国家科技支撑计划(2012BAI31B04)
- 作品数：15 被引量：29H指数：4
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- 相关机构：复旦大学上海市计划生育科学研究所云南中医学院更多>>
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- dl-扁桃酸对精子质膜及顶体的完整性和线粒体膜电位的影响被引量：2
- 2015年
- 目的：研究dl-扁桃酸（dl-mandelic acid）的抑精作用及其机制。方法：dl-扁桃酸0.5-10.0g·L^-1处理高活力精子20 s,计算机辅助精子分析仪（computer assistant spermanalysis,CASA）测定精子活率、精子直线运动速率（VSL）、曲线运动速率（VCL）、平均路径速率（VAP）、侧摆幅度（ALH）、精子运动向前性（STR）和精子运动直线性（LIN）;流式细胞（SYBR-14/PI）检测精子质膜完整性,采用FITC标记的豌豆凝集素荧光染色观察精子顶体完整性;FITC-PSA/PI/JC-1荧光染色检测精子线粒体膜电位变化。结果：随着dl-扁桃酸浓度的升高,精子活率与精子直线运动速率（VSL）、曲线运动速率（VCL）、平均路径速率（VAP）、侧摆幅度（ALH）、精子运动向前性（STR）和精子运动直线性（LIN）显著降低,dl-扁桃酸抑制精子活率的半数有效浓度（EC50）约为1.25 g·L^-1,最低有效浓度（MEC）约为2.5 g·L^-1。流式细胞仪检测表明,dl-扁桃酸对精子质膜完整性无影响。荧光染色检测表明,dl-扁桃酸处理组精子顶体受损,精子线粒体膜电位降低。结论：dl-扁桃酸通过影响精子顶体和降低线粒体膜电位,对精子起到抑制作用。
- 夏敏杰芦洁黄超职瑞娜李卫华丁训城
- 关键词：精子顶体线粒体膜电位
- 脱氧胆酰酪氨酸热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜免疫炎症反应的研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨脱氧胆酰酪氨酸热敏凝胶剂(deoxycholyltyosine thermoreversible gel,DCT gel)对小型猪阴道黏膜的炎性细胞数量及活化状态的影响。方法将9只雌性小型猪随机分为基质对照组、壬苯醇醚胶冻剂(Nonxgnol-9gel,N-9 jelly)组和DCT gel组,肌注苯甲酸雌二醇12 d后开始阴道给药,每天1次连续给药7 d,在末次给药后24与72 h,收集阴道灌流(Cervicovaginal lavage,CVL)液,流式细胞仪计数炎性细胞和中性粒细胞数目,并对CD45+细胞进行表型分析,比较不同给药组之间的差别。结果 DCT gel组CVL液中炎性细胞、中性粒细胞数目以及CD45+细胞数目明显低于N-9 jelly组(P<0.001),与基质对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论脱氧胆酰酪氨酸热敏凝胶剂(DCT gel)不会引起小型猪阴道黏膜的明显刺激,未诱导局部炎性细胞的活化,作为外用杀精剂具有一定的临床应用前景。
- 温成丽王玉柱职瑞娜夏敏杰黄超李卫华丁训诚
- 关键词：流式细胞术小型猪炎症
- 链状酰胺类化合物B07的体外杀精效果及其对精子质膜的影响被引量：2
- 2014年
- 目的：研究一种链状酰胺类化合物（B07）的体外杀精作用及其对精子质膜的影响。方法：上游收集高活力人类精子分别与0μg／ml（对照组），5-640μg／mlB07作用30min，随后用计算机辅助精液分析仪分析记录精子的活率及运动参数；用160μg／mlB07与精子作用，记录5min、30min、60min和120min时精子活动率：处理后的精子一部分经SYBR-14／PI双染后用荧光显微镜观察，另一部分通过电子显微镜来观察质膜的变化情况；并以壬苯醇醚科9）作为阳性对照。结果：随着B07浓度的升高，精子活率和活力呈下降趋势，最低有效浓度（MEC）为640gg／ml；荧光显微镜下经B07处理的精子呈橙色，而N9处理的精子呈红色；电子显微镜显示B07组精子头部肿胀起泡，尾部针孔样损伤，N9组精子呈溶解性改变。结论：B07具有体外杀精作用，且该作用有时间和浓度依赖性。且其对精子质膜的影响小于N9。
- 职瑞娜陆路戴秋云王玉柱黄超夏敏杰丁训城李卫华姜世勃
- 关键词：人类精子杀精质膜
