筛选稳定分泌高效价FbaAmAb2的杂交瘤细胞,并将其接种于小鼠腹腔制备腹水。通过侵袭试验对FbaAmAb2能否阻止H因子与A族链球菌的结合进行研究。而后将获得的腹水倍比稀释为1:1、1:2、1:4、1:8、1:16行试管凝集试验,选定合适的稀释度被动免疫动物后用致死量A族链球菌(FbaA’)标准菌株(7.5×10’个)攻击,连续观察15d计算保护率。结果侵袭试验中FbaAmAb2能够竞争性抑制H因子与A族链球菌表面蛋白FbaA的结合,减少了H因子介导的A族链球菌侵入上皮细胞的数量。与全菌结合的ELISA效价为1:1600,试管凝集效价为1:8。在单抗被动免疫试验中,腹水原液、1:2稀释组的动物保护率高达66.67%,1:4稀释组保护率为50%,经SPSSl0.0统计软件分析各实验组与PBS组保护率差异有统计学意义(P〈0.05)。结论FbaAmAb2有望用于紧急预防及治疗A族链球菌感染,并为深入研究A族链球菌的致病机制、治疗策略及疫苗预防方面提供新的靶标。
范秀华
刘海楠
郑艳
张玲
姚智燕
李文建
邢艳超
宋小天
马翠卿
关键词:
A族链球菌
单克隆抗体
补体调节蛋白
H因子
A族链球菌(GAS)Fba蛋白单克隆抗体对应表位核心氨基酸的确定
被引量:1
2009年
目的:对A族链球菌Fba蛋白McAb2所对应的表位进行定位。方法:以初步定位的表位区段为线索合成三段重叠多肽,dot-ELISA检测McAb2与合成肽的亲合力,并以McAb2为靶分子,利用噬菌体随机七肽库进行亲和筛选,用竞争ELISA鉴定阳性克隆。结果:dot-ELISA检测结果表明Fba100-112肽段与McAb2的结合能力最强。经过3轮亲和筛选后,随机挑选20个噬菌体克隆,竞争ELISA对其与McAb2的亲和力做检测,其中12个克隆显示较强的阳性结果。阳性克隆DNA测序,与Fba基因第100位氨基酸至110位氨基酸中ITPDL同源性较高。结论:通过dot-ELISA将A族链球菌Fba蛋白McAb2对应的表位定位于100~112位氨基酸,结果同噬菌体随机肽库筛选的核心氨基酸位置吻合。为进一步研制表位肽疫苗、研究Fba蛋白及其单克隆抗体的生物学功能奠定了基础。
郭奕阳
马翠卿
魏澎
王秀荣
冯惠东
阎婉依
魏林
关键词:
A族链球菌
单克隆抗体
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噬菌体肽库
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