南京市卫生局医学科技发展项目(ZKM06045)
- 作品数：3 被引量：24H指数：2
- 相关作者：赵德育顾海燕王全李婵娟吴越更多>>
- 相关机构：南京医科大学第二附属医院南京医科大学更多>>
- 发文基金：南京市卫生局医学科技发展项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 1,25二羟维生素D_3对小鼠成骨细胞增殖分化及维生素D受体表达的影响被引量：10
- 2009年
- 目的研究不同浓度1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对小鼠成骨细胞增殖分化及维生素D受体(VDR)表达的影响,探讨VDR在成骨细胞增殖分化中的作用。方法在成骨细胞株MC3T3E1培养液中加入不同浓度的1,25(OH)2D3(10-8、10-9、10-10mol/L),培养48h后应用噻唑蓝(MTT)比色法检测其对成骨细胞增殖的影响,采用细胞培养上清中骨钙素(OC)水平分析方法检测1,25(OH)2D3对成骨细胞分化的影响;采用SYBR Green荧光定量PCR方法检测细胞VDR基因mRNA表达,Western blot法检测细胞VDR蛋白水平表达。结果1.小鼠成骨细胞在1,25(OH)2D3处理48h后,各实验组(10-8、10-9、10-10mol/L组)吸光度均低于对照组,差异均有统计学意义(Pa<0.05);2.1,25(OH)2D3处理后,10-8、10-9mol/L组细胞上清中OC水平均高于对照组(Pa<0.05),而10-10mol/L组OC水平及VDR基因mRNA表达量与对照组比较差异均无统计学意义(Pa>0.05);3.荧光定量PCR及Westernblot结果显示10-8、10-9mol/L处理组细胞VDR基因mRNA及蛋白表达均显著高于对照组(Pa<0.05),10-10mol/L组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论1,25(OH)2D3可显著抑制成骨细胞增殖、促进成骨细胞分化,且可促进成骨细胞VDR表达,提示VDR信号通路在成骨细胞的增殖分化中可能起一定作用。
- 顾海燕李婵娟王全吴越郭锡熔赵德育
- 关键词：1,25二羟维生素D3成骨细胞维生素D受体
- RNA干扰沉默VDR基因对小鼠成骨细胞Dmp1、Cbfa1及BMP-2 mRNA表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:利用RNA干扰技术,阻断VDR在小鼠成骨细胞株mc3t3-E1中的表达,观察VDR表达受抑后对小鼠成骨细胞Dmp1、Cbfa1及BMP-2基因mRNA表达的影响。方法:针对小鼠VDRmRNA144、594、852、3628位点设计、合成4对21核苷酸siRNA(siRNA1、siRNA2、siRNA3、siRNA4);在阳离子脂质体介导下转染mc3t3-E1细胞,以空白及非特异性siRNA作为对照,各组于转染24h及72h后收集细胞分别抽提RNA及蛋白。采用RT-PCR法检测细胞中VDRmRNA表达水平的改变,Westernblot法检测VDR蛋白表达的变化,从而筛选有效序列。进一步应用SYBRGreen荧光实时PCR方法定量检测成骨细胞功能基因-Dmp1、Cbfa1及BMP-2基因mRNA表达情况。结果:与空白对照组相比,转染siRNA3、siRNA4的mc3t3-E1细胞VDRmRNA和蛋白表达明显下调(P<0.01),转染siRNA1、2及非特异性siRNA的mc3t3-E1细胞VDR的表达与对照组相比无显著差异(P>0.05)。荧光定量PCR结果显示,转染siRNA3、siRNA4的mc3t3-E1细胞Dmp1、Cbfa1、BMP-2mRNA表达明显下调(P<0.01)。结论:针对小鼠VDRmRNA852、3628位点设计、合成的siRNA可有效抑制小鼠成骨细胞株VDR的转录和表达;VDR表达受抑可下调mc3t3-E1细胞功能基因Dmp1、Cbfa1、BMP-2mRNA的表达;VDR在维持成骨细胞功能中起着一定的作用。
- 李婵娟顾海燕赵德育刘晓梅张翔
- 关键词：牙本质基质蛋白1核心结合因子Α1骨形态发生蛋白2
- 维生素D缺乏对子代大鼠肺形态结构及血小板源性生长因子-A表达的影响被引量：12
- 2011年
- 目的研究孕期维生素D(VitD)缺乏对子代大鼠肺形态发育及血小板源性生长因子-A(PDGF-A)表达的影响。方法雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组、VitD缺乏模型组(每组6只)。对照组正常饲养;模型组予以避光、不含VitD的饲料喂养,2周后与成熟SD雄性大鼠交配,每组取孕20 d的胎肺及生后1 d新生鼠肺,光镜及电镜下观察肺形态结构,RT-PCR及Western blot分别检测肺组织PDGF-A mRNA及蛋白水平的表达。结果光镜下,模型组子鼠肺泡平均表面积、平均呼吸膜周径均小于对照组(P<0.05),平均肺泡间隔厚度大于对照组(P<0.05);电镜下,模型组子鼠的板层小体数量明显少于对照组,成熟细胞器较少见。RT-PCR及Western blot结果显示模型组子鼠肺组织PDGF-A mRNA和蛋白表达水平均低于对照组(P<0.05)。结论孕期VitD缺乏抑制孕晚期胎鼠及新生大鼠的肺形态发育。VitD缺乏能显著抑制肺组织PDGF-A表达;PDGF-A表达减低可能是VitD缺乏抑制大鼠肺发育的重要机制之一。
- 顾海燕赵德育王全
- 关键词：维生素D血小板源性生长因子-A
