天津市自然科学基金(13JCQNJC11600)
- 作品数：10 被引量：11H指数：2
- 相关作者：刘强王彦杜利清徐畅苏旭更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院中国疾病预防控制中心北京协和医学院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Sirt3介导的SOD2在电离辐射中的作用研究
- 2014年
- 目的 观察293T细胞经不同剂量137Cs γ射线照射后,细胞中沉默信息调节因子3（sirt3）及相关抗氧化因子的变化,研究sirt3基因在辐射防护中的抗氧化活性机理.方法 采用137Cs对293T细胞分别进行2、4、8和16 Gy照射,采用Real-Time PCR的方法,检测照后6、12、24和48 h,细胞中sirt3和超氧化物歧化酶2（SOD2） mRNA的表达水平变化;采用免疫印迹法,检测细胞中sirt3和SOD2蛋白水平随时间的变化;采用siRNA干扰和抑制剂处理的方法,检测sirt3与SOD2的作用关系;采用SOD Assay Kit-WST试剂盒检测细胞中SOD2酶活力的变化;流式细胞术检测细胞中活性氧（ROS）随时间的变化.结果 各组细胞中sirt3和SOD2的mRNA水平和蛋白质水平均表现出不同程度的上升,与0 Gy组比较,分别在12 h（t =6.75、13.59、6.59、10.13,P＜0.05）和24 h（t=6.80、8.73、11.09,P＜0.05）达到最大值;sirt3 siRNA干扰和抑制剂处理结果显示sirt3是SOD2的上游调控因子;照射24 h后细胞中SOD2的活性显著增加,与0 Gy组比较,差异有统计学意义（t =46.04、23.19、26.28、14.70,P＜0.05）,细胞中ROS水平也发生相应变化.结论 sirt3可能通过对细胞中SOD2的表达量及活性的调控加强抗氧化保护系统,为临床辐射防护和治疗提供实验依据.
- 林凯丽徐畅杜利清王彦李德冠刘建香苏旭樊赛军樊飞跃刘强
- 关键词：活性氧293T细胞电离辐射
- siRNA干扰SIRT1对辐射后IL-6表达的影响
- 2015年
- 目的 研究siRNA干扰沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）对间充质干细胞（MSCs）电离辐射后诱导的炎性因子白细胞介素6（IL-6）的影响,探究SIRT1的辐射防护作用.方法 使用0、2、4、8 Gy照射MSCs,分别在照后3、6、12、24 h提取总RNA和总蛋白,检测IL-6表达水平;将MSCs分为空白对照组、单纯照射组和SIRT1干扰联合照射组,使用Western blot、RT-PCR检测SIRT1和IL-6胞内表达.结果 MSCs在电离照射后,IL-6的表达水平先升高后降低;在照后12h达到最高,24 h恢复基准水平;而联合SIRT1干扰会引起IL-6水平进一步升高,加重MSCs电离辐射后的炎症反应.结论 SIRT1可能通过抑制电离辐射诱导的炎性因子IL-6的表达,发挥辐射防护作用.
- 王璐李晴徐畅王彦杜利清王芹杨福军孙元明刘强
- 关键词：白细胞介素6INTERLEUKIN-6
- sirt3的作用机制及抗肿瘤研究进展被引量：4
- 2014年
- 沉默信息调节因子3(sirt3)是线粒体去乙酰化蛋白,参与线粒体蛋白去乙酰化调节,激活超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2,SOD2),降低线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,维持细胞内稳态平衡,调节氧化、激素或者电离辐射等应激反应。sirt3是线粒体高保真蛋白和抑癌基因,其去乙酰化活性与长寿相关,因此,sirt3缺失可导致线粒体代谢异常和细胞损伤,引起与衰老相关的病理症状。本文对sirt3的线粒体定位、调节和抑癌作用进行讨论,阐明sirt3可以维持线粒体完整性和正常代谢活动,某种程度上能够抑制肿瘤的发生。
- 林凯丽王彦王津晗刘强
- Learning From Biomarkers in Victims Accidentally Exposed to Ionizing Radiation被引量：1
- 2016年
