安徽省人才开发基金(2008Z022)
- 作品数：13 被引量：41H指数：4
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- 相关机构：安徽农业大学更多>>
- 发文基金：安徽省人才开发基金国家现代农业产业技术体系建设项目安徽省国际科技合作基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 柞蚕肠道菌群分析及产酶菌的筛选与鉴定被引量：16
- 2011年
- 【目的】研究柞蚕肠道菌群结构及产酶菌,探寻具有新的生理功能的微生物,用于研制微生态制剂,以提高柞蚕生产的叶丝转化率及抗病能力。【方法】采用培养法分离柞树叶饲喂的5龄柞蚕幼虫肠道细菌,通过生理生化特性结合16S rDNA系统发育分析,对其肠道细菌群落类型进行鉴定,采用筛选培养基筛选产纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶的菌株。【结果】获得的柞蚕肠道菌有芽孢杆菌、葡萄球菌、肠杆菌,其中以芽孢杆菌为主要菌群。芽孢杆菌是肠道菌中产纤维素酶、蛋白酶的主要菌群;葡萄球菌产蛋白酶能力较弱;肠杆菌不产酶。【结论】柞蚕肠道菌与家蚕肠道菌群结构相似,筛选出的产酶菌活性较高,可以制备微生态制剂用于蚕业生产。
- 邹昌瑞魏国清刘朝良朱保建王在贵杨文静
- 关键词：柞蚕肠道菌菌群结构
- 柞蚕核糖体蛋白基因S3a的克隆及表达分析被引量：2
- 2010年
- 核糖体蛋白在蛋白质的生物合成、细胞的代谢与凋亡、机体免疫、信号转导等方面有重要作用。采用RT-PCR方法克隆了柞蚕(Antheraea pernyi)核糖体蛋白基因S3a的开放阅读框(ORF),ORF序列长795bp,编码264个氨基酸。序列比对表明,柞蚕S3a蛋白与其它10个物种S3a蛋白的相似性介于72%～99%之间,其中与柳蚕(Actias selene)S3a蛋白的相似性最高。用RT-PCR方法分析该基因在柞蚕幼虫组织中的表达情况,结果显示柞蚕S3a基因在柞蚕幼虫的血液、中肠、丝腺和脂肪体组织中均有表达,且转录水平无显著差异。SDS-PAGE和Westernblotting检测显示柞蚕S3a基因在大肠杆菌中获得了正确表达。
- 朱保建刘朝良刘秋宁
- 关键词：柞蚕基因克隆
- 柞蚕铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与表达分析被引量：6
- 2009年
- 超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内的重要保护性酶类。采用RT-PCR方法克隆了柞蚕(Antheraea pernyi)铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因的ORF序列。生物信息学分析表明,该序列共编码154个氨基酸,具有Cu/Zn-SOD的保守性结构特征,与家蚕(Bombyxmori)、美国白蛾(Hyphantria cunea)、野桑蚕(Bombyx mandarina)以及果蝇(Drosophila melanogaster)Cu/Zn-SOD基因的同源性分别是81.5%、81.7%、81.5%、66.7%。柞蚕蛹经紫外线照射处理后用半定量PCR方法检测,发现照射不同时间脂肪体内Cu/Zn-SOD基因的转录水平存在差异,在照射5 min后开始增加,至10 min时为转录高峰,15 min时又呈下降趋势。
- 姚立虎朱保建刘朝良魏国清吴祥曹甲钱岑汤良文周炎
- 关键词：柞蚕铜锌超氧化物歧化酶基因克隆同源性分析
- 柳蚕异柠檬酸脱氢酶基因cDNA的克隆与表达分析
- 2009年
- 异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)是生物体内一种重要的氧化还原酶。根据已报道的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸异柠檬酸脱氢酶(NADP-IDH)基因的保守性序列设计引物,以柳蚕(Actias seleneHubner)蛹脂肪体cDNA为模板,经PCR扩增获得了柳蚕IDH基因的部分序列。该序列长1 269 bp,编码412个氨基酸,与家蚕IDH基因的cDNA序列同源性达82.5%。柳蚕IDH与果蝇、赤拟谷盗、斑马鱼、人、大鼠、库蚊、人体虱、恶性疟原虫IDH的氨基酸序列同源性在70%左右,具有较高的保守性。半定量PCR检测结果表明,柳蚕IDH基因在蛹期不同组织中均有表达,且表达量没有显著差异。
- 吴祥刘朝良朱保建魏国清王在贵姚立虎钱岑汤良文周炎曹甲
- 关键词：柳蚕克隆同源性分析
- 柳蚕丝素重链基因(Fib-H)cDNA 5′端片段的克隆与表达分析被引量：1
- 2010年