- 阴道用壬苯醇醚即型凝胶的制备与评价被引量：1
- 2014年
- 目的制备以泊洛沙姆为基质的温度敏感型阴道用壬苯醇醚即型凝胶，并评价其流变学性能与体内滞留能力。方法利用倒置试管法测定胶凝温度，通过单因素实验考察泊洛沙姆与药物浓度对胶凝温度的影响。以相位角变化表征凝胶的相变过程，分别测试在模拟的储存、运输和使用状态下凝胶的流变学性质，并考察阴道模拟液稀释对凝胶相转变过程的影响。使用近红外荧光探针标记凝胶。小动物活体成像评价凝胶在小鼠体内的滞留能力。结果通过处方优化制得的凝胶其胶凝温度为（31．5±2）℃，相转变过程在3～4℃内完成，使用黏度（6．50Pa·s）〉储存黏度（1．023Pa·s）〉运输黏度（0．291Pa·s），且经阴道模拟液稀释后在体温条件下能形成凝胶。该凝胶在小鼠阴道内滞留时间长达4h。结论该凝胶的胶凝温度适宜，流变学性质良好，在阴道内滞留时间较长，满足阴道用药的要求。
- 杨富金陈凌云俸灵林魏刚陆伟跃
- 关键词：壬苯醇醚泊洛沙姆即型凝胶流变学
- Influence of Poloxamer Composition on the Properties of Thermosensitive in Situ Hydrogel for Vaginal Administration Reflects Better in Rats than in Mice
- Objective To investigate the influence of formula composition on the in vitro and in vivo performance of polox...
- Yu LiuFujin YangLinglin FengLong YangLingyun ChenGang WeiWeiyue Lu
- 文献传递
- dl-扁桃酸对人精子与阴道黏膜上皮VK2/E6E7细胞的毒性研究被引量：4
- 2015年
- 目的探讨dl-扁桃酸对人阴道黏膜上皮细胞(VK2/E6E7)与精子的细胞毒性损伤。方法不同浓度的dl-扁桃酸处理高活力精子20 s,计算机辅助精子分析仪测定精子活率,扫描电子显微镜检测精子受损情况。1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸和4.0 g·L?1壬苯醇醚(nonoxynol-9,N-9)处理VK2/E6E7细胞,MTT法检测细胞活性,ELISA试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率,并用流式细胞法检测细胞凋亡率。结果 dl-扁桃酸抑制精子活率的半数有效浓度约为1.25 g·L?1,最低有效浓度约为2.5 g·L?1。扫描电镜结果显示,dl-扁桃酸处理组精子表面结构与对照组形态相似,无明显受损特征,N-9组精子严重受损。MTT实验结果表明,1.25 g·L?1 dl-扁桃酸组细胞存活率>95%,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸组细胞存活率约为50%。1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸处理组LDH释放量只有微量检出,远低于N-9组。流式细胞检测表明,1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸处理组中活细胞和晚期凋亡比例与对照组相近,早期凋亡细胞略少于对照组,死亡细胞稍多于对照组,N-9组大量细胞死亡。结论 dl-扁桃酸对VK2/E6E7细胞毒性远低于N-9,其对精子的抑制作用不是通过破坏精子质膜与鞭毛来实现。
- 夏敏杰王玉柱黄超丁训城李卫华芦洁
- 关键词：壬苯醇醚细胞毒性
- 液质联用法同时测定新西兰兔血浆中左炔诺孕酮和炔雌醇及其药动学
- 2016年