- Yan WangLiqing DuChang XuQin WangZhiyi SongJianxiang LiuXu SuQiang Liu
- ANTP-SmacN7融合肽对H460细胞的辐射增敏作用被引量：2
- 2016年
- 背景与目的肿瘤的辐射耐受制约了放疗疗效,第二个线粒体衍生的半胱氨酸蛋白酶激活剂（Second mitochondria-derived activator of caspase,Smac）蛋白类似物可明显提高辐射诱导的肿瘤细胞凋亡,有望成为新型肿瘤辐射增敏药物。本研究旨在探讨新型Smac蛋白类似物ANTP-SmacN7融合肽对肺癌细胞系H460的辐射增敏作用。方法合成ANTP-SmacN7融合肽,连接荧光素FITC以观察融合肽能否进入细胞。对数生长期H460细胞分为空白对照组、单纯照射组、ANTP-SmacN7组和照射联合ANTP-SmacN7组,单纯照射组给予0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy照射,照射联合ANTP-SmacN7组中ANTP-SmacN7的浓度为20μmol/L,WST-1测定H460细胞的增殖。流式细胞仪测定细胞处理后24h和48 h的细胞凋亡率。Western blot实验检测caspase3和cleaved caspase3的表达水平。结果 ANTP-SmacN7融合能够顺利进入细胞,且能够增强H460细胞的辐射敏感性（F=25.1,P〈0.01,增敏比为1.86）,照射联合ANTP-SmacN7可明显降低H460细胞的克隆形成率（χ^2=45.2,P〈0.01;χ^2=40.3,P〈0.01）,提高cleaved caspase3的表达量,促进caspase3的活化,增加辐射诱导的细胞凋亡率。结论 ANTP-SmacN7融合肽可明显提高H460细胞的辐射敏感性,作为一种新的Smac蛋白类似物有望用于肿瘤的辐射增敏治疗。
- 刘宝娜杜利清徐畅王彦王芹宋志仪孙晓辉王津晗刘强
- 关键词：SMAC蛋白肿瘤细胞
- SIRT1基因沉默在辐射诱导的NLRP3和IL-1β表达中的作用研究被引量：1
- 2015年
- 目的 研究沉默信息调节因子1 （SIRT1）基因沉默对间充质干细胞（MSCs）受照后Nod样受体蛋白3（NLRP3）和IL-1β表达的影响,探讨SIRT1激活剂——白藜芦醇的辐射防护作用及其机理.方法 将MSCs分为空白对照组、单纯照射组、RNA干扰组、白藜芦醇组和RNA干扰＋白藜芦醇组.采用酶联免疫吸附测定、Western blot和RT-PCR等方法检测IL-1β、SIRT1和NLRP3在蛋白和mRNA水平的表达.结果 辐射可导致MSCs细胞外IL-1β分泌水平明显升高,给予白藜芦醇后,细胞IL-1β分泌水平较单纯照射组显著下降（t=21.68,P＜0.01）,NLRP3和IL-1β mRNA水平较单纯照射组明显降低（t=14.44,P＜0.01;t=12.35,P＜0.01）,SIRT1基因沉默后,NLRP3和IL-1β的mRNA水平回升至单纯照射组水平（t=14.86,P＜0.01;t=11.12,P＜0.01）,即使再给予白藜芦醇,NLRP3和IL-1β的mRNA水平仍明显高于白藜芦醇组（t=11.31,P＜0.01;t=10.54,P＜0.01）.结论 SIRT1基因沉默减弱了白藜芦醇对辐射诱导的NLRP3和IL-1β的抑制作用,说明白藜芦醇可能通过激活SIRT1、抑制NLRP3、降低IL-1β的表达,从而减轻辐射引起的细胞损伤.
- 付岳王彦杜利清徐畅刘建香樊飞跃苏旭樊赛军刘强
- 关键词：白细胞介素1ΒINTERLEUKIN-1Β
- 姜油树脂对辐射后间充质干细胞Nrf2及其靶基因表达的影响
- 2015年
- 目的 探索姜油树脂对辐射后间充质干细胞中核转录因子E2相关因子2（Nrf2）及其下游靶基因表达变化的影响.方法 采用MTT、实时PCR以及Western Blot检测不同浓度姜油树脂、不同时间点处理后Nrf2及其下游靶基因血红素加氧酶（HO1）和还原型辅酶Ⅰ醌类氧化还原酶（NQO1）的表达变化.结果 姜油树脂对辐射后间充质干细胞中Nrf2基因本身的影响并不大,但在给予姜油树脂24h后,10-5和10-4g/ml姜油树脂联合照射组下游靶基因HO1和NQO1的mRNA及蛋白水平均有所上升.结论 姜油树脂不影响Nrf2的转录和表达,但可提高其下游抗氧化基因的表达,发挥辐射防护作用.