- 柳蚕(Actias selene Hübner)是鳞翅目大蚕蛾科的一种珍稀野生绢丝昆虫。利用RT-PCR方法克隆了柳蚕丝素重链基因(Fib-H)cDNA 5′端的一个片段,该片段序列长819 bp,编码273个氨基酸,含有4个保守多聚丙氨酸结构域。序列比对分析表明,该片段序列与樟蚕(Saturnia japonica)、天蚕(Antheraea yamamai)、柞蚕(Antheraea pernyi)、印度柞蚕(Antheraea mylit-ta)和家蚕(Bombyxmori)的Fib-H基因cDNA 5′端同源序列的相似性分别为72.5%、65.8%、65.1%、65.1%、47.1%。半定量PCR分析显示柳蚕Fib-H基因cDNA 5′端片段序列在5龄幼虫第1-12天的表达量呈现逐渐上升的趋势。
- 曹甲刘朝良朱保建魏国清王在贵钱岑
- 关键词：柳蚕
- 家蚕限性育种研究进展
- 本文就家蚕限性品种种类、目前育成的主要限性品种以及国内外限性育种研究方法、研究现状、在家蚕生产中的应用与前景进行了概述。
- 魏国清赵小明刘朝良
- 关键词：家蚕限性品种分子育种
- 文献传递
- 基于18S rRNA和线粒体16S rRNA基因序列的柳蚕进化分析被引量：2
- 2010年
- 为探讨柳蚕Actias selene Hübner与鳞翅目昆虫的系统发育关系,本研究利用PCR扩增获得了柳蚕核糖体18S rRNA和线粒体16S rRNA基因的部分序列,长度分别为391bp和428bp。并采用邻近距离法(NJ)、最大简约法(MP)、类平均聚类法(UPGMA)构建系统进化树。结果表明,柳蚕线粒体16SrRNA基因序列与大蚕蛾科昆虫的16SrRNA基因序列均表现出偏好于碱基AT的倾向。柳蚕与所研究的其它蚕类的遗传距离介于0.016至0.140之间,其中与温带柞蚕Antheraea roylii的遗传距离最小,与野桑蚕Bombyx mandarina的遗传距离最大。而基于鳞翅目昆虫18S rRNA基因部分序列的进化分析显示,柳蚕与柞蚕Antheraea pernyi之间的遗传距离最小(0.010),与蓖麻蚕Samia ricini的遗传距离最大(0.017)。
- 朱保建刘朝良曹甲李旭全魏国清
- 关键词：柳蚕RNA线粒体16SRRNA进化分析
- 饲料中转基因成分对家蚕生长发育的影响
- 2011年
- 采用家蚕(Bombyx mori)H_9品种作为实验动物,分别用转基因和非转基因大豆粉制作的人工饲料进行饲育。通过饲育试验,比较分析了不同处理后家蚕的龄期经过时间、全茧量、茧层量、茧层率、蛹体重、疏毛率、死亡率、每龄眠起体重等经济性状指标。同时采用PCR方法对转基因饲料饲育后家蚕组织中外源基因的表达情况进行了检测。结果显示,含转基因大豆粉的人工饲料对家蚕的生长发育并无显著影响,且不存在外源基因的污染。
- 孙丽丽刘朝良朱保建魏国清王在贵曹甲钱岑高红梅
- 关键词：家蚕转基因人工饲料经济性状
- 柳蚕S3a基因的鉴定及原核表达分析被引量：4
- 2010年
- 采用RT-PCR法克隆了柳蚕S3a基因序列,并通过构建重组质粒,对其进行了原核表达及蛋白纯化。柳蚕S3a基因ORF长度为795 bp,编码264个氨基酸,预测蛋白的等电点和分子量大小分别为9.74和30 kD。序列比对及进化关系表明,柳蚕S3a蛋白与其他物种S3a蛋白相似度介于71%和97%之间,其中与鳞翅目昆虫的同源性最高。SDS-PAGE和Western blotting结果显示柳蚕S3a在大肠杆菌中获得了高效表达,分离获得的重组蛋白的纯度较高。
- 朱保建刘朝良钱岑曹甲
- 关键词：柳蚕克隆
- 柞蚕热休克蛋白70基因的克隆和序列分析被引量：2
- 2011年
- HSP70蛋白是受热等因素刺激后而诱导产生的蛋白质,是热休克蛋白家族中最重要的一员。采用RT-PCR方法克隆了柞蚕(Antheraea pernyi)热休克蛋白70基因(HSP70)的ORF序列(GenBank登录号:GU945199),该片段的序列长度为1905bp。生物信息学分析表明,该序列共编码634个氨基酸,预测蛋白的等电点和分子量大小分别为5.62kD和69.5kD。具有HSP70的保守性结构特征,与天蚕(Antheraea yamamai)、家蚕(Bombyx mor)、甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae)、棉铃虫(Heliothis viriplaca)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)、烟草夜蛾(Manduca sexta1)、膜翅目寄生蜂(Cotesia rubecula)的同源性分别为95.7%、78.5%、76.1%、77.3%、76.6%、74.7%、65.9%。根据它们的一级结构构建了系统进化树,进一步确立了它们之间的亲缘关系。
- 孙茜刘朝良朱保健刘秋宁
- 关键词：柞蚕基因克隆同源性分析
