江苏省省级科技创新与成果转化专项引导资金(BL2012047)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：倪颖邵世和侯艳娇邵晨孙凤英更多>>
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- 发文基金：江苏省省级科技创新与成果转化专项引导资金国家教育部博士点基金江苏省自然科学基金更多>>
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- 快速检测肺炎链球菌recA、ply及16S rRNA基因的多重降落PCR方法建立及应用被引量：3
- 2014年
- 目的:建立快速检测肺炎链球菌recA、ply及16S rRNA基因的多重降落PCR方法并应用。方法:设计肺炎链球菌的特异基因recA、ply及其菌属保守序列16S rRNA基因的引物,建立多重降落PCR的反应体系及条件,通过该方法检测13株标准菌株的基因以判定recA、ply、16S rRNA基因的检测特异性;并通过对不同稀释度肺炎链球菌DNA的检测判定该方法的灵敏度。最后,应用多重降落PCR方法检测98份痰标本的肺炎链球菌,并与细胞培养法进行比较。结果:建立的多重降落PCR方法检测肺炎链球菌的特异性达100%,灵敏度达5 pg/μL,该方法对98份痰标本中肺炎链球菌的检测结果与细胞培养法一致。结论:成功建立检测肺炎链球菌的多重降落PCR方法,灵敏度高,特异性强,可用于临床标本肺炎链球菌的快速检测。
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- 关键词：肺炎链球菌临床标本
- 幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统cagQ基因缺失株的构建与鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)Ⅳ型分泌系统cag Q基因缺失株。方法:通过PCR扩增出cag Q基因编码区侧翼同源臂序列,经TA克隆后进行双酶切,并将纯化后上下游同源臂连接至两端含有卡那霉素抗生素基因的载体p Bluscript SK II(-),构建为cag Q基因自杀质粒。利用电穿孔法将自杀质粒导入H.pylori,进行同源重组。培养后通过卡那霉素抗生素筛选出基因缺失株,并经PCR及核酸序列分析进一步确定基因缺失株。结果:H.pylori的cag Q基因自杀质粒p Blue KM40-△cag Q经酶切验证无误,进行电转化后经PCR及核酸序列分析结果正确。结论:成功获得H.pylori cag Q基因缺失株,命名为Hp26695-△cag Q。
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- 关键词：幽门螺杆菌CAGQ基因缺失株
