教育部留学回国人员科研启动基金(013456)
- 作品数：6 被引量：25H指数：3
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- 相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 牵张应力对小儿体外骨髓间充质干细胞向成骨、成脂肪分化的相关性研究
- 2009年
- 目的 探讨周期性机械应力对小儿骨髓间充质干细胞（MSCs）分化方向的影响。方法利用自行建立的机械牵张应力装置，对体外MSCs加载力学信号，并复合成脂肪诱导剂，选用化学染色、RT-PRC、免疫组化、Western Blot的方法检测MSCs干预后成骨指标（OC、BMP-2、Ⅰ型胶原）和成脂肪分化的指标（PPARγ2、脂滴）。结果MSCs受力后，细胞OCmRNA表达较对照组明显增高，而且与干预时间相关；干预7d后，细胞内BMP-2、Ⅰ型胶原蛋白表达较对照组明显增强；MSCs在成脂肪诱导过程中，接受应力后细胞脂滴的出现和PPART-2mRNA的表达均明显下降。结论适当的应力促进MSCs向成骨方向分化，抑制其向脂肪方向分化。
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- 关键词：牵张应力间质干细胞细胞分化
- 牵张应力对儿童骨髓间充质干细胞体外增殖与向成骨分化的影响被引量：8
- 2007年
- 目的观察周期性牵张应力对儿童骨髓间充质干细胞(MSCs)体外增殖活性与向成骨分化的影响。方法分离并培养儿童骨髓间充质干细胞,利用体外装置对3～6代细胞加载不同大小的牵张应力,相差显微镜观察细胞形态分布的变化,分别用细胞计数法、四甲基偶氮唑(MTT)和流式细胞仪检测细胞增殖、细胞周期及凋亡情况,同时检测碱性磷酸酶(ALP),骨钙素(OC)的活性。结果牵张应力干预MSCs后,细胞形态变长,沿受力环切线方向规则排列,细胞增殖能力增强,细胞周期比例改变,增殖指数增大,细胞凋亡则没有明显差别,ALP、OC的活性显著增强。结论适当的周期性牵张应力可以提高MSCs的增殖能力并促使细胞向成骨分化。
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- 关键词：间质干细胞细胞分化
- 机械力学对体外骨髓间充质干细胞的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:分析力学刺激体外骨髓间充质干细胞所产生增殖分化等生物学效应的影响及其力化学信号转导途径。资料来源:因特网上检索PubMed数据库中2000-01/2006-06期间有关力学刺激对骨髓干细胞作用效应进展的英文文章,检索词“stem cel1,marrow mesenchymal stem cells,mechanical stimulation,stress”,同时检索CNKI中国知网医学文献数据库2000-01/2006-06期间的相关文章,检索词为“干细胞、骨髓间充质干细胞、机械刺激、应力”。资料选择:对资料进行筛选,选取相关文章查找全文。纳入标准:①骨髓间充质干细胞相关生物学特性。②体外细胞加载的应力分类及相应力学装置的特点。③应力对细胞影响的研究。④能获取文章的全文。排除标准:①较陈旧的文献。②重复研究。资料提炼:共收集关于86篇体外骨髓干细胞及力学干预的相关文献。其中30篇符合纳入标准。资料综合:①骨髓干细胞具有高度增殖及多向分化能力,可通过体外培养、干预作为细胞组织工程的理想种子细胞。②力学刺激是体外调节细胞生物学效应的重要途径,其中力学分类有:流体切应力、静止压应力、张应力、离心力以及单个细胞的吸吮力等,介绍各种力以及相应的力学装置的特点。③骨髓干细胞加载各种应力干预后产生的生物学效应,以及细胞应力学刺激的机制、信号转导途径。结论:力学刺激可影响骨髓间充质干细胞生物学特性,在适当的力学刺激条件下,促进细胞的增殖与分化,为骨组织工程提供新的技术手段,同时也为临床应用牵拉成骨的骨再生过程提供理论依据。
- 黎润光邵景范魏明发
- 关键词：间质干细胞骨髓应力
- 体外小儿骨髓间充质干细胞对牵张应力早期应答反应的研究
- 2008年
