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p53 and NFκB regulate microRNA-34c expression in porcine ovarian granulosa cells: 2016年; supported by the National Natural Science Foundation of China （31201771）;the earmarked fund for the China Agriculture Research System （CARS-36）; XU YuanZHANG Ai-lingXIAO GuangZHANG ZheCHEN Zan-mouZHANG HaoLI Jia-qi

H3K4me3影响母猪卵巢颗粒细胞功能的初探: 卵泡是卵巢的基本结构和功能单位,其主要功能是排卵和分泌激素。卵泡内颗粒细胞的过度凋亡会诱导卵泡闭锁,降低雌性动物发情频率,从而影响雌性动物生产力。组蛋白H3第4位上的赖氨酸的三甲基化（Tri-methylation of...; 何颖婷; 关键词：母猪卵巢; 文献传递

以专题讨论方式开展生命科学概论的遗传学教学被引量：4: 2015年; 生命科学领域涵盖广泛,生命科学概论的教学内容繁多,而遗传学是生命科学的重要组成部分,在生命科学概论的遗传学教学过程中,教师可采用专题讨论的方式,激发学生的学习积极性,拓展知识面,成为传统讲授式教学的有益补充。本文就专题讨论教学在生命科学概论的遗传学教学中的应用、优点和存在问题等进行阐述。; 袁学文张爱玲; 关键词：生命科学概论遗传学教学模式

FAM213B基因启动子在猪子宫内膜细胞的转录调控: 2017年; 【目的】分析猪FAM213B基因启动子转录活性区域,并检测转录因子NFκB对启动子活性及猪FAM213B基因表达影响,为深入了解FAM213B基因的转录调控机制影响前列腺素合成、母猪妊娠等繁殖活动奠定基础。【方法】采集卵泡期子宫,分离子宫内膜上皮组织,经胶原酶方法获得猪原代子宫内膜细胞,用于猪FAM213B基因启动子活性检测。参照笔者所在课题组前期研究获得的猪FAM213B基因m RNA全序列(Gen Bank登录号:KX444503)以及5￠调控区序列(Gen Bank登录号:100134955),通过PCR扩增猪FAM213B基因较长启动子序列,并进行测序鉴定;在此基础上,PCR扩增带有Mlu I和Xho I限制性酶切位点的FAM213B基因启动子7个5'端缺失片段,并通过双荧光素酶报告基因载体系统构建猪FAM213B基因启动子7个不同的5'端缺失载体。将7个载体经无内毒素处理后与p RL-TK质粒用阳离子脂质体法一起转染猪子宫内膜细胞,用双荧光素酶报告基因系统进行Luciferase活性检测,比较各启动子片段转录活性。生物信息学分析FAM213B基因启动子潜在转录因子结合位点,通过Ch IP试验验证FAM213B基因启动子与潜在转录因子NFκB的相互作用。构建NFκB1和Rel A的超表达载体,化学合成NFκB1和Rel A的干扰si RNA片段,分别转染猪子宫内膜细胞,通过双荧光素酶报告基因系统进行Luciferase活性检测和荧光定量PCR分别检测超表达和干扰表达NFκB1和Rel A对猪FAM213B基因启动子活性和m RNA表达影响。【结果】PCR和测序获得猪FAM213B基因启动子长度为2 261bp(-2178/+83)。生物信息学预测结果表明猪FAM213B基因启动子区存在潜在的CREB、CCAAT增强子结合蛋白、E-box因子的结合位点,炎性因子NFκB潜在结合位点分别位于-1143/-1132和-664/-655区间。启动子报告基因活性检测结果表明:重组载体P2(-1352/+30)荧光活性最高,极显著高于P1(-1 760/+30)(P<0.01),在-1 760/-1 352区域存在负调控元件;而; 张爱玲张爱玲卢孝璋吴琦李加琪李加琪; 关键词：启动子 NFΚB 子宫内膜细胞

母猪卵巢颗粒细胞的分离培养及鉴定被引量：12: 2014年; 颗粒细胞是卵巢卵泡重要的结构组分,其形态、功能伴随原始卵泡的生长启动、增殖、分化、闭锁、排卵以及黄体形成等生理过程发生各种变化。颗粒细胞是研究细胞增殖、分化和细胞相互作用、信号转导通路的理想细胞模型。利用注射器吸取有腔卵泡卵泡液,成功分离培养了猪有腔卵泡的颗粒细胞,并进行了FSHR免疫荧光检测以及原代猪卵巢颗粒细胞生长活力检测,结果表明:该细胞对FSHR的免疫荧光呈阳性。流式细胞仪检测发现该细胞的细胞周期为24 h,但在培养4 d时细胞的活力最强。该研究结果为进一步研究母猪卵巢卵泡功能奠定了基础。; 高萍钟玉宜张爱玲; 关键词：细胞培养免疫荧光细胞周期细胞活力

“专题讨论”在师范生遗传学教学中的应用: 遗传学是高校生物师范本科专业教育的重要组成部分,随着生命科学的快速发展,教师和学生需要从多个渠道获得更新的遗传学知识。遗传学是中学生物教学的重要内容,遗传学教学也影响着师范生的师范素养和技能培养。"专题讨论"教学方法以专...; 张爱玲涂红艳李亮太袁学文; 关键词：遗传学师范教学; 文献传递

