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国家自然科学基金(39670330)

作品数:9 被引量:26H指数:3
相关作者:孙秉中冯琦尚振川宋霆婷张涛更多>>
相关机构:第四军医大学西京医院成都军区总医院青岛市肿瘤医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 10篇医药卫生

主题

  • 9篇细胞
  • 7篇白血
  • 7篇白血病
  • 6篇慢性
  • 4篇凋亡
  • 4篇寡核苷酸
  • 4篇核苷酸
  • 4篇反义
  • 4篇反义寡核苷酸
  • 3篇髓细胞
  • 3篇髓细胞白血病
  • 3篇细胞凋亡
  • 3篇慢性髓细胞
  • 3篇慢性髓细胞白...
  • 3篇K562细胞
  • 3篇BCR-AB...
  • 2篇特异
  • 2篇特异性
  • 2篇粒细胞
  • 2篇粒细胞白血病

机构

  • 7篇第四军医大学...
  • 2篇成都军区总医...
  • 2篇青岛市肿瘤医...
  • 1篇第四军医大学
  • 1篇解放军第40...
  • 1篇济宁市第一人...
  • 1篇中国人民解放...
  • 1篇空军军医大学...

作者

  • 7篇冯琦
  • 7篇孙秉中
  • 5篇尚振川
  • 3篇宋霆婷
  • 3篇张涛
  • 2篇朱华锋
  • 2篇孙凯
  • 2篇赵永同
  • 2篇张英起
  • 2篇邓涛
  • 2篇韩苇
  • 2篇颜真
  • 2篇郑英文
  • 1篇乔庆大
  • 1篇赵越华
  • 1篇卜宁
  • 1篇王莎
  • 1篇谢小平
  • 1篇孙浩平
  • 1篇李翼

传媒

  • 1篇中国癌症杂志
  • 1篇青岛大学医学...
  • 1篇中华肿瘤杂志
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇实用医学杂志
  • 1篇第四军医大学...
  • 1篇现代肿瘤医学
  • 1篇Chines...
  • 1篇中华实用诊断...

