湖南省教育厅重点项目(10A089)
- 作品数：6 被引量：57H指数：4
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- 水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞化疗药物敏感性的影响及诱导凋亡机制探讨被引量：18
- 2015年
- 目的:探讨液氮快速冻融法水蛭提取物(HE)对人肝癌Hep G2细胞的化疗药物敏感性影响及诱导凋亡的机制。方法:以5-氟尿嘧啶(5-FU)、阿霉素(ADM)为对照,MTT法检测HE与5-FU或AMD联合用药对人肝癌Hep G2细胞的增殖抑制作用,流式细胞术测定细胞凋亡;采用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)法、Western blot法检测Hep G2细胞经HE处理后多药耐药基(MDR1)、Bax、Caspase3基因的m RNA及蛋白表达变化。结果:HE可增强5-FU、ADM对Hep G2细胞的增殖抑制作用及诱导细胞凋亡(P<0.01);可显著下调Hep G2细胞MDR1(P<0.01)和上调Caspase3 m RNA及蛋白表达(P<0.01)。结论:HE可体外诱导Hep G2细胞凋亡,并提高Hep G2细胞对化疗药物5-FU的敏感性。其分子机制与下调MDR1表达,上调Caspase3表达有关。
- 黄晓蒂郭永良黄立中周青田雪飞
- 关键词：肝癌药物敏感性水蛭多药耐药基因
- 水蛭提取物对肝癌HepG2细胞DNA去甲基化作用研究被引量：15
- 2011年
- 目的探讨水蛭提取物对肝癌HepG2细胞DNA甲基转移酶(DNMTs)表达的抑制作用。方法采用MTT法检测水蛭提取物对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用,根据回归方程计算出半数抑制浓度(IC50)。以1/2 IC50含药量的水蛭提取物处理肝癌HepG2细胞,并以5-脱氧杂氮胞苷(5-Aza-cdR)处理作阳性对照,处理72 h时采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组化等方法检测肝癌HepG2细胞DNMT1、DNMT3a、DNMT13b mRNA及蛋白表达水平。结果肝癌HepG2细胞DNMT1呈高表达,DNMT3a、DNMT3b呈中低度表达。经水蛭提取物处理后肝癌HepG2细胞DNMT1、DNMT3a表达水平明显下降,DNMT3b基本不表达,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),与5-Aza-cdR组比较,水蛭提取物组降低DNMT1作用弱于5-Aza-cdR,降低DNMT3a、DNMT3b作用明显优于5-Aza-cdR组(P<0.05)。结论水蛭提取物能抑制肝癌HepG2细胞DNTMs表达,参与DNA去甲基化作用可能是水蛭抗肿瘤的机制之一。
- 田雪飞孙婧方圆伍参荣周青廖兴华
- 关键词：肝癌水蛭DNA甲基转移酶HEPG2细胞
- 归肝经中药作用于人肝癌细胞差异表达蛋白酪氨酸激酶的筛选与分析被引量：2
- 2015年
- 目的应用蛋白芯片技术筛选归肝经中药作用于人肝癌细胞蛋白酪氨酸激酶（PTKs）系统的特征性差异表达蛋白，并分析不同归肝经中药与PTKs调节的差异性。方法选择40只BALB／C裸小鼠，采用将皮下瘤组织块植入肝左叶实质内的方法复制原位移植瘤模型，模型复制10d确定成瘤后分为4组，各组分别腹腔注射相应的中药提取物，归肝经化瘀消瘾药对组给予三棱和莪术（给药量为含生药4．5g·kg-1·d-1）、归肝经攻毒散结药对组给予蜈蚣和全蝎（给药量为含生药0．3g·kg-1·d-1）、归脾经对照药对组给予黄芪和白术（给药量为含生药6．3g·kg-1·d-1），模型组腹腔注射等量0．9％生理盐水。药物处理3周后处死小鼠取肝癌组织，采用蛋白芯片技术筛选归肝经药对作用于肝癌细胞的差异表达PTKs并进行聚类分析。结果实验结束后各组动物数分别为化瘀消瘾药对组6只，攻毒散结药对组5只，对照药对组5只，模型组7只。蛋白芯片筛选结果显示：以调节倍数大于1．50或小于0．67判定为差异有统计学意义，与模型组比较，化瘀消瘾药对组42种表达均为上调[包括29种受体酪氨酸激酶（RTKs）和13种非受体酪氨酸激酶（n胛Ks）]，其中调节倍数大于5．0的有促红细胞生成素产生肝细胞受体B1（EphBl）、表皮生长因子受体（ErbB2、ErbB4）等3种RTKs；调节倍数为3．0～5．0的包含7种RTKs，分别为EphAl、EphA3、EphA7、成纤维细胞生长因子受体2-α（FGFR2—α）、肝细胞生长因子受体（HGFR）、巨噬细胞集落刺激因子受体（M—CSFR）、血管内皮细胞生长因子2（VEGFR2）；2种nrPTKs分别为非受体酪氨酸激酶BMX（BMX）、Janus激酶（JAKl）。攻毒散结药对组表达上调23种（RTKs15种、nrPTKs8种），6种下凋，其中调节倍数为3．0—5．0的RTKs分别为ErbB4、M—CSFR，1种nrPTKs为巨核细胞相关酪氨酸激酶（MATK）。对�
- 田雪飞黄晓蒂周青王志琪田莎陈园
