新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目(200311105)
- 作品数：5 被引量：23H指数：3
- 相关作者：李文蓉牛志刚谭立新侯颖胡艳秋更多>>
- 相关机构：新疆畜牧科学院新疆农业大学新疆大学更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 供核细胞对体细胞核移植效率的影响被引量：3
- 2006年
- 利用体细胞核移植技术克隆动物、生产转基因家畜具有极大的应用潜力。然而,核移植效率低下、克隆后代形态异常等问题仍然制约着体细胞核移植技术的产业化进展。影响体细胞核移植效率的因素很多,该文着重从供核细胞的类型、细胞体外培养、细胞凋亡及转基因操作等方面阐述其对体细胞核移植效率的影响。
- 胡艳秋李文蓉罗淑萍
- 关键词：供核细胞体细胞核移植细胞凋亡细胞类型细胞培养
- β-酪蛋白基因在不同乳腺上皮细胞中表达的初步分析被引量：6
- 2006年
- 应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对山羊乳腺上皮细胞(GMEC)中β-酪蛋白mRNA进行检测以评价GMEC乳蛋白合成的功能。同时,比较商品化小鼠乳腺癌细胞C127、人乳腺癌细胞系T47D中β-酪蛋白基因的转录表达。结果表明,原代培养山羊乳腺上皮细胞GMEC-1能够检测到β-酪蛋白基因的表达,在激素诱导下,GMEC-3细胞中能检测到β-酪蛋白基因mRNA,但C127和T47D细胞系中均无法检测到。
- 胡艳秋谭立新罗淑萍牛志刚李文蓉
- 关键词：山羊乳腺上皮细胞Β-酪蛋白RT-PCR
- 不同血清对山羊成纤维细胞传代的影响被引量：2
- 2004年
- 考察不同血清对山羊成纤维细胞传代培养的影响.第6～8代细胞分别在添加10%Hyclone和10%四季青胎牛血清的DMEM中传代培养,实验发现,前者平均增殖倍数和群体倍增次数均高于后者.随着传代次数的增多,细胞在四季青血清培养液中的生长行为发生明显变化,细胞不能倍增且生长曲线呈不规则波动状.结果表明,细胞传代过程中使用不同血清会改变细胞生物学特性,降低细胞活力.用这种方式传代的细胞不宜用作核移植供体细胞及其他实验研究.
- 侯颖张大铭陈亮
- 关键词：成纤维细胞血清培养传代细胞生物学特性细胞活力增殖倍数
- 一种提高体外培养细胞中期分裂相的新方法被引量：3
- 2005年
- 为了提高体外培养细胞中期分裂相,用黄牛胎儿成纤维细胞系(YFF)和西门塔尔小牛成纤维细胞系(CNF)为实验材料,先经4℃低温休克再用秋水仙素处理后制备染色体,比较了不同低温休克处理时间获得的中期分裂相百分率,并运用该方法对20代内YFF和CNF核型变异进行了分析。实验发现,YFF和CNF经低温休克中期分裂相百分率显著高于对照组(P<0.05)。其中,20h低温组中期分裂相(31.7%和40.2%)高于对照组(4.7%和6.4%)5倍以上(P<0.01)。实验结果表明,4℃低温休克法是一种提高体外培养细胞中期分裂相的简便方法,适于监测体外培养细胞核型变异。
- 侯颖谭立新李文蓉牛志刚郭志勤
- 关键词：体外培养
- 脂质体介导法转染体细胞效率的优化被引量：9
- 2005年
- 为建立脂质体介导的高效体细胞转染体系,采用脂质体TransfastTM包裹编码增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的pCMV-EGFP质粒,转染5～13代山羊胎儿成纤维细胞,并用流式细胞仪检测不同DNA剂量、细胞汇合度、血清、转染时间及脂质体与DNA比例等参数对转染效率的影响。实验发现0.75μgDNA按1∶1的脂质体与DNA比例,在无血清条件下转染汇合50%细胞3h,转染效率最高可达40.7%±5%。4h转染时间、细胞汇合80%及转染体系中有血清会降低转染效率。随着DNA剂量的增加,转染效率呈剂量依赖性增高,但山羊成纤维细胞的活细胞数显著下降。实验表明TransfastTM能高效安全地介导外源基因转染山羊成纤维细胞。
- 侯颖李文蓉谭立新牛志刚
- 关键词：转染效率流式细胞仪检测山羊体细胞胎儿成纤维细胞