年份

  • 1篇2009
  • 2篇2006
  • 1篇2003
  • 1篇2002
  • 3篇2000
  • 2篇1998
9 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
拓朴替康诱导K562细胞凋亡时p38MAPK的变化
2006年
目的:探讨拓朴替康诱导K562细胞凋亡的相关信号转导途径。方法:0.1μmol/L的拓朴替康处理K562细胞24h时,通过流式细胞仪(FCM)和片段DNA含量检测研究拓朴替康对靶细胞的促凋亡活性;采用免疫印迹法和γ-32P掺入法测定拓朴替康对p38MAPK含量及其活性的影响。结果:FCM检测发现在K562细胞周期图中出现一凋亡峰,凋亡细胞比率为16.9%,凋亡细胞特有的片段DNA含量为(45.9±1.0)%;p38MAPK含量及其活性明显升高,分别为对照组的4.9倍和4.1倍。结论:拓朴替康诱导K562细胞凋亡可能通过激活p38MAPK来实现。
尚振川孙浩平赵越华邓涛范方毅李翼
关键词:K562细胞P38丝裂原活化蛋白激酶类细胞凋亡
反义核酸对白血病细胞化疗药物敏感性的影响
2000年
1目的 解决白血病化疗过程中药物的副作用和白血病细胞的抗药性。2方法 将人工合成的与 C-myb基因起始密码子 2~ 7互补的反义寡聚脱氧核苷酸 (ASO)和化疗药物阿糖胞苷 (Ara- c)联合作用于急性粒细胞白血病 (AML)细胞 ,观察其对细胞活力、DNA合成、集落形成和凋亡的影响。 3结果  ASO可明显提高白血病细胞对化疗药物的敏感性。 4结论 
尚振川宋霆婷孙秉中冯琦张涛郑英文
关键词:白血病反义寡核苷酸类药敏试验
GENE THERAPY USING RETROVIRAL VECTOR OF bcr-abl SPECIFIC MULTI-UNIT RIBOZYMES COULD INHIBIT CML CELL GROWTH AND INDUCE APOPTOSIS被引量:1
2003年
Objective: To investigate the in vitro cleavage ability and effects on apoptosis and cell growth of the bcr-abl fusion gene specific multi-unit ribozymes. Methods: Three fusion point specific ribozymes were designed and the multi-unit ribozymes?in vitro transcription vector and retroviral vector were constructed. The in vitro cleavage ability was tested. The retroviral vector was transfected into K562 cell and the effects on proliferation, apoptosis, cell cycle and cell structure were observed. Results: Multi-unit ribozymes had in vitro cleavage efficiency of 70.8%, which was more efficient than single-unit and double-unit ribozymes. Transfection of the retroviral vector of the ribozyme into K562 cells, induced inhibition of cell growth and apoptosis. The incorporation rate of DNA in ribozymes transfected K562 cells was greatly decreased along with time passed, with an inhibition rate of more than 50% after 96 h of transfection. Under FCM, 18.4% of the cells underwent apoptosis 72 h after transfection and more cells were blocked in G phase, with the ratio in S phase greatly decreased (41.9%). Under electron microscope, compaction of nuclear chromatin and apoptosis bodies were observed. Conclusion: Multi-unit ribozymes specific to bcr-abl fusion gene can be used to treat CML and to purge bone marrow for self-grafting.
冯琦孙凯赵永同张涛尚振川王莎王玮赵宁颜真韩苇张英起孙秉中
关键词:BCR-ABLRIBOZYME
Bcr-abl特异性系列核酶体外切割活性比较及诱导K562细胞凋亡的实验研究被引量:5
2000年
目的 构建单、双及三单位核酶 ,鉴定其体外切割活性及对K5 6 2生物学特性的影响 ,探讨核酶用于基因治疗的前景。方法 首先针对bcr abl融合位点设计并合成 3个单核酶 ,而后通过基因重组构建单、双及三核酶载体 ,以体外切割试验鉴定并比较其活性。然后以脂质体将bcr abl三核酶逆转录病毒载体转入K5 6 2细胞 ,观察其对K5 6 2细胞周期、凋亡、超微结构的影响。结果 构建成功bcr abl特异性系列核酶共 6个重组载体 ,切割试验证实系列核酶载体中三核酶体外切割活性最强 ,为 70 8% ,双核酶次之 ,分别为 6 0 7%和 30 3% ,不同位点的单核酶切割活性分别为 5 4 6 %、2 5 3%和3 6 %。bcr abl特异性多核酶通过诱导凋亡抑制K5 6 2细胞增殖。结论 bcr abl特异性核酶在慢性粒细胞白血病基因治疗中具有潜在的应用前景 ,为多核酶体外净化骨髓联合自体骨髓移植治疗提供了理论和实验依据。