- 李晴王璐徐畅王彦杜利清王芹杨福军孙元明刘强
- 关键词：姜油树脂血红素加氧酶
- 白藜芦醇抑制辐射诱导的间充质干细胞白细胞介素-1β表达的机理研究
- 2014年
- 目的 研究白藜芦醇对间充质干细胞（MSC）受照后产生的炎症因子白细胞介素-1β（IL-1β）的影响,并探讨其机制.方法 将MSC分为空白对照组、单纯照射组、shRNA干扰组和白藜芦醇组,应用ELISA、Western-blot和RT-PCR等方法检测IL-1β的分泌和表达.结果 预先给予MSCs 50、100和200 μmol/L的白藜芦醇组与单纯照射组相比,IL-1β胞外分泌明显降低,差异有统计学意义（t=83.34,24.48,12.52; P＜0.05）,同时细胞内IL-1β蛋白表达和mRNA水平也明显降低,差异有统计学意义（t=8.695,14.77,13.9; P＜0.05）.照射前沉默Sirt1基因并给予MSCs 200 μmol/L白藜芦醇,与照射前单纯给予200μmol/L白藜芦醇相比,辐射引起的IL-1β分泌明显升高,差异有统计学意义（t=18.57; P＜0.05）,同时细胞内IL-1β蛋白表达和mRNA水平也明显升高,差异有统计学意义（t=10.24;P＜0.05）.结论 白藜芦醇可明显抑制辐射诱导的MSCs炎症因子IL-1β的产生,并且Sirt1蛋白在辐射后产生炎症的过程中起到关键的调节作用.
- 王彦付岳杜利清徐畅樊飞跃樊赛军苏旭刘强
- 关键词：白藜芦醇间充质干细胞电离辐射SIRT1白介素-1Β
- 沉默信息调节因子2相关酶1在炎症反应中的调节机制研究进展被引量：1
- 2015年
- 沉默信息调节因子相关酶1（SIRT1）是酵母沉默信息调节因子2（Sir2）的哺乳动物同源体,是一种高度保守的NAD＋依赖的组蛋白去乙酰化酶.SIRT1的作用底物众多,不仅可以对组蛋白进行去乙酰化作用,还可与多种转录因子和信号分子相互作用.SIRT1的去乙酰化酶活性影响细胞的存活、分化、衰老和凋亡,因而现在已成为生命科学研究的热点.最近几年发现其在炎症反应的发生发展中也发挥着重要调节作用.
- 王璐徐畅刘强
- 关键词：炎症
- Tat—SmacN7对人乳腺癌细胞系的放射增敏作用被引量：2
- 2014年
- 目的观察Tat—SmacN7对人乳腺癌SK—BR-3细胞放射敏感性的影响并探讨其机制。方法取对数生长期乳腺癌SK—BR-3细胞，分为对照组、叮射线照射组、Tat—SmacN7组和Tat—SmacN7联合1射线照射组（联合组）。MTT法检测Tat—SmacN7对SK—BR-3细胞的毒性；克隆形成实验检测Tat—SmacN7的存活分数；单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算放射增敏比（SER）；流式细胞术检测Tat—SmacN7联合1射线照射对细胞凋亡的影响；Westernblot法检测细胞凋亡抑制蛋白XIAP和cIAP-1蛋白表达水平。结果Tat—SmacN7随浓度升高对SK-BR-3细胞的增殖抑制率增大，药物浓度与细胞增殖率呈正相关（r=0．924，P〈0．05），IC50为（62．62±1．19）μmol／L，IC20为（5．66±0．67）μmol／L；5μmol／LTat—SmacN7能增加SK—BR-3细胞的放射敏感性，联合组与照射组放射增敏比为1．48；6Gy．y射线照射后48h，联合组凋亡率显著高于照射组（t=7．01，P〈0．05）；与对照组相比，Tat—SmacN7组XIAP表达水平降低，联合组XIAP和cIAP-1蛋白表达水平均降低。结论Tat—SmacN7通过促进人乳腺癌细胞SK—BR-3细胞的凋亡，增加其辐射敏感性，这一特性与XIAP的表达有关。
- 郭艳婷王彦杜利清徐畅曹嘉刘建香陈凤华付岳刘强苏旭
- 关键词：乳腺癌放射增敏细胞凋亡凋亡抑制蛋白
