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国家自然科学基金(C160901)
国家自然科学基金(C160901)
作品数:
1
被引量:10
H指数:1
相关作者:
王永林
李思蒙
田呈明
黄冬辉
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相关机构:
北京林业大学
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发文基金:
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作者
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黄冬辉
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田呈明
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王永林
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林业科学
年份
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2013
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杨树炭疽病菌原生质体遗传转化的建立及绿色荧光蛋白的表达
被引量:10
2013年
以杨树炭疽病菌菌株C1-5-2作为受体,通过PEG介导的原生质体转化法,将含有潮霉素B(hph)和GFP表达基因的质粒gGFP转入杨树炭疽病菌菌丝的原生质体中。幼嫩菌丝在0.7mol·L-1NaCl溶解的1% Lysing enzyme酶解液的作用下酶解210min可以得到108·mL-1的原生质体;在PEG介导下,通过含有潮霉素浓度为300μg·mL-1的PDA选择培养基筛选转化子,每微克DNA获得41个转化子的平均转化效率。对转化子进行PCR鉴定表明:hph基因和GFP基因已经整合到杨树炭疽病菌转化子基因组中,通过荧光显微镜观察到转化子可以发出清晰的绿色荧光,且转化子的潮霉素抗性和GFP表达性状可以稳定遗传。
李思蒙
王永林
黄冬辉
田呈明
关键词:
杨树
炭疽菌
原生质体
绿色荧光蛋白
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