猪FAM213B基因mRNA和启动子的克隆及序列分析被引量：1: 2017年; 【目的】获得猪FAM213B基因完整mRNA和启动子序列,研究猪FAM213B基因表达,为探讨母猪妊娠的建立和胚胎发育调控机制奠定基础。【方法】通过5'RACE和3'RACE技术,获得基因完整mRNA序列,分析不同物种该基因氨基酸序列相似性;通过PCR克隆启动子区,并通过双荧光素酶报告基因载体系统转染猪子宫内膜细胞,研究其转录活性。【结果】猪FAM213B基因mRNA全长808 bp,其中5'UTR、CDS区和3'UTR长度分别为67、609(含终止密码子)和132 bp(不含poly A序列),在17~106位氨基酸之间存在硫氧还蛋白折叠结构域;与猪FAM213B基因其他2个潜在转录本相比,三者都包含硫氧还蛋白折叠结构域,但蛋白三级结构存在较大差异;猪FAM213B氨基酸序列与山羊、牛和绵羊高度相似,相似性分别为94.03%、93.03%和91.54%。克隆获得2 261 bp(-2 231/+30)的基因启动子序列,将其连接至双荧光素酶报告基因载体,转染猪子宫内膜细胞,发现获得的启动子片段能够启动下游报告基因的转录,在启动子区存在潜在的典型NFκB等转录因子结合位点。【结论】本研究获得猪FAM213B基因转录本长度为808 bp,其蛋白存在硫氧还蛋白折叠功能结构域,其启动子序列(-2 231/+30)在猪子宫内膜细胞中具有较强的转录活性。; 张爱玲孙显月卢孝璋李加琪张豪; 关键词：转录启动子子宫内膜细胞硫氧还蛋白

MicroRNA-34c regulates porcine granulosa cell function by targeting forkhead box O3a被引量：3: 2017年; Granulosa cells（GCs） are somatic cells of ovary, the behaviors of GCs are important for ovarian function. MicroRNAs（miRNAs） are a class of endogenous 18–24 nucleotide（nt） non-coding RNAs, some of which have been shown to be important regulators of GCs function. miR-34c involved in the regulation of various biological processes and was identified to be a pro-apoptotic and anti-proliferative factor in many cell types. However, the roles of miR-34c in GCs function remain unknown. In this study, we used Annexin V-FITC and Ed U assays to demonstrate that miR-34c exerted pro-apoptotic and anti-proliferative effects in porcine GCs. Dual-luciferase reporter assays, quantitative real-time PCR（q RT-PCR） and Western blotting identified Forkhead box O3a（Fox O3a） as a direct target gene of miR-34c. The overexpression of FoxO3a rescued the phenotypic change caused by miR-34c in porcine GCs. In conclusion, miR-34c regulate the function of porcine GCs by targeting FoxO3a.; XU YuanZHANG Ai-lingZHANG ZheYUAN Xiao-longCHEN Zan-mouZHANG HaoLI Jia-qi

猪抗酶1基因核心启动子区鉴定及单倍型转录活性比较: 2016年; 通过双荧光素酶报告基因载体系统检测猪抗酶1(AZ1)基因启动子转录活性,分析蓝塘和长白猪群体AZ1基因启动子SNP及单倍型,在此基础上比较不同单倍型转录活性。结果表明:-453/+79为核心启动子区;在2个群体中检测到AZ1基因启动子8个SNPs,分别为-713 T>C、-584 A>C、-476 G>A、-365 T>C、-348 C>T、-294 G>C、-288 T>G和-234 T>C,蓝塘猪群体具有更丰富的单核苷酸多态性,而长白猪群体仅在-288座位存在GG和GT 2种基因型,其他7个SNPs均为纯合状态;蓝塘猪群体LTH1单倍型(TAGCCGTC,-713/-234)频率为0.526,为蓝塘猪优势单倍型,其次为LTH2(TAGCCGTT),频率为0.166;长白猪群体优势单倍型为Landrace-H(TAGTCGGT),频率为0.939。LTH1转录活性高于LTH2和Landrace-H,推测-234 T>C、-365 T>C和-288 T>G座位是造成不同单倍型转录活性差异的原因。; 张爱玲孙显月张哲李加琪张豪; 关键词：启动子 SNP 单倍型

猪羰基还原酶1(CBR1)基因克隆及组织表达谱分析被引量：2: 2016年; 为了深入研究猪羰基还原酶1(CBR1)基因的表达调控,通过PCR获得包括猪CBR1基因启动子和外显子、内含子的序列,并进行蛋白结构分析和系统进化关系比较,通过RT-PCR方法检测了CBR1基因在不同组织的表达丰度。结果表明,猪CBR1基因启动子区长度为2 875 bp,具有潜在典型的NFκB等转录因子结合位点;CBR1基因由3个外显子和2个内含子组成,外显子长度分别为289、108和437 bp,其中5′UTR和3′UTR分别为107 bp和242 bp,内含子长度分别为572 bp和3 219 bp,编码区由289个氨基酸组成;该蛋白为亲水性蛋白,无明显的信号肽,有2个跨膜区域;蛋白二级结构和三级结构主要由7个α-螺旋、7个β-折叠以及loop环构成。猪CBR1基因氨基酸序列与人、绵羊氨基酸的相似性较高,为84.48%。q RT-PCR结果表明,怀孕12 d的二花脸子宫内膜中CBR1基因m RNA的表达量极显著高于长大二元母猪;在怀孕12 d母猪9个组织中,CBR1在肾脏中的表达量最高,其次是肝脏和小肠。; 张爱玲孙显月尹琪李加琪张豪; 关键词：基因表达启动子

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国家自然科学基金(31201771)

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