- 关键词：肝经蛋白酪氨酸激酶蛋白芯片
- 麝香配伍乳香对小鼠前列腺抗原诱导的单核细胞分泌炎症因子的调控作用被引量：11
- 2014年
- 目的:探讨不同浓度麝香配伍乳香含药血浆(DP-M&O)对单核细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10水平的影响,了解麝香配伍乳香在治疗前列腺炎中抗炎作用的机理。方法:制备小鼠脾脏单核细胞,细胞培养后分加入2.5%、5%、10%、20%浓度的DP-M&O预处理1 h后,加入小鼠前列腺抗原(PAgs)诱导活化单核细胞。阳性对照组加入脂多糖(LPS)处理。阴性对照组加入等体积DMEM完全培养基。培养96 h后收集各组上清,ELISA法检测单核细胞分泌的炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10的水平。结果:与空白对照组比较,经PAgs刺激诱导后,各组小鼠单核细胞的炎症因子释放增加,除IL-10的升高明显低于阳性对照LPS组外,其他TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8均明显增高;2.5%DP-M&O预处理后,虽然炎症因子有改变的趋势,但与PAgs组比较,差异无统计学意义(P>0.05);随着DP-M&O浓度增加,对TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8降低及IL-10升高作用更明显,呈剂量依赖性改变,在20%DP-M&O预处理后,TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8分别降低了74.4%、56.0%、76.6%、70.5%,IL-10上升了236.1%。结论:DP-M&O具有直接抑制前炎症因子产生的作用,其中对IL-1β的抑制作用最强;可促进IL-10的升高,从而抑制单核巨噬细胞释放炎症介质,减少PAgs诱导活化导致的TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的分泌释放。
- 杨泱周青田雪飞韩平高瑞松
- 关键词：炎症因子麝香乳香小鼠
- 中西医结合治疗原发性肝癌临床随机对照研究的系统评价与Meta分析
- 2014年
- 目的:对中西医结合治疗肝癌的临床随机对照研究进行疗效与方法学质量评价,明确临床疗效的真实程度及可应用性。方法:电子数据库(PubMed数据库、中文期刊全文数据库CNKI、中国科技文献数据库、万方中华医学会期刊数据库)中检索符合纳入标准截止2012年11月的临床随机对照研究;选取应用中药制剂配合西医为干预措施治疗原发性肝癌的临床随机对照研究;对非完全随机的临床对照研究进行探索性分析。采用Cochrane协作网专用软件RevMan 4.2.2进行统计分析。结果:57项研究共4533例患者纳入Meta分析,结果显示,五类分析指标包括生存率、总有效率评价、生活质量改善率、生活质量KPS评分的中西医结合治疗作用明显优于单纯西药组(P<0.01);对甲胎蛋白的降低作用与对照组比较差异无统计学意义;T淋巴细胞亚群分析结果显示治疗组CD3+T细胞、CD4+T细胞上升程度明显优于对照组(P<0.01),对CD8+T细胞上升程度并无显著差异,能明显提高NK细胞及白细胞计数的上升程度(P<0.01)。结论:中西医结合治疗原发性肝癌可提高疗效并改善生活质量与免疫功能指标。
- 郭丽诗杨芳田雪飞
- 关键词：原发性肝癌中西医结合疗法META分析
- 蜈蚣提取物抗肺癌活性的体内外实验研究被引量：12
- 2016年
- 目的探讨蜈蚣提取物对人肺癌A549细胞的增殖抑制、凋亡诱导及裸小鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法采用酶解法合丙酮沉淀法分离纯化蜈蚣提取物处理人肺癌A549细胞,MTT法检测细胞增殖抑制并计算半数抑制率(IC50),流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化,Hoechst荧光染色观察细胞凋亡的形态变化。制备人肺癌细胞裸小鼠皮下移植瘤模型,随机分为模型组、对照组和蜈蚣提取物组,每组10只,观察裸小鼠皮下移植瘤瘤体体积、质量及抑瘤率变化。结果体外实验结果显示,蜈蚣提取物对人肺癌A549细胞有明显的增殖抑制作用,IC50为0.603 mg/m L;蜈蚣提取物作用48 h后,细胞周期表现为G0/G1期细胞比例下降,S期与G2/M期细胞比例均升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);Hoechst荧光染色可观察到明显的凋亡细胞及凋亡特征性的形态学改变;动物体内抑瘤实验结果发现,经蜈蚣提取物治疗后,瘤体质量与体积显著减少,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论蜈蚣提取物对人肺癌A549细胞具有浓度依赖性增殖抑制作用,可诱导细胞凋亡,使A549细胞停滞于G2/M期,并能有效抑制人肺癌裸小鼠皮下移植瘤的生长。
- 陈园艾小佳王志琪田莎周青裴刚田雪飞
- 关键词：蜈蚣提取物肺癌细胞凋亡移植瘤
