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浙江省科技厅面上科研农业项目(2008C22026)

作品数:4 被引量:32H指数:3
相关作者:廖智王日昕武梅鲁涛刘梅更多>>
相关机构:浙江海洋学院华中科技大学更多>>
发文基金:浙江省科技厅面上科研农业项目舟山市科技局科技项目浙江省科技厅新苗人才计划更多>>
相关领域:生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 2篇农业科学

主题

  • 3篇贻贝
  • 3篇厚壳贻贝
  • 1篇蛋白
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达载体
  • 1篇黏附蛋白
  • 1篇抗菌肽
  • 1篇核表达
  • 1篇PCR
  • 1篇PEPTID...
  • 1篇CDNA
  • 1篇CDNA文库
  • 1篇COF
  • 1篇CONSTR...
  • 1篇EST
  • 1篇EST序列
  • 1篇EST序列分...
  • 1篇EXPRES...
  • 1篇M

机构

  • 4篇浙江海洋学院
  • 1篇华中科技大学

作者

  • 4篇廖智
  • 3篇武梅
  • 3篇鲁涛
  • 3篇王日昕
  • 2篇刘梅
  • 1篇李楠楠
  • 1篇王智平
  • 1篇范美华
  • 1篇叶茂
  • 1篇石戈
  • 1篇何光源

传媒

  • 1篇生物技术通报
  • 1篇水产学报
  • 1篇东北师大学报...
  • 1篇Agricu...

年份

  • 4篇2010
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
厚壳贻贝足腺cDNA文库的构建及部分EST序列分析被引量:4
2010年
为获得厚壳贻贝足腺组织的EST序列标签以及可能的功能基因序列,以pCMVsport6质粒为载体构建了高质量的厚壳贻贝足腺组织cDNA文库,文库滴度为1.31×107pfu/mL,重组率为98%,平均插入片段为1.3kb.通过对文库部分克隆的序列测定,获得了11个新基因和17个功能基因,其中包括部分与厚壳贻贝足丝相关的基因.厚壳贻足腺组织cD-NA文库的成功构建为将来筛选与厚壳贻贝足丝蛋白相关的新基因,系统研究其黏附机制奠定了基础.
鲁涛廖智刘梅武梅叶茂王日昕
关键词:厚壳贻贝CDNA文库EST
厚壳贻贝抗菌肽Mytilin的初步鉴定被引量:15
2010年
厚壳贻贝是我国具有重大经济价值的水产养殖贝类,对其抗菌肽的研究有助于人们了解厚壳贻贝的免疫机制。为了解厚壳贻贝血清中抗菌肽Mytilin的分子组成和特性,采用多维高效液相色谱对厚壳贻贝血清进行分离纯化,从中获得3种对革兰氏阳性菌以及阴性菌均有抑制作用的抗菌肽分子,序列分析表明3种抗菌肽具有较高的序列相似性,均属于贻贝抗菌肽Mytilin家族,分别命名为Mytilin-1,Mytilin-2和Mytilin-3。其中,Mytilin-1为34个氨基酸残基构成的多肽,其分子量为3885.17u,含8个半胱氨酸,形成4对二硫键。根据所测Mytilin-1的氨基酸序列设计特异性引物,通过菌落PCR方法筛选厚壳贻贝cDNA文库,获得Mytilin-1的cDNA基因并进行了序列分析。以上研究结果表明,作为贻贝的主要抗菌肽家族,Mytilin在厚壳贻贝血清中具有较高丰度,对其蛋白质序列以及基因序列的研究为深入了解厚壳贻贝Mytilin抗菌肽的分子多样性奠定了基础。
王日昕刘梅廖智鲁涛武梅何光源
关键词:厚壳贻贝抗菌肽CDNA
厚壳贻贝足丝盘黏附蛋白mcofp-3的重组真核表达被引量:3
2010年
厚壳贻贝(Mytilus coruscus)黏附蛋白分子mcofp-3(M.coruscusfoot protein-3)主要分布于贻贝足丝盘,贻贝在水环境下的黏附过程中起到关键作用,但因其难溶于水且在贻贝足丝盘中含量极低,故妨碍了对其进行深入研究。为建立厚壳贻贝足丝蛋白mcofp-3的真核表达体系,并获得足够的mcofp-3黏附蛋白进行后续研究,采用酵母表达体系对mcofp-3进行了重组表达。通过PCR方法克隆厚壳贻贝的mcofp-3基因,构建mcofp-3的酵母真核表达载体pVT102U/α/mcofp-3,鉴定结果表明,重组表达质粒pVT102U/α/mcofp-3由真核载体pVT102U/α和mcofp-3的成熟肽DNA片段组成,插入的mcofp-3成熟肽DNA片段与预期序列完全一致;采用LiAC转化法将重组表达质粒转化到S78酿酒酵母中,经过RT-PCR分析以及1.0%的琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明,重组的mcofp-3得到了成功的转录;发酵菌液经阳离子交换柱及高效液相色谱分离,以及Tris-Tricine-SDS-PAGE检测,结果表明,重组的厚壳贻贝黏附蛋白分子mcofp-3得到了成功表达,表达产物分子量约为6kD,与预期分子量一致。
李楠楠王智平鲁涛廖智
关键词:厚壳贻贝PCR真核表达载体
A Preliminary Analysis on the Construction and Expression of Eukaryotic Expression Vectors of Mytilin and Myticin from Mytilus coruscus被引量:10
2010年
[Objective] The aim was to study the construction and expression of eukaryotic expression vectors of antibacterial peptides (mytilin and myticin) from Mytilus coruscus.[Method] By the screening of antibacterial peptide genes of mytilin and myticin of Mytilus coruscus,five antibacterial peptide genes were selected.Then,the relative eukaryotic expressing vectors were constructed by the use of PCR technique and DNA recombinant technology.Subsequently,they were transferred in to S78 Saccharomyces cerevisia by using LiAC transformation method,and then preliminary expressing analysis was carried out.[Result] Five eukaryotic expressing vectors of antibacterial peptides from Mytilus coruscus were successfully constructed,and the results of mRNA detection revealed that the five antibacterial peptides from Mytilus coruscus were successfully transcribed.[Conclusion] The results provide a basis for using genetic engineering to express antibacterial peptides of mytilin and myticin from Mytilus coruscus,and for developing the further study of antibacterial peptides from Mytilus coruscus based on this.
武梅范美华廖智石戈王日昕
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