国家科技重大专项(2012ZX09301-002-001-022)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：陈淑珍刘旭杰商悦朱大强更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 表没食子儿茶素没食子酸酯与西妥昔单抗联用体内外抗食管癌细胞Eca-109的作用研究被引量：5
- 2015年
- 目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与西妥昔单抗联用体内外抗食管癌Eca-109的作用。方法采用MTT法检测化合物对肿瘤细胞增殖的影响;采用克隆形成法检测EGCG对肿瘤细胞克隆形成的影响;采用流式细胞术检测化合物对肿瘤细胞凋亡的影响;采用动物实验评价药物或EGCG对移植于裸鼠的移植瘤的生长抑制作用;同时采用免疫组化的方法检测药物或EGCG对血管形成的影响。结果 EGCG能够剂量依赖性地抑制Eca-109细胞增殖,其IC50值为43.22μmol/L。经克隆形成法检测结果表明,EGCG能够明显抑制Eca-109细胞的克隆形成,IC50值为28.49μmol/L。EGCG能够显著引起Eca-109细胞凋亡,60和80μmol/L EGCG诱导的凋亡百分率分别为(21.70±0.62)%、(57.13±9.09)%。EGCG和西妥昔单抗联用对Eca-109细胞的增殖抑制作用较单独用药组强,具有相加作用。体内实验结果表明,EGCG和西妥昔单抗均能抑制Eca-109裸鼠移植瘤的生长,两者联用存在增强作用。EGCG和西妥昔单抗均能抑制裸鼠移植瘤的血管形成,两者联用血管形成抑制作用较单用组更强。结论 EGCG能够抑制食管癌Eca-109的细胞增殖和克隆形成,具有诱导Eca-109细胞凋亡作用,与西妥昔单抗联用在体内外均具有增强作用。
- 商悦刘旭杰陈淑珍
- 关键词：西妥昔单抗
- TRAIL和EGFR配体寡肽与力达霉素辅基蛋白融合蛋白制备过程的优化
- 2014年
- 目的对以包涵体形式表达的TRAIL和EGFR配体寡肽与力达霉素辅基蛋白融合蛋白Ec-LDP-TRAIL的制备过程进行优化。方法对大肠杆菌原核表达Ec-LDP-TRAIL目的蛋白的温度、诱导物浓度、起始菌体密度及时间等条件进行优化;在Ni2+亲和层析纯化蛋白过程中对样品预处理以及纯化缓冲液成分进行优化;对纯化后蛋白的分步透析复性过程进行一系列优化,并通过基于ELISA的结合活性实验分析Ec-LDP-TRAIL与肿瘤细胞的结合能力。结果经过工艺优化后,纯化后的融合蛋白Ec-LDP-TRAIL纯度达95%以上,复性后LB培养基活性蛋白收率约为2.2 mg/L,与初始复性条件相比提高近2倍。复性后融合蛋白Ec-LDP-TRAIL显示出能够与人表皮癌A431和人大细胞肺癌H460细胞的结合活性。结论融合蛋白Ec-LDP-TRAIL制备过程的优化为后续研发和生产奠定了实验基础,同时也为其他以包涵体形式表达的基于TRAIL的抗肿瘤蛋白药物的制备提供借鉴。
- 朱大强陈淑珍
- 关键词：包涵体重组融合蛋白质类蛋白质复性