冯琦孙秉中赵永同孙凯赵宁刘利颜真韩苇张英起
关键词:白血病慢性BCR-ABL
Bcr-abl特异性系列核酶载体的构建及初步鉴定
目的:针对在慢性髓细胞白血病发病中起关键作用的bcr-abl融合基因,构建bcr-abl特异性系列核酶,为开展多核酶治疗奠定基础。方法:①在bcr-abl融合位点设计、合成3个相邻的锤头状核酶。②通过基因重组,分别构建单...
冯琦孙秉中赵永同孙凯张英起颜真韩苇
关键词:慢性髓细胞白血病BCR-ABL核酶
文献传递
bcr3/abl2和c-myb基因反义寡核苷酸联用对慢性髓细胞白血病的作用被引量:11
2000年
目的 探讨多癌基因反义寡核苷酸对慢性髓细胞白血病 (CML )的作用及其相互作用的影响 .方法 用台盼蓝拒染、集落形成、逆转录 -多聚酶链反应及流式细胞仪技术研究反义寡核苷酸对 K5 6 2细胞株和 CML 骨髓细胞的作用 .结果  c- myb反义寡核苷酸通过促进 CML 细胞凋亡 ,发挥对 bcr/abl反义寡核苷酸的协同作用 .结论 多癌基因反义核酸的联合应用可为
尚振川孙秉中冯琦王春红谢小平宋霆婷朱华锋
关键词:髓细胞白血病癌基因反义寡核苷酸基因治疗
bcr_3/abl_2反义寡核苷酸诱导慢性髓细胞白血病凋亡作用的研究被引量:2
1998年
目的 探讨癌基因bcr_3/abl_2反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASO)对慢性髓细胞白血病(CML)的作用及其作用机理.方法 通过形态学观察、流式细胞仪(FCM)检测和片断DNA含量测定等技术研究ASO对15例初发CML的作用.结果 bcr_3/abl_2 ASO(ASO-ba)可诱导CML细胞凋亡.结论 ASO技术可为CML治疗提供一项新手段.
尚振川谢小平孙秉中于文强冯琦郑英文朱华锋
关键词:白血病髓细胞性慢性凋亡反义寡核苷酸
多单位核酶对慢性粒细胞白血病细胞的增殖抑制及凋亡诱导效应研究被引量:3
2002年
目的 探讨多单位核酶体外净化慢性粒细胞白血病 (慢粒 )骨髓的可能性 ,研究多单位核酶的体外切割活性及对慢粒细胞恶性表型的逆转作用。方法 针对慢粒发病中起重要作用的bcr abl融合基因 ,在融合位点两侧 4 4碱基范围内设计、合成 3个核酶 ,其中 2个切割位点位于bcr基因 ,1个位于abl基因。通过基因重组构建多单位核酶体外转录载体及逆转录病毒表达载体 ,鉴定其体外切割活性。将多单位核酶逆转录病毒表达载体转染K5 6 2细胞 ,应用MTT、3 H TdR掺入、RT PCR、斑点杂交、流式细胞仪、透射及扫描电镜等方法 ,检测多单位核酶对慢粒细胞增殖活性及细胞超微结构、细胞周期、凋亡等的影响。结果 多单位核酶的体外切割活性为 70 .8% ,逆转录病毒载体转染慢粒K5 6 2细胞系后 ,细胞DNA合成及细胞增殖受到明显抑制 ,转染后 96h抑制率达 5 0 %左右。多单位核酶转染细胞后能够有效切割细胞RNA ,使转染细胞RNA减少 10 0 0倍左右。流式细胞仪检测显示多单位核酶转染 72h后 ,18.4 %的细胞发生凋亡 ,大多数细胞被阻滞于G期 ,分裂期 (S期 )细胞数减少约 4 1.9%。透射、扫描电镜见转染细胞出现核固缩、凋亡小体等细胞凋亡的特异性表现。结论 多单位核酶不仅具有较高的体外切割活性 ,而且其逆转录病毒载体能够有效转染慢?
冯琦孙秉中孙凯尚振川王莎王玮赵永同颜真韩苇张英起
关键词:慢性粒细胞白血病BCR-ABL基因核酶细胞凋亡基因治疗
caspase-3在慢性粒细胞白血病信号转导中的作用被引量:4
2009年
目的:探讨caspase-3在慢性粒细胞白血病信号转导中的作用。方法:用脂质体转染法将bcr3/abl2ASO导入K562细胞中,通过检测细胞凋亡、caspase-3表达和caspase-3活性的变化,观察caspase-3在慢性粒细胞白血病信号转导中的作用。结果:bcr3/abl2ASO可诱导K562细胞凋亡;正常情况下caspase-3在K562细胞中有一定量的基础表达和活性,分别为(1.13±0.1)和(0.025±0.001);而K562发生凋亡时,caspase-3水平明显升高,其表达和活性分别为(2.93±0.6)和(0.903±0.003)。结论:caspase-3通过介导凋亡信号而在慢性粒细胞白血病信号转导中起重要作用。
尚振川宋霆婷孙秉中侯严堂冯琦张涛邓涛
关键词:慢性粒细胞白血病反义寡核苷酸CASPASE信号转导
Exosomes致敏的脐血树突细胞介导的抗K562细胞作用被引量:1
2006年
目的分离K562细胞释放的exosomes,致敏脐血树突细胞(dendritic cell,DCs),观察其对细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)的激活效应。方法离心超滤和蔗糖密度梯度离心法分离K562细胞释放的exosomes,固相免疫电镜法(SPIEM)制备exosomes的HSP70、ICAM-1及ABL免疫电镜标本。常规方法从脐血单个核细胞诱导DCs并分离T细胞,将K562细胞来源的exosomes冲击或未冲击的DCs与T细胞共培养。MTT比色法检测体外细胞毒活性。结果K562细胞分泌的exosomes为直径50~100nm的膜性微囊。Exosomes致敏的脐血DCs激活CTLs的能力显著高于肿瘤冻融抗原致敏的DCs组,在效靶比为50:1时,两组CTLs对l(562细胞的杀伤率为(68,4%vs35.3%,P〈0.05)。结论K562细胞分泌的exosomes负载脐血DCs后活化CTLs,有抗肿瘤活性。
卜宁李奇灵孙秉中张涛冯琦乔庆大
关键词:EXOSOME脐血K562细胞系
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