- 目的建立液质联用(HPLC-MS/MS)测定新西兰兔血浆中左炔诺孕酮(LNG)和炔雌醇(EE)含量的方法,并研究LNG/EE避孕贴剂多次给药后新西兰兔体内的药动学特征。方法 6只雌性新西兰兔给予LNG/EE避孕贴(5 cm×4 cm,标示量为LNG 5.35 mg,EE 0.11 mg),1次/3 d,连续给药10次,分别于给药后不同时间点进行耳缘静脉采血,血浆样品经丹酰氯衍生化后,采用液质联用方法(HPLC-MS/MS)测定血浆中LNG(内标孕三烯酮)和EE(内标氘代炔雌醇)的血药浓度,并采用DAS3.0软件计算主要药代动力学参数。结果 LNG的线性范围为0.1~20μg·L-1,最低定量限为0.1μg·L-1,提取回收率均大于92%,日内、日间精密度(RSD)均小于15%。首次给药后LNG的药代动力学参数:Cmax为(8.10±2.38)μg·L-1,Tmax为(2.38±1.45)h,AUC(0-t)为(142.35±36.99)μg·L-1·h-1;末次给药后LNG的药代动力学参数:Cmax为(7.05±1.07)μg·L-1,Tmax为(2.71±1.83)h、AUC-(0-t)为(141.95±22.31)μg·L1·h-1。EE的线性范围为0.02~5μg·L-1,最低定量限为0.02μg·L-1,提取回收率均大于85%,日内、日间精密度(RSD)均小于15%。首次给药后EE的药代动力学参数:C-max为(0.18±0.04)μg·L 1、Tmax为(2.50±1.30)h、AUC(0-t)为(2.65±0.56)μg·L-1·h-1;末次给药后EE的药代动力学参数:Cmax为(0.17±0.07)μg·L-1、Tmax为(2.17±0.26)h、AUC-1(0-t)为(2.02±0.82)μg·L·h-1。结论HPLC-MS/MS法灵敏,准确,可用于LNG和EE同时测定研究,新西兰兔多次给予避孕贴后体内血药浓度无蓄积。
- 李钊郭湘洁谢淑武周洁芸朱焰
- 关键词：左炔诺孕酮炔雌醇避孕贴药动学
- 脱氧胆酰酪氨酸热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜刺激的病理学评价
- 2014年
- 目的评价脱氧胆酰酪氨酸热敏凝胶剂(DCT gel)的小型猪阴道黏膜刺激性。方法将9只雌性小型猪随机分为空白胶组、DCT-gel组和市售壬苯醇醚凝胶(N-9 jelly)组,阴道给予5 ml凝胶,每日1次,连续给药7 d,末次给药72 h后处死小型猪,取阴道组织,观察阴道黏膜组织病理学改变;免疫组化法检测阴道黏膜内CD45的表达。结果小型猪阴道黏膜组织HE染色显示DCT gel对黏膜上皮层、固有层、血管及周围组织无明显损伤(5.5±2.7),与空白胶组相比差异无统计学意义(3.3±1.6),远低于N-9 jelly组(20.5±3.5,P<0.05);与空白胶组相比,DCT gel组的阴道黏膜CD45表达差异无统计学意义(P>0.05),N-9 jelly组CD45表达显著增加(P<0.05)。结论 DCT gel对小型猪阴道黏膜刺激性较小,作为阴道外用杀微生物剂具有一定的应用前景。
- 田芳王玉柱职瑞娜夏敏杰温成丽王忠辉周新初李卫华
- 关键词：小型猪阴道黏膜CD45
- 去氧胆酰酪氨酸对人类精子质膜完整性和细胞凋亡的影响
- 2014年
- 目的探讨去氧胆酰酪氨酸(DCT)对人类精子活力、质膜完整性以及凋亡的影响。方法上游高活力人类精子分别与DCT 0.25,0.5和1.0 g·L-1作用20 min,取精子悬液分析精子活率(SM)和活力(SV);SYBR-14/PI双染后经过荧光显微镜和流式细胞仪观察质膜完整性,AnnexinⅤ/PI双染流式细胞仪分析细胞凋亡。结果 DCT对SM和SV均有显著的抑制作用,且存在量-效关系(rSV=0.91,rSM=0.88,P<0.05)。质膜完整性结果显示,质膜破损精子在DCT 0.25,0.5和1.0 g·L-1时质膜破损精子百分率分别为(54.3±9.8)%,(73.8±3.5)%和(80.6±8.3)%,与空白对照组具有明显差别(P<0.05),且具有明显的量效关系(r=0.91,P<0.05)。凋亡实验结果显示,晚期凋亡精子百分率在0.25,0.5和1.0 g·L-1时,分别是(11.9±1.2)%,(30.1±6.3)%和(75.6±6.3)%,具有明显的浓度依赖性(r=0.98,P<0.05)。DCT≤0.5 g·L-1引起精子早期凋亡率升高,但是高浓度时却出现降低趋势。结论 DCT不仅破坏精子质膜完整性,同时诱发精子凋亡,导致受精能力降低或消失。
- 温成丽职瑞娜王玉柱黄超李卫华丁训城
- 关键词：精子获能细胞凋亡
- 基于泊洛沙姆的原位凝胶在黏膜途径给药中的应用被引量：7
- 2014年
- 作为一种新型的生物黏附给药系统,以泊洛沙姆为基质的温度敏感型原位凝胶具有使用方便、顺应性良好、延长药物滞留时间、改善药物生物利用度等多种优势,在黏膜途径给药中具有广阔的应用前景。本文综述以泊洛沙姆为基质的原位凝胶的形成机制、制备方法、流变学性质、药物释放及在黏膜途径给药中的应用。
- 杨富金陈凌云魏刚
- 关键词：泊洛沙姆原位凝胶
