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脐橙CsACBPs基因家族在果皮褐变过程中的表达分析: 2013年; 脐橙(Citrus sinensis Osbeck)果皮褐变,不仅影响果实外观,更降低口感风味,削弱商品价值。酰基辅酶A结合蛋白(ACBP)是乙酰辅酶A(Acetyl-CoA)的跨膜转运载体,帮助乙酰辅酶A在体内完成三羧酸循环,对植物的生长发育起到关键作用。已有文献报道ACBP家族中的基因对植物胁迫有应答,并且在脐橙果皮褐变相关基因的cDNA抑制差减文库中该基因也有明显变化。为了明确柑橘果实褐变过程中该基因的作用,以"奉园72-1"脐橙果实为材料,取不同程度褐变的果皮,并从脐橙果皮褐变相关基因的cDNA抑制差减文库中筛选了与酰基辅酶A结合蛋白(ACBP)基因家族同源的EST序列CsACBP1/4/5/6进行分析。结果表明:随着柑橘果皮褐变程度的加重,CsACBP1/4/5/6基因表达上调,说明CsACBPs基因与脐橙果实褐变密切相关。; 杨阳唐宁李正国; 关键词：脐橙褐变基因表达

番茄SlSnRK2s基因表达在促进叶片衰老中的作用被引量：2: 2014年; SnRK2(sucrose non-fermenting 1一related protein kinase2)是脱落酸(ABA)信号转导途径中的正调控因子,广泛参与了植物的生长发育、病虫害防御、ABA和非生物胁迫等多种信号的应答反应。从番茄中分离了3个与SnRK2.2、SnRK2.3和SnRK2.6同源的基因,分别命名为SlSnRK2.2、SlSnRK2.3和SlSnRK2.6,同时构建了SlSlSnRK2.2/2.3/2.6 RNAi载体,并通过根癌农杆菌介导的叶盘法转化番茄,得到转基因番茄植株。初步表型分析结果发现转基因植株呈叶片早衰的现象。通过对乙烯信号相关基因的检测可知,转基因植株中除了ERF2表达量低于野生型,其余3个基因(ACO4、ERF1B、ERF1)的表达量均高于野生型,表明SlSnRK2.2、SlSnRK2.3和SlSnRK2.6与叶片衰老有关,可能参与ABA和乙烯信号互作,此结果对揭示植物衰老机理具有重要意义。; 杨阳唐宁李正国; 关键词：乙烯叶片衰老 RNAI

5个晚熟柑橘品种果实发育期品质变化研究被引量：13: 2014年; 本文对产自重庆的5个晚熟柑橘品种（W-默科特、奉节晓橙、鲍威尔、切斯勒特和班菲尔）果实发育成熟过程中不同时期的品质特征进行了测定.结果表明,在果实发育的中后期,可溶性固形物和可溶性糖含量呈上升趋势,但不同品种在各个发育阶段的增幅不同,果实完熟时含量较高的是W-默科特和奉节晚橙;晚熟柑橘果实中的有机酸以柠檬酸为主,占总酸含量的72.88％～87.11％,在果实发育后期,酸含量因品种不同呈先上升后下降或逐渐下降趋势;固酸比和Vc含量也随果实的成熟而逐渐增高.; 杨阳唐宁李正国黄涛江; 关键词：果实发育可溶性糖有机酸维生素C

番茄SlARF2基因表达模式及其在果实发育中的功能分析被引量：1: 2014年; 为了分析Sl ARF2基因在番茄生长发育过程中的功能,利用定量PCR技术分析Sl ARF2基因的表达模式,发现Sl ARF2基因在番茄花芽中表达量最高,在幼果中次之,说明Sl ARF2基因可能在番茄花果发育中起着重要作用。为进一步研究Sl ARF2的功能,构建Sl ARF2基因超表达、抑制表达载体,农杆菌介导转化番茄成功获得了相应转基因植株。通过与野生型番茄植株花、果不同时期的表型进行比对分析,发现Sl ARF2基因的超表达对花的形态学特征无明显影响,但能够显著提高植株的结实率、降低果实大小和重量。说明Sl ARF2基因参与调控番茄花、果发育过程。; 杨枭任振新林冬波先志强李正国; 关键词：番茄果实发育