- 目的观察体外小儿骨髓间充质干细胞（MSCs）对周期性牵张应力的早期应答反应。方法分离并培养小儿MSCs，利用体外细胞牵张应力装置对第三一六代细胞加载短期力学信号，检测各组细胞内Ca^2＋以及早期反应基因蛋白（c-fos、c-jun和c-myc）的表达情况。结果应力干预MSCs后，细胞内Ca^2＋浓度在受力1min后即增高，荧光强度是对照组的164．63％，3、5min升高更明显，干预10min后Ca^2＋浓度升高的幅度有下降趋势；c-los、mjun和c-myc基因蛋白在未受力组细胞内不表达或微量表达，加载力学信号后，表达发生了明显的变化，随时间的延长，均表现为增强-持续-回复原来水平。结论周期性牵张应力影响MSCs内Ca^2＋的浓度及早期反应基因蛋白（c-los、mjun和mmyc）的表达，推测c-los、c-jun和c-myc参与了MSCs响应力学的信号传导途径，可能依赖Ca^2＋通道的活化来调控。
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- 关键词：间质干细胞牵张应力钙通道
- 牵张应力对人骨髓间充质干细胞增殖及细胞周期的影响被引量：12
- 2007年
- 目的:观察周期性机械牵张应力对人骨髓间充质干细胞的增殖活性与细胞周期的影响。方法:实验于2006-02/06在同济医院矫形外科实验室完成。①建立体外细胞周期性机械牵张力学装置,并利用三维有限元的方法分析基膜的力学分布。②使用密度梯度离心法分离人骨髓间充质干细胞。③取第3～6代细胞接种于弹性硅胶膜培养板,分组:实验组细胞接受力学装置1.0Hz的频率,不同大小的应力(3%,6%,9%,12%,18%)、不同时间(12,24,36,48,60,72h)的机械信号刺激,对照组细胞不受力学信号刺激,其他培养条件与实验组一致。④细胞行力学干预后,用相差显微镜观察行细胞形态、排列,分别用细胞计数法、四甲基偶氮唑和流式细胞仪测量细胞增殖和细胞周期。结果:①自行建立的力学装置性能稳定,细胞接种硅胶6孔板后12～24h贴壁,贴壁良好,24h后细胞覆盖率约达70%,无细菌污染现象,可以用于应力刺激体外细胞效应的实验研究。②应力干预人骨髓间充质干细胞12h后,细胞形态稍变细长,轮廓鲜明,并沿受力环切线方向规则排列,干预24h变化更明显。③通过细胞计数、四甲基偶氮唑、流式细胞周期检测,发现适当大小的力学刺激对人骨髓间充质干细胞具促细胞增殖作用,增殖指数增大,其中12%的应力作用最明显,其增殖指数约为对照组的1.86倍;过强的机械应力(18%)对细胞不具有促增殖效应,并可能存在毒性作用;早期力学干预可以促进细胞增殖,干预时间过长(48h以后)反而表现为抑制生长趋势。结论:适当的周期性牵张应力可以提高人骨髓间充质干细胞的增殖能力。
- 黎润光邵景范魏明发吴晓娟洪振亚宣晓琪杨小进赵东明陈超
- 关键词：间充质干细胞牵张应力增殖细胞周期
- 机械牵张应力对骨髓基质干细胞氧自由基系统的影响被引量：3
- 2008年
- 目的观察不同强度的周期性机械牵张应力对骨髓基质干细胞（BMSCs）氧自由基系统的影响。方法建立体外细胞周期性机械牵张应力加载装置，取材原代培养BMSCs，并进行细胞多向分化潜能检测，取3-5代细胞加载不同强度的应力（正弦波形，1Hz），干预后用二氯荧光素双醋酸盐免疫发光标志法上流式细胞仪检测活性氧（ROS）活性，取细胞悬液超声裂解后分别用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量。结果高强度的机械应力（〉12％）可导致BMSCs的ROS活性增强、SOD表达下降、MDA含量增高，并且与作用时间呈依赖关系，其中实验组24％的高强度应力干预BMSCs 48h后，ROS的标志荧光强度（55．82±2．82）为对照组（4．51±1．64）的12．4倍，SOD活性[（5．77±0.68）μ／mL]较对照组[（27．00±1．65）μ／mL]降低约4／5，MDA含量[（4．47±0．18）μmol／mL]较对照组[（1.39±0．15）μmol／mL]增加3倍多。结论高强度（〉12％）的机械应力可导致BMSCs氧自由基系统平衡失调，对细胞有较大的毒性作用，过大的强度应力不利于骨骼生长，对于机械应力的临床应用有指导意义。
- 黎润光邵景范魏明发熊洋莉宣晓琪吴晓娟杨小进赵东明杨勇
- 关键词：干细胞骨髓活性氧超氧化物歧化酶丙二醛