玉米AFB2基因的克隆、表达及功能分析被引量：4: 2012年; 通过生物信息学分析从玉米基因组数据库中筛选出一条全长cDNA序列,命名为ZmAFB2(GenBank登录号为NM_001143136.1)。通过特异引物克隆该基因,ZmAFB2全长1 722 bp,编码574个氨基酸。N端含有F-box结构域,属于F-box基因家族,与水稻Os04g32460.1同源性很高,属于AFB2亚家族。qRT-PCR结果表明,该基因在玉米的根、茎和叶中均有表达,但在茎中的表达量最强。为进一步研究玉米ZmAFB2基因的功能,构建玉米ZmAFB2基因的超表达载体pCAMBIA-35S-AFB2,并通过农杆菌介导法对番茄进行遗传转化,共获得3个转基因株系,对转基因番茄表型进行鉴定,结果发现,叶片稍厚颜色暗绿,果实较小,无籽或少籽,房室发育不健全,因此,推测AFB2可能参与植物生长发育与调控,这为进一步阐明AFB2基因功能奠定基础。; 杨春文唐宁林东波李正国; 关键词：生长素受体克隆超表达 QRT-PCR

番茄SlmiR393基因超表达载体的构建及其靶基因鉴定被引量：2: 2013年; 为研究番茄(Lycopersicum esculentum)的SlmiR393基因功能,采用生物信息学方法从番茄基因组数据库中获得SlmiR393的前体序列及其潜在的靶基因。以基因组DNA为模板,克隆了番茄SlmiR393前体基因并整合到pLP35S-100植物表达载体;采用5′RACE RT-PCR技术验证SlmiR393对预测靶基因mRNA的剪切作用,采用定量PCR技术检测SlmiR393及其靶标基因在番茄不同组织的表达。结果表明,SlmiR393的前体序列含有完整的茎环结构;成熟miR393与3个生长素受体同源基因(SlTIR1、SlTIR1-like1和SlAFB)之间具有识别作用位点。SlmiR393可对番茄3个靶基因的转录本进行剪切降解;SlmiR393与3个不同靶基因(SlTIR1、SlTIR1-like1和SlAFB)的表达模式在叶和茎、花蕾、花中存在一定的互补关系。因此,推断番茄中的SlmiR393可能在特定的组织或发育时期介导特定的靶基因mRNA的剪切降解,初步证实生长素受体同源基因为SlmiR393的靶基因。此外,成功构建以CaMV 35S为启动子的植物表达载体pLP35S-pre-SlmiR393,为深入研究SlmiR393在番茄生长素信号转导中的功能奠定了基础。; 林冬波杨迎伍李正国; 关键词：番茄

番茄NAM基因的克隆与遗传转化被引量：4: 2012年; 为了研究番茄NAM基因的功能,利用RT-PCR技术从番茄cDNA中分离了NAM(GenBank登录号:FJ435163.1)基因,该基因ORF全长1 053 bp,共编码351个氨基酸,N端含有NAC结构域。定量RT-PCR分析结果表明,该基因在番茄的根、茎、叶、花和果实中均有较强表达。为了进一步研究番茄NAM基因的功能,构建了NAM基因的超表达载体pLP100-35S-NAM,通过农杆菌介导法转化番茄,并获得抗性植株。经表型分析,转基因番茄植株矮小,生长受到抑制,叶片形态异常,表明NAM基因影响番茄顶端分生组织(SAM)的形成和叶片形态的发生。; 杨春文唐宁李正国; 关键词：番茄 NAM 克隆

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国家教育部博士点基金(20110191110029)